不同柑橘品种溃疡病抗性及不同时期药剂处理防效评价

欧智涛 陈香玲 陈东奎 赵洪涛 刘要鑫 李果果 刘福平 罗秋娟 李珍 廖荣珍

摘要：对11个柑橘品种离体叶片进行溃疡病菌接种，统计病情指数;选取5个对溃疡病易感的柑橘品种在病菌接种后不同时期进行药剂处理试验，评价溃疡病病菌接种后防治的最佳时期和药剂防效。结果表明，接种12 d溃疡病抗性由高到低依次是长安金柑>贡柑>红肉蜜柚>砂糖橘>金橘蜜柚>马家柚>沙田柚>橘红>纽荷尔脐橙>沃柑>茂谷柑;4种药剂防效由高到低依次为可杀得>中生菌素>代森锰锌>乙蒜素，病菌接种后12 h内进行药剂处理，防效较高，超过24 h防效下降趋势增大。

关键词：柑橘溃疡病;离体接种;抗病性;防效;防治最佳时期

中图分类号：S436.661.1+9   文献标志码： A

文章编号：1002-1302（2021）17-0107-03

收稿日期：2020-12-23

基金项目：国家现代农业（柑橘）产业技术体系专项桂中南柑橘综合试验站（编号：CARS-26）;国家重点研发计划（编号：2017YFD0202006）;广西农业科学院基本科研业务专项（编号：2015 YT51、2015JZ101、桂TS2016013）;广西科技重大专项（编号：桂科AA17204038）。

作者简介：欧智涛（1987—），男，甘肃天水人，硕士，助理研究员，主要从事柑橘育种及栽培技术研究。E-mail：563062912@qq.com。

通信作者：陈香玲，博士，副研究员，主要从事柑橘育种及栽培技术研究。E-mail：gxcxl2008@163.com。

近年来，广西壮族自治区柑橘产业发展迅猛[1]，由于气候、温湿度、台风等客观环境条件影响，对柑橘溃疡病的防治压力较大，在市场效益驱动下，沃柑等对柑橘溃疡病敏感的晚熟杂交柑被大量推广，而多数种植农户栽培和病虫害防治技术欠缺，基础设施薄弱[2]，给柑橘溃疡病的防控带来巨大挑战。前人已对不同柑橘品种的溃疡病抗性及药剂筛選做了不少研究[3-5]，尤其是柑橘溃疡病防治药剂的筛选，主要是通过抑菌圈[6]及大田接种喷药的方法[7]比较不同柑橘品种溃疡病的抗性及评价药效防治效果，而在离体叶片上接种病菌并直接进行药剂处理的方式比较溃疡病抗性及药剂防治效果的方法鲜有报道，本研究采用此方法比较不同柑橘品种溃疡病抗性及不同药剂在病菌接种后不同时期处理的防治效果，以期为柑橘溃疡病防治时机及不同药剂替换使用，提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

柑橘溃疡病菌源叶片于2019年7月在广西壮族自治区南宁市武鸣区双桥镇沃柑果园采集，将病叶带回实验室将病菌分离纯化培养后保存[8-9]，配制3×106 CFU/mL菌悬液备用。供试品种为沃柑、茂谷柑、贡柑、沙糖橘、长安金柑、红肉蜜柚、金橘蜜柚、马家柚、沙田柚、纽荷尔脐橙和橘红，各品种叶片均采自广西农业科学院里建科研基地柑橘资源圃，试验在广西农业科学院园艺所实验室开展。

1.2 叶片溃疡病发病率试验

选取当次叶梢面积展至最大，颜色转绿的新叶作为供试材料，将叶片表面用无菌水清洗，选取叶片正面3个区域进行针刺处理[10]，每个区域3针，每叶9针，每个品种处理6张叶，设3次重复。将无菌滤纸剪成圆片，圆片大小以可覆盖叶片处理区域3个针刺点为宜，吸足已制备好的菌悬液，贴在各叶片处理区域的3个针刺点上，将叶片置于无菌滤纸保湿的培养皿内，每皿2张叶，将盖好的培养皿放置于28  ℃培养箱中，定期打开培养皿盖喷无菌水保湿，记录叶片开始出现溃疡病症状的时间，于接种后12 d，统计各品种柑橘叶片病情指数，评价各品种柑橘抗病性。根据针刺点发病数量进行分级：0级，针刺点无发病;1级，针刺点发病1～3个;2级，针刺点发病 4～6个;3级，针刺点发病7～9个。病情指数=∑（各级病叶数×各级代表值）/（调查总叶数×最高级代表值）×100。相对病情指数=鉴定品种病情指数/CK病情指数，以病情指数最高者为CK，相对抗性指数=1-相对病情指数[3]，其中高抗（HR）：相对抗性指数为1.00～0.80;中抗（MR）：相对抗性指数为0.79～0.50;低抗（LR）：相对抗性指数为0.49～0.30;中感（MS）：相对抗性指数为 0.29～0.10;高感（S）：相对抗性指数<0.10。

