不同粉碎目数黄精主要成分含量的对比研究

蒋振华，王贤英★，熊彬彬

（1.重庆市中药研究院，重庆 400065；2.重庆市九龙坡区渝州路街道社区卫生服务中心，重庆 400065）

黄精为百合科植物滇黄精（Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl.）、黄 精（Polygonatum sibiricum Red.）或 多 花 黄 精（Polygonatum cyrtonema Hua）的干燥根茎，属于药食两用类中药。此药中含有多种活性成分，其药理作用广泛，且具有保健作用[l]。有研究指出，黄精具有补气养阴、润肺、健脾、益肾等功效，可用于治疗脾胃气虚、胃阴不足、劳嗽咳血、体倦乏力、口干食少、内热消渴、须发早白等病证[2]。中药的成分十分复杂，一些药物具有挥发油成分，不适合进行超细粉碎处理（会导致挥发油成分损失，使得其药效受到影响）[3]。本实验对比了不同粉碎细度下黄精中浸出物、多糖、皂苷、三萜类化合物含量的变化情况，旨在为确定黄精的适宜粉碎目数提供参考。

1 实验材料

不同粉碎目数的黄精粉末：10～18目的黄精粉末，18～24目的黄精粉末，24～50目的黄精粉末，50～65目的黄精粉末，65～80目的黄精粉末，80～100目的黄精粉末，100～120目的黄精粉末，120～150目的黄精粉末，150～200目的黄精粉末，大于200目的黄精粉末。

2 试剂与仪器

冰醋酸、浓硫酸、高氯酸、甲醇、香草醛（以上试剂均为分析纯试剂），蒸馏水，D-无水葡萄糖对照品，齐墩果酸对照品，人参皂苷Rb1；紫外-可见分光光度计，电子分析天平，超声波清洗仪，恒温水浴锅等。

3 方法与结果

3.1 黄精中浸出物含量的测定

采用热浸法测定各粉碎目数黄精粉末样品中的浸出物[4]，溶剂为稀乙醇和纯化水。测定结果见图1、图2。

图1 各粉碎目数黄精粉末样品中水溶性浸出物的含量

图2 各粉碎目数黄精粉末样品中醇溶性浸出物的含量

3.2 黄精中多糖含量的测定

称取适量的D-无水葡萄糖，加入蒸馏水，制成0.329 mg/mL的溶液[5]。称取0.2 g的蒽酮，置于烧杯中，加入100 mL的浓硫酸将其溶解。量取0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL、0.6 mL的对照品溶液，加入到10 mL的试管中，分别加水稀释至2.0 mL。于冰水浴中加入上述蒽酮-硫酸液体，并混匀。冷却后放于水浴中10 min，取出后放进冰水浴中。10 min后取出。用紫外-可见分光光度仪对其吸光度进行测量。制作葡萄糖标准曲线，回归曲线方程为y=4.0599x+0.066，R2=0.9995。详见图3。取不同粉碎目数的黄精粉末样品各0.25 g，放入烧瓶并加150 mL乙醇，于水浴中进行1 h的加热，并进行滤过处理。用10 mL的热乙醇洗涤残渣，重复进行3次。滤纸与残渣均置入烧瓶，加150 mL水，于沸水浴中进行1 h的加热，并进行滤过处理。用10 mL的热水对烧瓶与残渣进行洗涤，重复进行4次。将洗液与滤液融合，静置冷却后置入250 mL的量瓶中，加水至刻度后摇晃均匀。取1 mL置入试管中，然后测定其中多糖的含量。测定结果见图4。

