系统性红斑狼疮患者血清25-OH-D、ANCA水平与疾病活动程度的相关性分析

黄晋，吴汶芳，禚娅，孙金磊

（1.鹤壁市人民医院检验科，河南 鹤壁 458030；2.郑州大学第一附属医院风湿免疫科，河南 郑州 450000）

系统性红斑狼疮（Systemic lupus erythematosus，SLE）是一种多发于育龄女性，多脏器、多系统受累的典型全身性自身免疫性疾病,其特征是产生多种自身抗体，导致多种主要器官（如肾脏、皮肤）的功能障碍[1]。SLE 普遍存在于亚洲人中，亚太地区的总体粗发病率（每年每10 万人）在0.9～3.1之间，流行率在4.3～45.3（每10 万人）之间[2]。SLE不能治愈，但可以通过药物控制，尽管过去几十年SLE的诊断和治疗取得了进步，生存率有所提高，但该病的相对死亡人口仍然很高[3]。感染(65.8%)是SLE 最常见的死亡原因，其次是狼疮肾炎(48.6%)，血液学异常(18.1%)，神经精神性狼疮(15.8%)和间质性肺炎(13.1%)[4]。迄今为止，SLE的发病机制尚未完全明确，但是，有研究表明，SLE患者病情活动与血清学标志物水平（如dsDNA、C-反应蛋白、红细胞、补体等）密切相关[5]。一些干预和流行病学研究已经阐明,维生素D 缺乏也会增加SLE的风险[6]。用于评价维生素D水平的指标有多种，例如，25-羟基维生素D（25-hydroxyvitamin D，25-OHD）、25-羟基维生素D3、1,25-二羟基维生素D 等，25-OH-D 是维生素D的主要循环形式，被认为是总维生素D水平的最佳指标，在多种疾病的发生和发展过程中起到重要的作用[5]。此外，SLE 中存在大量抗体，其中约25%具有抗中性粒细胞胞浆抗体（antineutrophil cytoplasmic antibody，ANCA）特异性[7]。ANCA 是一种机体针对单核细胞和中性粒细胞MPO 或PR3 抗原的自身免疫性抗体，是系统性血管炎的特征性抗体[7]。本研究中，我们分析了SLE患者血清中25-OH-D、ANCA的水平，并评估了其与SLE风险和疾病严重程度的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院2017年1 月-2019年1月接收的100例符合入组及排除标准的SLE患者作为SLE 组,并按照SLE 疾病活动指数（systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI）标准对患者是否处于活动期进行评估。SLE患者组中活动期62例、非活动期38例，女48例、男52例，平均年龄为48.56±8.93 岁，平均体质量指数(body mass index，BMI)为23.95±0.98kg/m2，平均病程为5.67±0.85年。另外，选取100例健康对照组患者作为研究对象，其中女50例、男50例，平均年龄为49.01±9.13 岁，平均BMI 为24.35±1.03kg/m2。两组资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。入组标准：(1) SLE患者均符合1982年美国风湿病协会修订的SLE 诊断标准[8]；(2) 入组前半年未使用维生素D 类药物；(3) 入组前半年未使用肼屈嗪、甲硫哒嗪、丙硫氧嘧啶药物（此类药物可引起ANCN阳性）；(4) 入组前1 个月无感染疾病史，未合并其他自身免疫性疾病；(5) 研究对象对本研究均知情并签署知情同意书。排除标准：(1) 合并精神类疾病疾病;(2) 合并其他自身免疫性疾病；(3) 严重心、肝、肾功能不全；(4) 处于妊娠或哺乳期女性；(5) 营养不良患者；(6) 临床资料不全；(7) 主动申请退出本研究。

1.2 仪器与试剂 罗氏全自动电化学发光免疫分析仪（型号：Cobas e601，购于罗氏诊断产品上海有限公司）；荧光显微镜（型号：EUROStar II，购于欧蒙医学诊断中国有限公司）；25-OH-D 试剂盒购于罗氏诊断产品上海有限公司；ANCA 试剂盒购于欧蒙医学诊断有限公司。

