新冠肺炎无症状感染者隔离点环境及用具监测结果分析*

刘莉莉，李 涛，刘柏林,段华安

(1.重庆市合川区疾病预防控制中心检验科，重庆 401520；2.重庆市北碚区疾病预防控制中心检验科，重庆 400715;3.重庆市合川区疾病预防控制中心办公室，重庆 401520)

冠状病毒是已知的广泛存在自然界具有囊膜的单股正链基因组最大RNA病毒[1]。新型冠状病毒隶属冠状病毒β属，造成了严重的公共卫生问题。全球报告的病例超过5 780万例，死亡130万例[2]。新型冠状病毒感染的患者和无症状感染者可通过飞沫、密切接触、污染的物品、气溶胶传播给易感人群[3-4]，也有很多研究证明粪口也是传播途径之一[5]。按照国家新型冠状病毒肺炎(后简称新冠肺炎)最新防控要求，入境非“四类”人员的管理入境后核酸检测并开展 14 d的集中隔离医学观察[6]。本研究通过对3例新冠肺炎无症状感染者居住过的隔离点环境和生活用品进行监测，评估环境污染情况，为隔离点预防新型冠状病毒传播起积极作用。

1 资料与方法

1.1一般资料

1.1.1监测样本选择及病例基本信息 对重庆市某境外返渝人员集中隔离点隔离人员开展监测，病例1，女，26岁；病例2，女，50岁；病例3，男，47岁。3例患者均为2020年11月4日从尼泊尔返渝，无发热、干咳、乏力等症状，按照《新型冠状病毒肺炎防控方案(第七版)》要求，入境人员在入境口岸接受海关核酸检测，检测结果是阴性，后专车接到重庆某隔离点集中隔离。此3例患者在入境时候先要接受海关核酸检测，核酸检测阴性才能入境，当时检测结果是阴性，有可能是3例患者处在病毒复制早期，病毒拷贝数低，所以核酸检测试剂尚未检测出，也有可能和样本采集质量、保存等多种因素有关。11月8日(集中隔离第5天)早晨对3个病例采集鼻咽拭子进行新型冠状病毒核酸检测，采用中山达安试剂盒和江苏硕世试剂盒对采集样本开展检测，确认3个病例新型冠状病毒核酸检测结果为阳性，后立刻用负压运送车送到重庆市第九人民医院做相关CT和临床检测，由北碚区新冠肺炎防控医疗专家组判定为无症状感染者后送至重庆市公共卫生中心进行治疗。

1.1.2环境监测时间和内容 11月8-10日每天对3例无症状感染者其居住环境进行消毒前后采样，其中1号病例住C1栋3011，2号病例住C1栋3015，3号病例住C5栋3056。消毒前后采集其居住房间地面、墙面、门及把手、马桶、家具、电器、床垫和沐浴花洒等相关生活物品样本进行监测，共采集样本65份。

1.1.3采样的个人防护和具体采集方法 按照《新型冠状病毒肺炎防控方案(第七版)》附件8中《特定人群个人防护指南》中标本采集人员防护要求防护；采集地面、墙壁、物品表面拭子等样本时，使用病毒采样管中的病毒保存液，充分浸润采样拭子后，对拟采集的可能被污染概率较高的的地面、墙壁、物品表面重复涂抹擦拭。擦拭过的拭子放入含3 mL采样液的采样管中，弃去尾部。采样布点针对采样对象表面，进行了多点分布式采样。

1.2方法

1.2.1仪器与试剂 核酸提取仪器：全自动核酸提取仪[江苏硕世生物科技股份有限公司(SSNP-2000A)；检测设备：实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)仪AFD4800(杭州安杰思医学科技有限公司)]。核酸提取试剂：病毒核酸提取试剂盒(磁珠法)核酸提取或纯化试剂(中元科技股份有限公司，批号：H200919)；检测试剂选用两个不同厂家的试剂进行比对，使用新型冠状病毒核酸检测试剂盒(荧光 PCR 法)(中山大学达安基因股份有限公司，批号：20200075)和新型冠状病毒核酸检测试剂盒(双重荧光PCR法，江苏硕世生物科技股份有限公司，批号：20200812)。

1.2.2检测方法 按照《新型冠状病毒肺炎防控方案(第七版)》中附件6《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南》[6]、《新型冠状病毒 PCR 实验室生物安全要求(第二版)》[7]和选用试剂盒内说明书要求开展检测工作和实验结果质量控制及判定。

2 结 果

2.13例无症状感染者核酸检测结果 11月8日(集中隔离第5天)早上对3个病例采集鼻咽拭子进行新冠核酸检测，根据中山达安试剂盒和江苏硕世试剂盒中对检测结果判定，确认3个病例新冠核酸检测结果为阳性，为无症状感染者。鼻咽拭子核酸检测见表1。

