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市售蜂蜜中花粉粒总数测定

2021-09-13徐姗娜卢军侯鸿飞唐蕾金菊萍

食品安全导刊·中旬刊 2021年8期
关键词:蜂蜜

徐姗娜 卢军 侯鸿飞 唐蕾 金菊萍

摘 要:花粉是天然蜂蜜具有确定性、稳定性和追溯性的天然标识物,可以根据蜂蜜中花粉的种类和含量来区分蜂蜜的品种、辨别优劣蜂蜜。本试验随机抽取了13批汉中市市面上销售的蜂蜜,根据《蜂蜜中植物花粉的测定方法》(GB/T 23194—2008),分别测定其全部花粉粒含量,以对其品质优劣进行初步判定。结果表明,市售的不同品牌、不同批次的蜂蜜中花粉粒总量差距较大,不同离心转速对每个计数室花粉粒总数无显著性影响。

关键词:蜂蜜;花粉粒;总数测定

蜂蜜是蜜蜂采集植物的花蜜,与自身分泌物结合后,经充分酿造而成的天然甜物质[1]。蜜蜂采集花蜜时会吸入一部分花粉到蜜囊中,花蜜中不可避免地混入了蜜源植物的花粉,而每种花粉都有自己特有的形态特征,所以花粉是天然蜂蜜具有确定性、稳定性和追溯性的天然标识物。根据蜂蜜中花粉的种类和含量可区分蜂蜜的品种、辨别优劣蜂蜜。

陕西省汉中市北依秦岭,南屏巴山,气候温和湿润、干湿有度,造就了物种的多样性。森林覆盖率为52%,林草的植被率达60%,境内的两大水系(汉江和嘉陵江)均为长江一级支流,是国家“南水北调”中线工程的水源地。汉中具有良好的蜂养殖自然生态环境资源,土蜂养殖历史悠久,主要生产的蜜种是油菜花蜜和百花蜜。汉中是传统的油菜种植生产基地,全市有7.5亿m2的油菜花田,为当地蜂群提供了充足蜜源。而秦巴山脉花草资源丰富,大量的野生山花以及野生或人工栽培的中草药资源,如党参、山茱萸、大黄、天麻、杜仲、厚朴、五味子等,都是本地产百花蜜的重要蜜源。近年来,汉中市蜂蜜产业得到突飞猛进发展,2020年7月20日实施的优质汉中蜂蜜(T/HZSBX 02—2020)[1]和优质汉中土蜂蜜(T/HZSBX 03—2020)[2]中均将蜂蜜中花粉浓度列为特征指标,参考限量值分别为≥10 000个/mL和≥14 000个/mL。

本研究随机抽取了13批汉中市市面上销售的蜂蜜,根据《蜂蜜中植物花粉的测定方法》(GB/T 23194—2008)[3],分别测定其全部花粉粒含量,以对其品质优劣进行初步判定。

1 材料与方法

1.1 材料

13批蜂蜜,购于汉中市市场。

1.2 试剂与仪器

1.2.1 试剂

硫酸,天津市风船化学试剂科技有限公司;乙酸,天津市天力化学试剂有限公司;乙酸酐,天津市天力化学试剂有限公司;甘油,天津市科密欧化学试剂有限公司;苯酚,天津市天力化学试剂有限公司。

1.2.2 仪器

冷冻离心机H2100R,湖南湘仪离心机仪器有限公司;数显恒温水浴锅HH-8,国华电器有限公司;光学显微镜Ci-L,尼康仪器有限公司。

1.3 试验方法

1.3.1 试样的制备

未结晶的样品,搅拌均匀备用。有结晶的样品,在密闭情况下,置于55 ℃左右的水浴中温热,振荡,待样品全部融化后搅匀,冷却至室温备用。称取均匀蜜样25 g,加入40 ℃的50 mL蒸馏水,使蜂蜜均匀溶解。

1.3.2 花粉粒总数测定

将试样溶液倒入离心管中,以2 000 r/min的速度离心10 min,弃去55 mL的上清液,加入5 mL乙酸并拌匀,浸泡2 h。进行离心(2 000 r/min,10 min),弃去10 mL上清液,加入新鲜配制的乙酸酐和硫酸的混合液6 mL,并拌匀,然后将离心管放入80~90 ℃水浴中加热7 min。停止加热后,迅速离心(2 000 r/min,10 min),弃去5 mL上清液,加10 mL蒸馏水洗涤,离心水洗3次后,弃去上清液,使试样溶液留下约5 mL的样液。加入1 mL 50%的甘油保存,并加入2~3滴苯酚作为防腐剂。

