非布司他片原辅料相容性研究

方娟，丛茜

(1.昆明医科大学，云南 昆明 650500；2.昆药集团股份有限公司，云南 昆明 650100)

0 引言

非布司他是一种非嘌呤类黄嘌呤氧化还原酶选择性抑制剂，能通过降低血尿酸盐浓度发挥疗效，且降尿酸效果优于别嘌醇[1-3]。有研究[4-6]表明在疗效及安全性方面，非布司他对于轻度、中度肾功能不全患者与别嘌醇相比更强效安全，不良反应较别嘌醇更轻，多数停药后可自行恢复。非布司他属于BCSⅡ类(难溶解高渗透性药物)，分子式为C16H16N2O3S，熔点209℃，无吸湿性，性状为白色结晶粉末，折射率为1.605，不含手性中心，不具有异构体，具有pH依赖性[7]。非布司他的药物半衰期在4.4~6.8 h之间，并且具有线性药代动力学特征[8]，非布司他是通过肝脏代谢而发挥作用的，在机体内分别可通过二磷酸尿苷葡萄糖苷酸转移酶的共价结合和细胞色素P450和非P450酶氧化广泛代谢，进而发挥作用[9]。目前非布司他除适用于轻度、中度肾功能不全高尿酸血症患者之外，还可用于治疗2型糖尿病肾病合并高尿酸血症患者[10]，用于预防肿瘤溶解综合征[11]，非布司他能降低合并高尿酸血症的老年心力衰竭患者的血清尿酸水平，并可显著改善心功能[12]。非布司他具有良好的市场前景及临床疗效，本文进行非布司他原料与拟用辅料相容性研究，目的是考察在较苛刻的高温、高湿及光照条件下，各拟用辅料是否与原料产生理化反应，辅料是否影响主药的检测等。原辅料相容性试验是处方前研究的重要内容，是处方筛选合理性的前提，为自制非布司他片的处方工艺研究提供依据。

1 材料

1.1 仪器、药品与试剂

非布司他对照品(中检院，批号：101278-201502)；非布司他原料药(昆药集团股份有限公司自制，批号：FB-20190704-1[过 200 目筛 ])；乳糖 (DFE，批号：659113，型号：200M)；部分预胶化淀粉(日本旭化成，批号：8103，型号：PC-10)；羟丙基纤维素(日本曹达，批号：NBI-2221，型号：SL)；交联羧甲基纤维素钠 (日本旭化成，批号：X7G325，型号：ND-2HS)；硬脂酸镁(曲阜天利，批号：190505)；薄膜包衣预混剂(上海卡乐康，批号：THL61603，型号：03F69012-CN 透明 )；乙腈 (MENCK，批号：TA087830)；十二烷基硫酸钠，无水醋酸钠(国药集团化学试剂科技有限公司，批号：20170118，20170303)；冰醋酸，氯化钠，十二水磷酸氢二钠，柠檬酸(一水)(天津市风船化学试剂科技有限公司，批号：20180901，20191108，20181203，20120904)；盐酸(云南杨林工业开发区汕滇制药有限公司，批号：20160906)；磷酸二氢钾(西陇科学股份有限公司，批号：190222)，UP水(昆药集团股份有限公司自制)。

1.2 样品制备

参照《中国药典》(2015版第四部)9001原料药物与制剂稳定性指导原则进行原辅料相容性试验，供试品可以用1批原料药进行，将供试品置适宜的开口容器中(称量瓶)，摊成≦3mm厚的薄层，进行试验。根据处方大致比例，相容性试验原料和辅料比例大致为 1：1，1：5，1：20，分别称量后，再分别在高温(60℃±2℃)、高湿(湿度92.5%±5%)、光照(总照度不低于1.2×106Lux.hr、近紫外能量不低于200w.hr/m2)的条件下放置30天，分别于第0、5、10、30天取样，考察物理性状、含量、有关物质、吸湿增重、高温失重等项目的变化。同时做辅料空白对照和原料药对照。拟使用以下辅料与非布司他原料药进行相容性试验，样品制备见表1。

表1 样品准备表

上述样品按顺序称量后过60目筛混合均匀，每一样品分为10份，将每一份样品置于适合的开口容器中(称量瓶或培养皿)，摊成≦3mm厚的薄层，疏松物料摊成≦5mm厚的薄层，最后将高温与光照的样品密封。

1.2.1 高温试验

将上述所制得的原辅料相容性样品在60℃±2℃烘箱中放置30d，分别于第0天、第5天、第10天、第30天取样，以外观性状、非布司他含量、高温失重及有关物质为指标进行检测。

1.2.2 高湿试验

将上述所制得的原辅料相容性样品在湿度为92.5%±5%恒温密闭容器中放置30d，分别于第0天、第5天、第10天、第30天取样，以外观性状、非布司他含量、吸湿增重及有关物质为指标进行检测。

