高效液相色谱荧光法测定炒党参中4种多环芳烃

2021-09-15阳文武向春燕王文婷周祥德

现代食品 2021年16期

◎ 阳文武，向春燕，万莉，王文婷，周祥德

（1.重庆市万州食品药品检验所，重庆 404000；2.重庆市黔江食品药品检验所，重庆 409000）

炒党参是常用的药食两用中药材[1-2]，具有健脾益肺、养血生津等功效[3]。人们常用炒党参煲汤，用以补中气、养血生津、增强免疫力[4]。多环芳烃（Polycyclic Aromatic Hydrocarbons，PAHs）是有机物不完全燃烧时产生的含有两个以上苯环的碳氢化合物，是重要的食品和环境污染物，党参在炒制过程中可能产生多环芳烃[5]。PAHs有200余种，其中大多数具有遗传毒性、致突变性和致癌性，如苯并[a]蒽、䓛、苯并[b]荧蒽和苯并[a]芘等[6]。欧盟委员会835/2011号文件规定了部分食材中多环芳烃限量值，其中苯并[a]蒽、䓛苯并[b]荧蒽和苯并[a]芘的总量不得大于 12 μg·kg-1，苯并 [a]芘不得大于2 μg·kg-1，而我国《食品安全国家标准食品中污染物限量》（GB 2762—2017）中仅规定了苯并[a]芘的最高限量值，其中油脂及其制品中的限量值最大，为10 μg·kg-1。为提高炒党参的质量安全水平，加强与国际标准接轨，对炒党参中4种多环芳烃的含量进行测定具有十分重要的现实意义。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

LC-20A高效液相色谱仪、KH-2000DB型超声波、IKA MS3涡旋振荡器、Waters固相萃取装置、Sartorius SQP型分析天平、BiotageTurboVap2氮吹仪、SIGMA 4-16S离心机。

乙腈、正己烷、二氯甲烷均为色谱纯，DiKMA公司；苯并[a]蒽、䓛、苯并[b]荧蒽和苯并[a]芘标准溶液，100 μg·mL-1，美国CHEM SERVICE公司；MIP-PAHs固相萃取柱。

1.2 试验方法

1.2.1 混合标准工作液配制

分别精确量取各标准溶液适量，用乙腈稀释成1 μg·mL-1的单标溶液，精确吸取各单标溶液，配制成浓度为 1 ng·mL-1、5 ng·mL-1、10 ng·mL-1、20 ng·mL-1、50 ng·mL-1和 100 ng·mL-1的系列混合标准工作液。

1.2.2 供试品溶液制备

称取2 g（精确到0.001 g）试样于50 mL离心管中，加入10 mL乙腈，涡旋振荡30 s后，超声提取30 min，4 500 r·min-1离心5 min，吸取上清液于氮吹管中，离心管下层用10 mL乙腈重复提取1次，合并提取液于氮吹管中，氮吹至近干；加入5 mL正己烷，涡旋振荡30 s溶解，待净化。将待净化溶液全部加入MIP-PAHs固相萃取柱，用2 mL正己烷洗涤氮吹管并加入柱中，用3 mL的正己烷淋洗2次，弃去淋洗液，再用10 mL二氯甲烷洗脱并收集净化液到离心管中；氮吹至近干，用乙腈定容至1.0 mL，过滤，待测。

1.2.3 色谱条件

Waters PAH C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；以乙腈-水为流动相，梯度洗脱见表1。柱温30 ℃；进样量10 μL；检测波长：激发和发射波长见表2。

表1 HPLC-FLD流动相洗脱梯度及流速表

表2 多环芳烃的激发波长、发射波长及其切换色谱时间表

2 结果与分析

2.1 多环芳烃色谱图

在1.2.3的色谱条件下，各色谱峰分离度良好，色谱图见图1。

图1 4种多环芳烃色谱图

2.2 方法的线性范围与检测限

取系列混合标准工作液在1.2.3色谱条件下分别测定，以各PAHs的峰面积（Y）为纵坐标，浓度（X）为横坐标，绘制工作曲线，各PAHs在1～100 ng·mL-1范围内线性关系良好，r≥0.999 8，结果见表3。当炒党参的称样量为2 g，定容体积为1 mL时，4种PAHs的检测限见表3。

表3 线性关系和检测限表

2.3 加标回收率

称取空白样品6份，每份约2 g，分别精确加入浓度为50 ng·mL-1的混合标准溶液1 mL，按1.2.2方法制备供试品溶液，在1.2.3色谱条件下分别测定，计算平均回收率，结果见表4。由表4可知，苯并[a]蒽、䓛、苯并[b]荧蒽和苯并[a]芘的平均回收率分别为86.3%、84.5%、88.0%和90.6%，RSD分别为1.4%、1.9%、1.9%和1.0%，表明方法准确度良好。