VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1的表达对子宫内膜异位症患者诊断的临床意义

刘 娅，王秀美，薛晓玲，卢 红

子宫内膜异位症 （endometriosis，EMS）是指功能性的子宫内膜组织出现在子宫腔被覆黏膜以外的其他部位，主要症状包括痛经、月经紊乱、不孕以及盆腔疼痛等[1]。EMS在孕龄妇女中发病率高达10%～15%，且呈逐年上升趋势[2]。血清中的生物标志物容易获得，且可以重复获取标本，已成为很多疾病诊断的重要方法[3-5]。目前，一系列EMS相关血清标志物已被报道出来[6]。截止目前，无论采用单一指标，还是联合若干生物标志物组合，均未能达到诊断预测早期EMS所需的准确性水平[7-10]。近年来许多学者研究发现血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）参与了EMS的病理过程[11-12]。Glycodelin-A是子宫内膜腺上皮细胞分泌的一种糖蛋白，能促进新生血管的生成和细胞的再生。有研究表明Glycodelin-A在EMS患者血清中的表达明显高于卵巢良性囊肿中，从而证明Glycodelin-A可作为卵巢子宫内膜异位囊肿的生物标志物[13]。Kim等[14]亦证实在超声检查阴性的EMS患者血清中有Glycodelin-A的表达。可溶性细胞间黏附分子-1（soluble intercellular adhesion molecule-1，sICAM-1）是一种单链糖蛋白，研究证明sICAM-1在Ⅰ-Ⅱ的EMS中表达水平提高，而在Ⅲ-Ⅳ的患者中表达水平进一步提高，同时在超声检查阴性的EMS患者中也有表达[15]。目前国内外较少见对EMS患者血清中VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1的表达及联合三者用于EMS诊断的相关研究。笔者拟研究EMS患者血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1表达水平，并评估单独及联合使用上述指标在EMS诊断中的价值。

1 对象与方法

1.1 对象 选取2017年1月—2019年12月于南通大学附属海安医院就诊患者42例（观察组），并经术后病理确诊为EMS，为同期于我院体检的健康女性42例为对照组。观察组年龄22～47岁，平均（36.7±5.2）岁，对照组年龄23～46岁，平均（38.2±5.5）岁，2组患者一般资料具有可比性。全部患者均排除内分泌疾病及其他可能影响研究结果的内外科疾病，且患者6个月内均无激素药物用药史。本研究经本院伦理委员会审批通过。

1.2 观察指标 患者血清标本采集：每个研究对象分别采集静脉血5 ml，清晨空腹采集，置于含有EDTA-K2抗凝剂的离心管中，常温下3 500 r/min离心10 min，取上清分装于多个无菌EP管中，－80 ℃冷冻保存。ELISA法测定2组患者血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1表达。VEGF-A检测试剂盒、Glycodelin-A检测试剂盒、sICAM检测试剂盒均购自上海齐一生物科技有限公司。

1.3 统计学处理 应用SPSS 22.0软件对数据进行统计分析，本研究中计量资料以±s表示，组间比较采用t检验；Pearson相关性分析法进行相关性分析；绘制ROC曲线并对曲线下面积（AUC）进行比较；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清中VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1表达量比较 观察组血清中VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1表达水平均显著高于对照组，差异均具有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

表1 子宫内膜异位症患者血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1浓度比较

2.2 血清3项指标表达水平比较 观察组采用R-AFS分期分为Ⅰ-Ⅳ期，Ⅰ-Ⅱ期患者共计21例，Ⅲ-Ⅳ期患者21例。分期Ⅲ-Ⅳ期患者血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1浓度均明显高于Ⅰ-Ⅱ期患者，差异均具有统计学意义（P＜0.05）（表2）。

表2 不同分期子宫内膜异位症患者血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1浓度

2.3 血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1表达相关性 相关性分析结果可见，EMS患者血清VEGF-A、Glycodelin-A浓度水平呈正相关（r=0.7134，P＜0.01），VEGF-A、sICAM-1浓度水平呈正相关（r =0.7961，P＜0.01），Glycodelin-A、sICAM-1浓度水平呈正相关（r=0.7105，P＜0.01）。

2.4 血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1联合检测对EMS诊断效能分析 计算各组AUC值发现，单独检测血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1的AUC值分别为0.821、0.805和0.678，三者联合检测的AUC值为0.826。可见联合三项指标检测的诊断价值高于单独检测（图1）。

图1 血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1诊断EMS的ROC曲线

3 讨论

EMS是一种影响全球数百万妇女的疾病，其诊断仍然具有挑战性。针对EMS无创性的诊断方法成为近年来研究热点之一。血清标记物作为EMS诊断工具的发展可能使一个及时和无创的诊断成为可能，生物标志物检测具有安全、便捷等许多优势，在临床上可以作为腹腔镜探查的一种有效补充。

很多研究均对VEGF在EMS发生发展、诊断发现和治疗应对过程中所发挥的作用进行了探索[13-14]。前期研究发现VEGF在EMS转移和种植过程中发挥着重要作用[15]，其在子宫内膜组织中的表达可以反应该组织的血管生成活性。另有研究指出，VEGF可以通过自分泌或旁分泌的方式促进内膜异位增殖，形成特定的异位灶[16]；且血清中VEGF含量与病变严重程度密切相关。本研究发现，EMS患者血清VEGF-A显著高于正常女性，且Ⅲ-Ⅳ期患者血清VEGF-A含量显著高于Ⅰ-Ⅱ期患者，这提示VEGF在EMS发生发展过程中发挥了重要的作用，与前期研究结果一致。

Glycodelin-A是由子宫内膜腺上皮细胞分泌的一种糖蛋白，在多种组织（如血清、羊水、内膜等）中均有表达，对正常妊娠维持具有重要作用。体外研究结果显示Glycodelin-A在EMS种植过程中发挥着重要作用，其不仅对新生血管的形成有促进作用，而且也显著影响着细胞增殖过程[17]。本研究中，EMS患者血清Glycodelin-A显著高于对照组，且伴随病情严重程度增加而增加。提示Glycodelin-A和EMS发生发展密切相关。

sICAM-1是细胞黏附分子的可溶性脱落片段，具有多种生物功能，如抑制NK细胞活性、降低白细胞趋化性等。早期研究发现正常子宫内膜细胞所分泌的sICAM-1具有周期性[18]，其中增生期内膜所分泌sICAM-1显著高于分泌期，但EMS患者sICAM-1分泌不会出现周期性变化，与种植灶的多少呈正相关。本研究结果发现EMS患者血清sICAM-1显著高于正常女性，且病情越严重表达越高，推测其原因，高表达sICAM-1可通过与NK等细胞表面的淋巴细胞功能相关分子结合，降低免疫监视中NK细胞作用，影响免疫细胞对异位黏膜的杀伤，从而促进EMS的进展。

本研究发现EMS患者VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-13项指标均显著高于正常女性，提示3项指标均为EMS潜在的诊断标志物。相关性分析发现3项指标均呈显著正相关，提示上述指标可共同驱动EMS的发生发展，且联合上述指标有提高EMS诊断的潜能。进一步ROC曲线分析发现，3项指标联合检测的AUC值为0.826，高于单独检测血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1的AUC值，说明三项指标联用诊断效能更好。

综上所述，EMS患者相比正常女性血清中VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1均显著性升高，且随着病情的发展，升高程度逐渐增加。血清三项指标联合检查有助于进一步提高对EMS的诊断效能，希望能为临床提供相应参考。