饲粮中小麦次粉添加比例对肉兔屠宰性能、血液免疫指标和十二指肠组织形态的影响

刘 梅，赵晓岩,2，杨桂芹，田 河，李建涛，李方方，郭东新

（1.沈阳农业大学动物科学与医学学院，沈阳 110161；2.新希望六和股份有限公司,山东青岛 266100）

玉米是畜禽饲料的主要能量来源，随着养殖市场对玉米需求日益增大，玉米价格不断攀升，导致饲料生产和养殖成本逐渐升高，寻找玉米的替代品具有重要意义。小麦次粉是小麦面粉加工过中的副产品，淀粉含量较高，营养价值和玉米相当，蛋白质水平、粗纤维以及赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸等限制性氨基酸含量、钠、镁、铁、锌、铜、锰等矿物质元素均高于玉米[1]，但价格较玉米低，在兔饲料中用小麦次粉替代部分玉米，有助于获得更好的生产和养殖收益。小麦次粉中含有较高的抗营养成分-水溶性非淀粉多糖(NSP)，阻碍了肠道对营养物质的消化吸收和小麦次粉在饲料生产中的应用。高淑霞等[2]研究表明，在长毛兔饲粮中添加5%～20%的小麦次粉，在不添加可降解NSP相关酶的条件下，对长毛兔的生产性能无显著影响，但可有效降低饲料成本，提高经济效益。陈家村等[3]用小麦次粉替代玉米饲喂育肥猪，肥猪生长快、饲料报酬高，经济效益显著。李燕平等[4]研究表明，饲粮添加小麦次粉成粉β-葡聚糖可提高肉兔平均日采食量和平均日增重，增加免疫器官指数，提高机体的免疫力和消化吸收代谢能力。用小麦次粉替代玉米，在猪及家禽方面研究较多，但在肉兔方向的研究鲜见报道。本课题组前期研究表明，用小麦次粉部分替代玉米，对肉兔生长性能没有显著影响，但显著降低了肉兔血清总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇含量[5]。本试验是在前期研究的基础上，进一步研究饲粮中小麦次粉添加比例对肉兔屠宰性能、血液免疫指标、十二指肠组织形态及盲肠内环境的影响，探讨肉兔饲粮中小麦次粉最适添加比例，为小麦次粉在肉兔生产中的合理应用提供科学参考。

1 材料与方法

1.1 材料

本试验所用小麦次粉购自山东省聊城市便民面粉厂，其主要营养成分实测值见表1。

表1 小麦次粉主要营养成分含量Table 1 Main nutrient content of wheat shorts

1.2 试验设计、饲粮配方及试验动物的饲养管理

本试验采用单因素随机化试验设计，在等能量等蛋白质条件下，设5个处理组，各组饲粮中小麦次粉添加比例分别为0%(对照组)、3%、6%、9%、12%(表2)。

表2 饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 2 Composition and nutrient levels of experiment diets(air-dry basis) %

选择100只平均体重为(870～1050)g，健康状况良好的肉兔，随机分成5组，每组4个重复，每个重复5只兔，单笼饲养，分别饲喂以上5种不同小麦次粉添加比例的饲粮。预试期7d，正式期35d。饲养试验在沈阳富宁兔业有限公司进行。试验开始前，对兔舍进行彻底消毒，试验兔的驱虫、保健、免疫等工作按兔场常规程序进行。所有试验肉兔均在同一兔舍，并保证其处于相同的管理及卫生条件。在预试期，完成由兔场饲粮到试验饲粮的过渡。试验期肉兔自由采食和饮水，每日喂料2次，饲料添加量以料槽内略有剩余为准。

1.3 测定指标及方法

1.3.1 屠宰性能饲养试验结束后，在每个重复组中随机选取1只肉兔，进行屠宰性能的测定。屠宰前禁止采食12h，禁止饮水4h。宰前称量活体重记为宰前活重，宰后称取胴体重、全净膛重及肝脏和脾脏的重量，计算屠宰率、全净膛率、肝脏指数及脾脏指数。