表1 3例无症状感染者核酸检测结果

2.23例无症状感染者环境监测结果 对3例无症状感染者居住环境及其生活用具每天消毒，消毒前后共采集样本65份，其中新型冠状病毒核酸(ORF 1ab 靶标和 N 靶 标)阳性2件，新型冠状病毒核酸(N 靶 标)阳性2件，总阳性率达6.2%(其中阳性均来源病例3居家样本，1次消毒后1件，2次消毒前2件，2次消毒后1件。第3次消毒后采集的15份所有环境和生活用具样本新型冠状病毒核酸均为阴性，表中没有一一展现。见表2。

表2 新冠肺炎无症状感染者隔离点环境样本核酸检测结果

3 讨 论

《新型冠状病毒肺炎防控方案(第七版)》明确指出新型冠状病毒潜伏期为1～14 d，多为3～7 d，3个病例从疫情蔓延国尼泊尔入渝，无发热、干咳、乏力等症状，初次核酸检测结果均为阴性，5 d后再次检测均为阳性。面对国外疫情的严重形式，我国针对入境非“四类”人员入境后核酸检测并开展 14 d的集中隔离医学观察是非常有必要的。无症状感染者也可成为传染源，国外有相关报道，德国慕尼黑1例无症状感染者导致 4 人发病[9]；国内也有不少无症状感染者引起疫情爆发的报道[10]，所以要加强对有新冠肺炎病例持续传播国家及地区居住史和旅行史人员的主动检测。无症状感染者的发现和管理也是当前疫情防控不可忽视的重点。

有关研究证明，新型冠状病毒比非典型肺炎冠状病毒和中东呼吸综合征冠状病毒的感染率更高，传染性更强[11]，病毒在病例体内广泛分布[12]，包括呼吸道和肠道等。病毒颗粒直径约100 nm[13]，可以通过人的呼吸、说话、咳嗽和打喷嚏等方式在环境中悬浮、扩散,或沉降堆积在环境物体和人体表面。大量研究显示,新型冠状病毒无风条件下飞沫沉降快、传播距离通常在 2 m 以内,有风条件下飞沫最远能传播约6 m[14]，飞沫和携带病毒排泄物污染的环境会容易经接触途径形成新的感染。DOREMALEN等[15]研究表明，新型冠状病毒能在不锈钢及塑料材质物体表面存活长达72 h，在纸质材料上能存活4 h，在铜质材料上能存活24 h.吉林大研究团队学和新加坡研究团队在新冠肺炎病例定点救治医院环境中均检出新冠病毒[16-17]。新冠肺炎无症状感染者居住的隔离点，被新型冠状病毒污染的可能性极大，容易引隔离点感染。含氯消毒剂、75%乙醇消毒剂能够对病毒的结构产生破坏并能降低和消除其传染性，但病毒核酸也可能在环境或物品上残留，本监测出现了一次消毒后和二次消毒前后均有物品上检测出新型冠状病毒核酸，这可能与消毒剂浓度和消毒剂作用时间有关。环境中病毒的载量不高，检测结果还可能与采样的部位和采样时涂抹的面积有关。样本的质量不好会造成检测结果的不准确性，建议在做新型冠状病毒的环境监测时加大采样面积以提高病毒检出率。监测中消毒前后出现核酸阳性的电器表面、电视遥控器、电视柜台面把手和花洒外表面都是不易消毒同时消毒时候也容易忽略的物品，所以在做新冠肺炎患者和感染者环境监测的消毒的时候一定要重视患者或感染者接触率较高的物品和一些不易消毒同时消毒时候也容易忽略的物品。

RT-PCR是检测新型冠状病毒主要方法[18]，其具有高灵敏度、强特异性的优点，检测中的 CT 值是半定量结果。病毒载量与靶标 CT 值 成反，CT 值越低，样本中所含病毒载量就越高[19]，本监测中出现的消毒前后有核酸检出的均来3号病例，其ORF 1ab基因和N基因2种试剂检出CT值都只有15左右，提示病例3呼吸道内病毒载量高，传播的风险也大，建议环境监测时候消毒频次还应结合病例的核酸CT值。同时在监测时还应选择灵敏度高的至少2个厂家生产的试剂盒，以提高核酸检出率和保障检测质量，为新冠疫情防控提供科学准确的实验室数据。

综上所述，建议严格落实对集中隔离的境外返渝人员、新冠肺炎无症状感染者、出院后又返阳性等高风险人员相关管理措施和消毒措施，做好高风险人群和隔离点相关人员的个人防护，对居住环境和生活用具开展消毒，消毒频次应结合病例的核酸CT值，特别要关注不易消毒的生活用具和区域，并对消毒效果进行实时评估，对有效预防新型冠状病毒传播起积极作用。