1.2.3 强光照射试验

将上述所制得的原辅料相容性样品于光照箱中放置30d，分别于第0天、第5天、第10天、第30天取样，以外观性状、非布司他含量、有关物质及重量为指标进行检测。

1.3 色谱条件

含量测定：色谱柱为Kromasil-C18柱(250mm×4.6mm，5μm)，流动相为乙腈 - 水 - 冰醋酸溶液 (600：400：2)，流速为1.5mL/min，检测波长为317nm，柱温为40℃，进样量为20μl。

有关物质检查：色谱柱为反相柱TSK gel ODS-80Ts(4.6×250mm，5μm)，以 0.02% 冰醋酸溶液为流动相 A，以0.02%冰醋酸乙腈溶液为流动相B；柱温40℃；检测波长217nm。进行一定的梯度洗脱，进样量40μl。

1.4 样品溶液的制备

含量测定：1对照品溶液：精密称取非布司他对照品约20mg，移至 100mL容量瓶中，加溶剂 (乙腈：水 =60：40)溶解并稀释至刻度，作为对照品储备液。再移取上述对照品储备液1mL至10mL容量瓶中，加溶剂(乙腈：水=60：40)稀释至刻度，制成每1mL中约含20μg的溶液，即得。2供试品溶液：分别按比例称取上述原辅料相容性样品(约含非布司他200mg)，分别置于500mL容量瓶中，加溶剂(乙腈：水=60：40)适量，振摇30min，超声处理10min，加溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1mL至20mL容量瓶中，用溶剂稀释制成每1mL约含20μg的溶液，即得。

有关物质：1供试品溶液：精密称定取原辅料相容性样品(约含非布司他200mg)，置500mL量瓶中，加乙腈-水(95：5)溶液适量，超声处理15min，用乙腈-水(95：5)溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1mL至20mL容量瓶中，用溶剂稀释制成每1mL约含20μg的溶液，即得。2对照品溶液：取非布司他对照品20mg，精密称定，置100mL量瓶中，加乙腈-水(95：5)溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1mL，置10mL量瓶中，用乙腈-水(95：5)溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

2 结果

根据《化学药物制剂研究基本技术指导原则》、中国药典2015年版9001《原料药与制剂稳定性试验指导原则》及非布司他片进口注册标准(JX20130055)，原料药的“显著变化”包括性状、有关物质、含量测定等几个方面的变化，杂质限度为单个杂质不得过0.2%，杂质总量不得过0.5%。

由表2可知，高温条件下，原辅料样品性状、含量和有关物质均无明显变化，说明非布司他与辅料在高温条件下稳定。

由表3可知原辅料相容性样品在高湿条件下以预胶化淀粉为辅料的样品、非布司他与空白辅料样品、空白辅料样品吸湿增重明显，非布司他原料药样品吸湿增重较低，说明非布司他无吸湿性。

由表4可知，原辅料相容性样品在光照条件下性状发生明显变化，粉末由白色变微黄，非布司他含量有所下降，杂质A含量明显增加，总杂亦增加，说明非布司他在光照条件下不稳定，会降解，需避光保存。

表4 原辅料相容性试验(光照)结果

续表3

3 讨论

一般选择药用辅料时，辅料必须符合药用要求，所用辅料不应与主药发生不良相互作用，不影响制剂的含量测定及有关物质检查。了解辅料与辅料，原料与辅料相互作用情况，进行原辅料相容性研究，可避免处方设计时选择不宜的辅料。选择适宜的辅料，对后期处方筛选和优化，初步确定处方有着重要作用。

续表4

从上述所得的数据看，在光照条件下，非布司他原料药含量明显下降，性状从白色变为微黄色，有关物质也显著增加。非布司他结构中含有氰基和羧基，光照下双分子非布司他中的氰基、羧基分别均裂后彼此发生自由基反应得双分子环合产物[13]。在强光照射的条件下原辅料可能发生物理与化学反应也导致杂质含量增加。预胶化淀粉的部分游离支链淀粉的亲水性使得部分支链淀粉快速湿润吸水而膨胀[14]，在高湿条件下，以部分预胶化淀粉为辅料的溶液中，预胶化淀粉会吸水，具有优良的膨胀性，吸湿增重显著。分别以羟丙基纤维素、交联羧甲基纤维素钠为辅料的相容性样品在高湿条件下重量也有所增加，羟丙基纤维素为亲水性高分子，可以从空气中吸收水分，具有吸潮性，但性质稳定，是一种具有温度敏感性的纤维素衍生物[15]，交联羧甲纤维素钠是羧甲基纤维素钠的交联聚合物，当与水接触后，能溶胀[16]。试验结果表明：非布司他片应在常温条件下避光密闭保存。综上所述，非布司他与乳糖、部分预胶化淀粉、羟丙基纤维素、交联羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁以及薄膜包衣剂相容性好。