利用血细胞计数板制片,静置5 min后,于显微镜下计数,先用低倍镜找到计数室所在位置,然后换高倍镜进行计数。本次采用的血细胞计数板为25中方格、16小方格款。

1.4 不同离心转速对每个计数室花粉粒总数的影响测定

以6号蜂蜜为样本,按照1.3.1和1.3.2方法将步骤中所使用的离心转速和时间依次设定为4 000 r/min 10 min、6 000 r/min 10min、8 000 r/min 10 min、10 000 r/min 10 min、10 000 r/min 5 min,分别计数花粉粒总数。

2 结果与分析

2.1 13批蜂蜜花粉粒总数的测定

按照1 mL样液中的总花粉粒数=25个中方格总花粉粒数×104计算,全部13批蜂蜜花粉粒总数统计结果见表1。由表1可知,不同品牌、不同批次的蜂蜜中花粉粒总量差距较大,其中2、4、7号样品中花粉粒数量为0,均购自本地超市,属大规模工业生产产品。导致花粉粒数为0的原因有可能是这些品牌的蜂蜜在经过高密度过滤,移除了花粉在内的各种杂质[4],花粉一方面会影响到蜂蜜的营养价值,另一方面大规模生产中的高温加热也会直接影响蜂蜜的口感和风味。因此,选择小规模生产的土蜂蜜,可以最大程度地品尝到蜂蜜的原始风味。广大消费者在购买时可以根据自己的需求选购。

2.2 不同离心转速对每个计数室花粉粒总数的影响

以6号蜂蜜为样本,测定不同离心转速对每个计数室花粉粒总数的影响(见表2),由表2可知,增大离心转速后所得花粉粒总数与国标要求的2 000 r/min比较并无显著差异(P>0.05),而将转速提高至10 000 r/min,时间缩短至5 min时所得花粉粒总数与国标要求的2 000 r/min离心10 min比较无显著性差异(P>0.05),因此在实验室大批量测定蜂蜜中花粉浓度且条件允许时,可以采用提高转速缩短时间的方式加快试验进度。

3 讨论

本研究以13批汉中市市售蜂蜜为研究对象,采用国标方法进行了测定,因本次试验所采样品多数为本地生产的百花蜜,所以并未测定单一种类花粉的含量和浓度,而是测定总花粉粒数量。结果显示,不同品牌、批次的蜂蜜中花粉含量差异较大。其中两种高山棒棒蜜所含花粉含量最高,可能与取蜜方式、过滤效率有直接关系,因高山棒棒蜜多采用压榨取蜜法,会混入更多蜂脾和花粉,也带来了更高的营养价值。有研究显示压榨蜂蜜中的花粉含量可比分离蜂蜜高出4、5倍之多[5]。本次试验显示不同蜂蜜的花粉粒测定的确可以反映蜂蜜的品质高低,国标并没有将蜂蜜中花粉粒含量作为判定蜂蜜真假的依据,但笔者認为蜂蜜中花粉粒含量的测定试验操作简单、耗时短、成本低,可以作为一种判断蜂蜜真伪的初筛手段,经检测不含花粉粒或者所含花粉粒种类与标示蜜源不吻合者,再通过蛋白质为“内标”的同位素检测法或高效液相色谱质谱联用法进行真假的鉴定。

参考文献

[1]汉中市标准化协会.优质汉中蜂蜜:T/HZSBX 02—2020[EB/OL].(2020-06-20)[2021-05-11].http://down.foodmate.net/standard/sort/12/81156.html.

[2]汉中市标准化协会.优质汉中土蜂蜜:T/HZSBX 03—2020[EB/OL].(2020-06-20)[2021-05-11].http://www.doc88.com/p-08661728203259.html.

[3]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局,中国国家标准化管理委员会.蜂蜜中植物花粉的测定方法:GB/T 23194—2008[S].北京:中国标准出版社,2008.

[4]魏丽,曾志将.不同目数的滤布过滤对蜂蜜中植物花粉含量及浓度的影响[J].蜂蜜杂志,2009,29(4):6-8

[5]张言政,胡福良.分离蜂蜜和压榨蜂蜜的品质对比[J].中国蜂业,2017,68(2):63

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