1.3.2 血清免疫指标的测定屠宰前进行心脏采血，放入促凝管中促凝，待血液凝固后提取血清，置于5mL离心管中用封口膜封口，液氮速冻后置于-80℃冰箱冷冻保存，待后期检测免疫指标。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)。试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.3.3 十二指肠组织形态指标的测定参照文献[6]，屠宰后，取十二指肠，将内容物用生理盐水洗净后，截取中间位置平整的4cm的肠管放入福尔马林溶液中固定保存备用。

组织切片的制作：参照文献[7],将福尔马林溶液固定好以后的肠管取出，用无水乙醇脱水3次后，截取平整的肠管1cm，用二甲苯进行透明，之后用融化状态下的石蜡对肠管进行包埋，包埋过程中一次完成，同时要使肠管中也充满石蜡。待石蜡冷却硬化后进行切片，切片厚度7μm，用HE染色法染色，最后用中性树胶封固。在显微镜下观察并选取10个典型的视野(绒毛完整，走向平直)，每个视野选取最长绒毛高度及相应的隐窝深度进行测定，计算绒毛高度与隐窝深度的比值（V/C）。

1.3.4 盲肠内环境的测定(1)盲肠内容物pH值的测定：肉兔屠宰后马上将盲肠内容物取出并用校准后的数字酸度计测定pH值，每次测定后用蒸馏水对酸度计电极进行冲洗。(2)盲肠内容物NH3-N的测定：参照陈继红[8]关于NH3-N的方法。(3)盲肠内容物挥发性脂肪酸(VFA)的测定：参照谭剑蓉[9]关于VFA的测定方法。

1.4 统计方法

以重复为单位用SAS 9.4中的GLM过程，对试验数据进行方差分析，Duncan法多重比较，结果用“平均值±标准差”表示，p<0.05为差异显著。

2 结果与分析

2.1 饲粮中小麦次粉添加比例对肉兔屠宰性能的影响

由表3可知，不同小麦次粉添加比例对肉兔宰前活重、胴体重、屠宰率的影响无显著影响(p>0.05)。饲粮添加不同比例的小麦次粉肉兔全净膛率均高于对照组,其中,6%添加量组肉兔的全净膛率比对照组高29.79%(p<0.05)。

表3 饲粮中小麦次粉添加比例对肉兔屠宰性能的影响Table 3 Effects of different proportion of wheat shorts in diets on the slaughter performance of meat rabbits

2.2 饲粮中小麦次粉添加比例对肉兔肝脏指数、脾脏指数以及血清免疫指标的影响

由表4可知，饲粮不同小麦次粉添加比例对肉兔肝、脾指数及血清IgA、IgG和IgM浓度无显著影响(p>0.05)。

表4 饲粮中小麦次粉添加比例对肉兔肝脏指数、脾脏指数以及血清免疫指标的影响Table 4 Effects of different proportion of wheat shorts in diets on the liver index,spleen index and serum immune index of meat rabbits

2.3 饲粮中小麦次粉添加比例对肉兔十二指肠组织形态的影响

由表5可知，小麦次粉添加比例对肉兔十二指肠组织的绒毛高度，隐窝深度影响不显著(p>0.05)，但对V/C值有显著影响(p<0.05)，其中6%添加量组肉兔十二指肠V/C值显著高于12%添加量组(p<0.05)，但与其他各处理组之间差异不显著(p>0.05)。

表5 饲粮中小麦次粉添加比例对肉兔十二指肠组织形态的影响Table 5 Effects of different proportion of wheat shorts in diets on the morphology of duodenum of meat rabbits

2.4 饲粮中小麦次粉添加比例对肉兔盲肠内环境的影响

由表6可知，小麦次粉添加比例对肉兔盲肠内容物的乙酸、丙酸、丁酸及挥发性脂肪酸总量、盲肠内容物pH值、NH3-N含量均无显著影响(p>0.05)。但饲粮中小麦次粉添加比例为3%时，肉兔盲肠内容物中乙酸、丙酸、丁酸及挥发性脂肪酸总量浓度均最高，分别为48.68，8.80，8.38，65.87mmol·L-1，而pH值最低。饲粮中小麦次粉添加量为9%时，肉兔盲肠内容物中NH3-N浓度最低。