1.3 药剂防效试验

通过比较各品种叶片溃疡病相对抗性指数，将其中5个较感溃疡病的品种叶片用上述方法接种病菌后进行药剂处理，用代森锰锌500倍液（利民化工股份有限公司）、乙蒜素900倍液（河南比赛尔农业科技有限公司）、中生菌素900倍液（福建凯立生物制品有限公司）和可杀得1 700倍液（美国杜邦公司），分别在离体叶片接种溃疡病病菌后2、6、12、24、48、72 h喷洒于叶片针刺区域的滤纸上，以喷无菌水为对照，比较不同药剂在溃疡病病菌接种后不同时期的药剂防效。药剂防效=（CK病情指数-处理病情指数）/CK病情指数×100%。

1.4 数据分析

采用Excel 2007和SPSS 14.0软件进行数据处理和统计分析。

2 结果与分析

2.1 叶片出现溃疡病症状的时期比较

由表1可知，沙田柚、纽荷尔脐橙叶片针刺点在接种1 d后即出现溃疡病症状;沃柑、茂谷柑、红肉蜜柚和橘红在接种后2 d出现症状;沙糖橘、金橘蜜柚、马家柚症状出现在接种3 d后;贡柑和长安金柑在接种后4 d开始表现症状。

2.2 叶片溃疡病发病抗性比较

由表2可知，至接种后12 d，在11份测试材料中，沃柑和茂谷柑叶片的病情指数最高，分别是6.36、6.97，相对抗性指数低于0.1，为高感品种;长安金柑为1.21，在所有品种中病情指数最低，相对抗性指数超过0.8，为高抗品种;贡柑为中抗;沙糖橘、红肉蜜柚和金橘蜜柚为低抗;马家柚、沙田柚、纽荷尔脐橙和橘红为中感品种。由结果可知，不同柑橘品种叶片是否易感溃疡病与出现症状的时间无直接关系。

2.3 不同时期药剂处理防效试验

由图1可知，随着病菌接种后时间的推移，对沃柑溃疡病的药剂防效由高至低依次为可杀得>中生菌素>代森锰锌>乙蒜素。4种药剂的防效均逐渐下降，且均在12 h后降幅趋势增大;其中，中生菌素和代森锰锌在病菌接种48 h内处理的药剂防效与可杀得相近，可杀得在病菌接种72 h后处理的防效最高，其他3种药剂防效均低于20%。茂谷柑和纽荷尔脐橙上4种药剂的防效变化趋势与沃柑相似，其中除乙蒜素外，另外3种药剂在12 h内处理的药剂防效较高，超过12h防效下降趋势逐渐增大;橘红处理中可杀得、代森锰锌和乙蒜素药剂防效下降趋势较均匀;而沙田柚上可杀得、代森锰锌和中生菌素3种药剂在24 h内处理的药剂防效较高，均高于45%，超过24 h后的药剂防效下降趋势才逐渐增大。5个柑橘品种叶片的药剂试验结果表明，可杀得在所有品种的接种试验中防效均最高，乙蒜素均最低，中生菌素和代森锰锌在不同品种叶片上防效表现有轻微差异，药剂防效居中。

3 小结与讨论

关于柑橘溃疡病的抗性，与所侵染病菌致病力[11]、叶片气孔密度[12-13]以及植物激素作用均相关[14]，其侵染主要通过叶片气孔和伤口进行。风雨过程中树枝与叶片物理摩擦，潜叶蛾危害[15]等对叶片都会造成大量伤口，客观地为溃疡病菌侵染创造有利条件。离体叶片实验室人工针刺接种，模拟了大田溃疡病病菌通过伤口侵染叶片的过程，对溃疡病防治具有一定的指导意义。通过前人对柑橘溃疡病药剂的筛选[16]，铜制剂效果良好，但如果铜制剂使用不当会造成土壤重金属污染[17];还会引起红蜘蛛的危害风险[18-19]，明确溃疡病病菌侵染后防治的最佳时期，结合不同药剂在不同时期处理的防效，可以为药剂交替使用和提高防治效率提供理论依据。

本研究通过离体接种病菌统计病情指数的方法比较不同柑橘品种的溃疡病抗性，其中沃柑、茂谷柑病情指数最高，对溃疡病敏感;纽荷尔脐橙、橘红、马家柚和沙田柚次之，为中感品种;沙糖橘、红肉蜜柚、金橘蜜柚为低抗;贡柑为中抗;长安金柑的病情指数最低，高抗柑橘潰疡病。药剂处理试验中，在病菌接种后12 h内进行药剂处理防效较好，超过24 h药剂防效下降较快;通过各类型药剂防效比较，中生菌素和代森锰锌与可杀得对溃疡病防效相近，可以交替使用，在保证柑橘溃疡病防治效果的同时合理减少铜制剂的使用量。

溃疡病防治效果的评价需要考虑多种因素，离体叶片在实验室接种后进行药剂处理所得的结果，是以接种特定浓度菌悬液为前提，适用于不同类型药剂间的横向比较;而药剂防效的评价还应结合所接种病菌的致病力、菌悬液浓度以及在大田试验进一步研究后，进行客观综合评价。

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