1.3 方法

1.3.1 血清中25-OH-D的检测 采集5ml受试者的空腹静脉血，3,000 rpm/min 离心10 min 收集血清，并在2h 内按照25-OH-D 试剂盒说明书，采用罗氏全自动电化学发光免疫分析仪检测受试者血清中的25-OH-D。

1.3.2 血清中ANCA的检测 采集5ml受试者的空腹静脉血，3000rpm/min 离心10min 收集血清，并采用间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence technique，IIF）检测受试者血清中的ANCA，ANCA试剂盒购于欧蒙医学诊断有限公司。

1.3.3 SLE 活动性判断 SLE 活动性判断按照SLEDAI 标准进行评估，SLEDAI 是根据患者前10天内的有关症状进行计分，其中⑴记为8 分的有：抽搐、精神病、器质性脑病综合征、视觉障碍、脑神经病变、狼疮性头痛、脑血管意外和血管炎者；⑵记为4 分的有：关节炎、肌炎、管型尿、血尿、蛋白尿和脓尿者；⑶记为2 分的有：皮疹、脱发、黏膜溃疡、胸膜炎、心包炎、低补体和血清抗ds-DNA 升高者；⑷记为1 分的有：发热、血小板减少和白细胞计数下降者。理论上SLEDAI 总积分为105 分，一般认为积分为0～4 分者基本无活动，5～9 分轻度活动，10～14 分为中度活动，≥15 分重度活动[9]。本研究中把SLEDAI 评分>9 分判定为活动期，SLEDAI 评分≤9 则为非活动期[10]。

1.4 统计学处理 采用SPSS 24.0 软件进行统计学处理分析。采用表示符合正态分布的计量资料，采用Forward Logistic 回归分析各指标与SLE活动度的关系，计量资料组间比较采用t 检验，计数资料组间比较采用卡方（χ2）检验，P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 SLE 组及对照组血中各指标检测结果 研究结果显示，SLE 组患者血清中25-OH-D 是15.85±2.91ng/ml,而对照组血清中25-OH-D 是23.43±3.01ng/ml，SLE 组患者血清中25-OH-D水平显著低于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.01)；而SLE 组患者血清中ANCA 是26.98±1.96RU/ml，对照组血清中ANCA 是10.24+1.27RU/ml，SLE 组患者血清中ANCA水平显著高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.01)，见表1。

表1 SLE 组及对照组血清中25-OH-D和ANCA的检测结果()

表1 SLE 组及对照组血清中25-OH-D和ANCA的检测结果()

2.2 活动期与非活动期患者血清中各指标检测结果 研究结果显示，SLE 活动期患者血清中25-OH-D 是13.83±2.54 ng/ml，而非活动期患者血清中25-OH-D 是19.86±3.93ng/ml，SLE 活动期患者血清中25-OH-D水平显著低于非活动期，差异具有统计学意义(P<0.01)；而SLE 活动期患者血清中ANCA 是30.24±2.59 RU/ml，非活动期患者血清中ANCA 是20.62+2.41 RU/ml，SLE 活动期患者血清中ANCA水平显著高于SLE 非活动期，且差异具有统计学意义(P<0.01)，见表2。

表2 活动期与非活动期患者血清中各指标检测结果（）

表2 活动期与非活动期患者血清中各指标检测结果（）

2.3 SLE 疾病活动程度的单因素分析 研究结果显示，SLE 活动期患者的性别、年龄、BMI及病程上与非活动期患者差异无统计学意义(P>0.05)；而在SLEDAI 评分上有显著差异，且差异具有统计学意义(P<0.01)，见表3。

表3 SLE 疾病活动的单因素分析

2.4 SLE 疾病活动程度的多因素分析 以是否为活动期为因变量，与SLE 疾病活动程度有关的25-OH-D、ANCA及SLEDAI 评分作为自变量，采用Forward Logistic 回归分析，结果显示，25-OH-D水平与SLE 活动性呈负相关，ANCA水平与SLE 活动性呈正相关，见表4。