表6 饲粮中小麦次粉添加比例对肉兔盲肠内环境的影响Table 6 Effects of different proportion of wheat shorts in diets on the internal environment in cecum of meat rabbits

2.5 饲粮中小麦次粉添加比例对肉兔经济效益的影响

由表7可知，虽然随着小麦次粉的添加，饲料成本也在逐渐增加，但当市场肉兔价格在22～26元·kg-1时，6%的小麦次粉添加量的收益高出其他各组。

表7 饲粮中小麦次粉添加比例对肉兔经济效益的影响Table 7 Effects of different proportion of wheat shorts in diets on the economic benefits of meat rabbits

3 讨论与结论

小麦次粉较玉米含有更多的氨基酸等营养成分及动物生长所需的矿物质元素，同时也含有更多的NSP及少量的植酸酶，小麦次粉含有的NSP主要是阿拉伯木聚糖和β-葡聚糖，其在动物肠道内遇水产生粘性，影响肠道对营养物质的消化吸收[10-12]。杨人奇等[13]研究认为，小麦中NSP含量和AME呈负相关;而吴希颖[14]研究表明，在仔猪基础日粮中添加5%NSP对仔猪生长性能无显著影响；杜建等[15]研究表明，在育肥猪饲粮中添加100mg·kg-1的β-葡聚糖，对猪胴体及屠宰率没有显著影响；程宝晶等[16]试验结果显示，当小麦日粮中阿拉伯木聚糖含量较低时，对肉仔鸡肌肉生长发育影响不显著，但当含量较高时，则会对肉鸡的肌肉发育造成一定的影响。本试验日粮添加小麦次粉后，肉兔胴体重、屠宰率、全净膛重、全净膛率均有所提高，表明添加适量小麦次粉的对生长肉兔的生长有一定提升作用，其中6%添加量组作用显著。这可能与小麦次粉中植酸酶活性有关，小麦次粉较玉米含有较多的植酸酶，促进了饲料中与植酸结合的矿物质元素磷从蛋白-植酸-矿物元素复合物中释放出来，从而促进了营养物质吸收，改善了动物生长性能[17]；或者是由于一定比例的非淀粉多糖使食糜在肠道内流动速度减慢，导致肠道内营养物质吸收时间延长，相关的机理机制需要更深入的研究。

本试验中，添加小麦次粉对肝脏指数、脾脏指数均无显著影响，添加量大于3%时，肝重量有下降趋势，可能是饲粮能值降低，导致肝能量代谢水平降低的缘故，这与陈清华等[18]试验结果有相似之处。免疫器官的重量反映了免疫机能的强弱[19]，IgG、IgM、IgA在血清中的含量能够代表机体的免疫水平[20]。在本试验数据中，脾脏指数、血清IgG、IgM、IgA与对照组差异均不显著，表明适量添加小麦次粉不会影响肉兔的免疫机能。