图3 葡萄糖标准曲线

图4 各粉碎目数黄精粉末样品中多糖的含量

3.3 黄精中三萜类化合物的测定

称量齐墩果酸，将其与甲醇混合制成0.2013 mg/mL的溶液[6]。称量香草醛0.5 g，混入冰醋酸，定容成10 mL。分别取齐墩果酸对照品溶液0.1 mL、0.3 mL、0.5 mL、0.7 mL、0.9 mL、1.1 mL，分别加入至10 mL试管中，加热挥干并冷却。滴入0.2 mL的香草醛-冰醋酸溶液与0.8 mL的高氯酸，摇匀，置于水浴（70℃）中加热。15 min后放进冰浴中冷却，5 min后加入4.0 mL乙酸乙酯，摇匀。用紫外-可见分光光度仪测定吸光度，制作齐墩果酸标准曲线，回归曲线方程为y=3.4593x+0.0317，R2=0.9995。详见图5。称取黄精粉末样品2 g，置入锥形瓶中，加乙醇50 mL，进行45 min的超声处理，然后进行滤过处理。用无水乙醇洗涤滤渣及滤器，混合洗液与滤液，置入容量瓶（100 mL）中，加入无水乙醇至刻度，并摇匀。量取0.2 mL的供试品溶液，置入试管中，然后测定其中三萜类化合物的含量。详见图6。

图5 齐墩果酸标准曲线

图6 各粉碎目数黄精粉末样品中三萜类化合物的含量

3.4 黄精中总皂苷含量的测定

取11.5 mg的人参皂苷Rb1，加入容量瓶（10 mL）中，混入甲醇并定容至10 mL[7]。取40 μL、80 μL、120 μL、160 μL、200 μL加入到试管（10 mL）中，挥尽后滴加0.2 mL的香草醛-冰醋酸溶液(5%)。在冰浴下滴加高氯酸0.8 mL，混匀后进行水浴（60℃）。15 min后进行冰浴。2 min后滴加冰醋酸5 mL，静置5 min，然后对吸光度进行测定。制作人参皂苷Rb1标准曲线，回归曲线方程为y=0.0018x-0.0238(r=0.9993)。详见图7。称量不同粉碎目数的黄精粉末各1.0 g，滴加水饱和正丁醇10 mL，进行50 min的超声提取（40℃），共进行两次，混合滤液并置入量瓶（25 mL）中。取100 μL试液，挥干后进行显色，对吸光度进行测定，并计算总皂苷的含量。详见图8。

图7 人参皂苷Rb1标准曲线

图8 各粉碎目数黄精粉末样品中总皂苷的含量

3.5 黄精中总酚含量的测定

称量0.1105 g没食子酸，置于100 mL容量瓶中，加水定容至刻度后摇晃均匀[8]。分别取该溶液1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL置入容量瓶（100 mL）中，加水定容至刻度并晃匀，以获取不同浓度的溶液。各称量1 mL加入到10 mL的刻度试管中，并加入1 mL水。分别加入5.0 mL的福林酚试剂，摇匀，反应3～8 min。滴加4.0 mL碳酸钠溶液（浓度为l7.5%），加入到达刻度剂量的水，晃匀后静置。1 h后对其吸光度进行测量，制作没食子酸标准曲线，回归曲线方程为y=0.01x+0.0126(r=0.9994)。详见图9。分别称量不同粉碎目数的黄精粉末各l g，加入到容量瓶（50 mL）中，然后滴加40 mL的甲醇。进行超声处理，0.5 h后将其取出并放至冷却，滴加甲醇至刻度，摇匀。精密量取1.0 mL样品，加入到试管（10 mL）中，然后对其吸光度进行测定，并计算其中总酚的含量。详见图10。

图9 没食子酸标准曲线

图10 各粉碎目数黄精粉末样品中总酚的含量

3.6 实验结果

根据实验结果可发现：在粉碎目数为50～65目时，黄精中浸出物的含量最高。在粉碎目数为65～80目时，黄精中多糖的含量最高。在粉碎目数为100～120目时，黄精中总皂苷和总酚的含量最高。在粉碎目数为120～150目时，黄精中三萜类化合物的含量最高。

4 小结

分析以上结果可知，中药黄精的粉碎细度要根据研究目的来确定，并不是粉碎得越细越好。经超微粉碎后，中药的毒副作用、化学及物理性能等均会产生变化。笔者认为，微粉化技术在中药制备方面具有良好的应用前景，但需要加强对微粉化药物有效成分变化情况的研究。