表4 SLE 疾病活动的多因素分析

3 讨论

SLE 是临床常见的慢性自身免疫性疾病，其发病机制尚未完全揭示,一些遗传，免疫，内分泌和环境因素均与疾病机制有关[11]。全球范围内,SLE的患病率为每10 万人12 至50例，且因地区和种族而异[12]。据报道，在发达国家，SLE的发生率增加，美国几个地区的数据表明，在20 世纪下半叶，SLE的发病率至少增加了三倍[13]。同时，SLE 是一种具有多种表型的多系统疾病，临床特征可能从仅粘膜皮肤受累的非常轻度的疾病到多器官受累的非常严重的危及生命的疾病[11]。SLE 是无法治愈的，只能通过药物等其他手段维持SLE患者的正常生活，而进行疾病的活动度评估是确定治疗方案的前提。因此，如何有效评估疾病活动程度对SLE患者具有重要的意义。

Reynolds JA 等[14]人报道，维生素D 缺乏会导致SLE的疾病活动和发病率，维生素D 抑制了SLE患者外周血单个核细胞自身抗体的产生，因此，维生素D 缺乏症可能会增强SLE 中的炎症反应，从而增强疾病活动性和血管僵硬。25-OH-D 是维生素D的主要活性形式，Guan 等[15]人报道，与健康对照相比，SLE患者的25-OH-D水平显著降低。Eloi M 等[16]人研究表明，与健康对照组相比，SLE患者的25-OH-D 血清浓度显著降低，25-OH-D 血清浓度在疾病活动性比例上也有显著差异。Emerah AA 等[17]人也报道了较高的SLE 活性评分和较低的血清25-OH-D 浓度相关。我们的结果显示，SLE 组患者血清中25-OH-D水平显著低于对照组，SLE 活动期患者血清中25-OH-D水平显著低于非活动期，与以往的研究结论一致。另外卢等[18]人和李等[5]人的研究表明，SLE 组患者血清中25-OH-D水平显著低于对照组，SLE 活动期患者血清中25-OH-D水平显著低于非活动期，25-OH-D水平与SLE 疾病活动性呈负相关。另外，Dutta C 等[19]人研究表明，维生素D 缺乏的SLE患者更可能具有高的疾病活动性，且SLEDAI 得分与25-OH-D 值呈负相关。我们的研究也显示，25-OH-D水平与SLE 活动性呈负相关，说明25-OHD水平升高是SLE 活动期的独立性保护因素。

ANCA 是一种重要的自身抗体，多存在于系统性血管炎患者，部分SLE患者血清中也存在ANCA，在肾炎和中枢神经系统受累的SLE患者中最常见，且SLE的ANCA 阳性与疾病活动性和严重程度相关[7]。Pradhan 等[20]人报道了ANCA与SLE疾病活动呈正相关，并可能被用作区分狼疮性肾炎和无肾炎的SLE的标准。SU 等[21]人和李等[5]人的研究也表明，ANCA与SLE 疾病活动呈正相关。我们的结果显示，SLE 组患者血清中ANCA水平显著高于对照组，SLE 活动期患者血清中ANCA水平显著高于SLE 非活动期，ANCA水平与SLE 活动性的正相关，表明ANCA水平升高是SLE 活动期的独立性危险因素，与以往的研究一致。但也有研究表明，ANCA的水平与SLE 疾病活动不存在关联。Nishiya K 等[22]人报道，SLE患者中的ANCA与临床特征无关。Fauzi 等[23]人也未能发现ANCA阳性与SLE 疾病活动之间存在显著关联。患者的选择标准可能是造成结果差异的重要因素。