小肠是动物机体营养物质消化吸收的主要部位，小肠绒毛可以提高肠内壁的吸收面积以提高营养物质的消化吸收。隐窝是肠道细胞分化的部位，肠道绒毛高度增加或隐窝变浅表明肠道黏膜形态较好，反之则表明黏膜受到损伤[21]。GOODLAD等[22]认为，V/C值能够更为完整地评价肉兔肠道的发育情况。当V/C值增大时肠道发育程度和功能比较完善，对食糜中的营养成分吸收能力提高，肉兔的生长速度增快；当V/C值下降时，肠道的吸收能力下降。贺永慧等[23]在大鼠基础日粮中按0%、2%、3%、4%添加从小麦麸皮中提取的NSP，发现随着日粮中NSP水平的提高，大鼠小肠各段绒毛高度线性降低，十二指肠、空肠的隐窝深度线性增加。吴希颖[14]研究表明，β-葡聚糖显著提高了仔猪小肠V/C值；李凌燕等[24]研究表明，中、低剂量的小麦阿拉伯木聚糖提取物对成年昆明小鼠小肠绒毛高度、肠腺高度及绒毛与肠腺高度比值均显著增加，而高剂量组的绒毛高度及比值降低，本试验结果与吴希颖、李凌燕试验结果有相似之处。与贺永慧研究结果的不同可能是由于NSP含量的不同引起的。本试验中，低于6%添加量时，但并未影响肠道双歧杆菌等有益菌益生菌对NSP成分的分解作用，分解产物阿拉伯木聚糖低聚糖苷促进了试验肉兔小肠黏膜细胞的分裂增殖。另外，较低添加量的饲料可能更有利于小麦次粉赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸等限制性氨基酸等营养成分在消化道内被小肠消化吸收，对小肠绒毛的生长也具有一定的促进作用。但当小麦次粉含量过高时，肠道内食糜粘度增加，双歧杆菌等有益菌可作用的底物数量减少，导致肠道内刺激肠黏膜细胞的分裂增殖的阿拉伯木聚糖低聚糖苷含量减少，进而导致小肠粘膜分裂增殖减缓或消失。MONTAGNE等[25]认为，高黏性食糜也可以增加小肠绒毛损失率，从而导致小肠绒毛萎缩，隐窝深度增加。本试验结果表明，中、低剂量组的次粉中添加量对肠道吸收作用具有提升作用。

家兔为后肠消化动物，它们的大部分消化发生在大肠和盲肠。良好的盲肠内环境可以为盲肠中有益菌的繁殖及菌群稳定提供良好条件，使肉兔饲料在盲肠中更好的发酵以提高其生长发育。盲肠内发酵产生的挥发性脂肪酸大多数是乙酸，其次是丁酸和丙酸，它们为家兔体内的能量物质并对能量具有供贮作用。NH3-N是饲料蛋白质和内源尿素的分解产物，同时也是盲肠内微生物合成菌体蛋白的原料，盲肠内NH3-N浓度在一定程度上反映了盲肠微生物分解含氮物质产NH3-N的速度极其对NH3-N的摄取利用情况。吴希颖[14]研究表明，在仔猪饲料中添加5%的NSP显著提高了仔猪回肠中乙酸含量，β-葡聚糖提高了盲肠中短链脂肪酸(特别是丁酸)含量，同时降低了盲肠pH值，而木聚糖显著降低了盲肠中丁酸含量。周万才[26]研究认为，可溶纤维替代淀粉可以提高肉兔对养分的消化率，促进生长性能和盲肠的发酵效率。赵梦菲等[27]研究表明，小麦阿拉伯木聚糖能显著提高小鼠盲肠短链脂肪酸的含量。本试验发现，肉兔饲粮中随小麦次粉添加量的增加，肉兔盲肠内挥发性脂肪酸呈先升后降的趋势，pH值呈先降后升趋势，NH3-N呈下降趋势，这可能是因为较低次粉添加时，不影响肠道微生物产生的纤维素酶对NSP分解产生SCFA的作用，同时次粉中的阿拉伯木聚糖及其水解产物阿拉伯低聚木糖增加了动物肠道益生菌特别是乳酸杆菌和双歧杆菌的数量，使得其对NSP的分解作用增强，乙酸、丙酸、丁酸的含量升高，肠道pH值降低。增加次粉添加量，盲肠中食糜粘度增高，减弱了阿拉伯木聚糖等对乳酸杆菌、双歧杆菌增殖作用，对次粉中NSP分解减弱，SCFA含量降低，pH值升高及NH3-N的降低。本试验表明，适量添加小麦次粉有助于盲肠微生物的分解作用，对维护盲肠内环境具有积极的作用，但是添加剂量不应太大。本课题组前期试验数据表明，饲料中小麦次粉3%～12%的添加比例不会影响试验期间肉兔的生长性能[5]。

综上可知，饲粮中添加6%的小麦次粉，显著提高了肉兔的全净膛率和十二指肠V/C值。饲粮中小麦次粉添加比例对肉兔血清IgA、IgG、IgM浓度、肉兔十二指肠绒毛高度和隐窝深度、肉兔盲肠内环境无显著影响。结合经济效益分析结果，推荐在本试验条件下肉兔饲粮中小麦次粉添加的最适比例为6%。