藏药唐古特青兰的化学成分和生物活性研究进展

罗建萍，刘文星,,，周 敏，赵 平 ，钏永明

(1.云南民族大学 化学与环境学院 云南省高校智能超分子化学重点实验室 生物基材料绿色制备技术国家地方联合工程中心，云南 昆明 650500;2.云南民族大学 民族药资源化学国家民族事务委员会-教育部共建重点实验室，云南 昆明 650500;3.西南林业大学 西南地区林业生物质资源高效利用国家林业与草原局重点实验室，云南 昆明 650224)

藏药唐古特青兰(DracocephalumtanguticumMaxim)属于唇形科(Labiatae)青兰属(Dracocephalum)的多年生草本植物，又称为甘青青兰，有臭味，高35～55 cm，产甘肃西南，青海东部，四川西部及西藏东南部，生于海拔1 900～4 000 m 干燥河谷的河岸、田野、草滩或松林边缘，全草可入药，能治疗胃炎、肝炎、头晕、神疲、关节炎及疖疮[1].根据文献的报道，该植物有显著的抗缺氧、抗心肌缺血、抗糖尿病、预防心脏毒性和抗癌等活性，到目前为止，从该植物中分离得到了55个化合物，文中就藏药唐古特青兰的化学成分和生物活性研究进行综述.

1 唐古特青兰的化学成分

文献报道唐古特青兰(D.tanguticum，简写为DtM)含有黄酮、酚类或鞣质、香豆素与内酯、蒽醌、甾体、三萜、强心苷、挥发油、有机酸、蛋白质、氨基酸与多肽、皂苷、多糖及苷等化学成分[2-3].主要对唐古特青兰的化学成分研究做简要的综述.

1) 黄酮 DtM中的总黄酮含量约为5.66%[2]，目前已有多种黄酮提取分离和含量测定方法，如采用微波提取，在微波时间 7 min，温度 59 ℃，乙醇体积分数27%，液料比 25∶1(mL/g)时总黄酮实际得率为29.68%[4]，义西求吉等[5]用优化的磁固相萃取-高效液相色谱法(MSPE-HPLC)同时测定了甘青青兰中5种黄酮化合物的含量.目前从该植物中发现了22个黄酮类天然产物.其中Wang等[6]从DtM全草的乙醇提取物中分离得到了17个黄酮(ladanetin-6-O-β-(6″-O-acetyl)glucoside (1)、pedalitin-3′-O-β-glucoside (2)、eriodictyol-7-O-β-D-glucopyranoside (3)、5,7,3′,5′-tetrahydroxyflavanone-7-O-β-D-glucopyranoside (4)、naringenin-7-O-β-D-glucopyranoside (5)、apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside (6)、luteolin-7-O-β-D-glucopyranoside (7)、tilianin (8)、luteolin-7-O-β-D-glucuronide ethyl ester (9)、pedaliin-6″-acetate (10)、pedalitin-6-O-glucoside (11)、ladanetin-6-O-β-D-glucopyranoside (12)、eriodictyol (13)、naringenin (14)、3′,5,5′,7-tetrahydroxyflavanone (15)、luteolin (16)和7-O-methyl-seutellarein (17)；张晓峰等[7]从DtM中得到大波斯菊苷(6)、胡麻素(18)、胡麻苷(11)、胡麻苷-6″-乙酸酯(10)；Zeng等[8]从DtM中得到pectolarigenin (19)和luteolin-7-methoxy-3′-O-(3″-O-acetyl)-β-D-glucopyranuronic acid-6″-methyl ester (20)；Ma等[9]从其中得到了5-hydroxy-4′-methoxyflavone-7-O-rutinoside (21)和narirutin (22)，见图1.

图1 唐古特青兰中的黄酮类化合物

2) 三萜和甾体类化合物 李霁昕等[10]从DtM中得到了10个三萜类化合物，分别为羽扇豆烷-20(29)-烯-28-酸-3-醇 (23)、羽扇豆烷-20(29)-烯-3,28-二醇 (24)、齐墩果酸(25)、齐墩果烷-12-烯-28-酸-3-酮 (26)、乌苏烷-12-烯-28-酸-2α,3β-二醇 (27)、乌苏烷-12-烯-28-酸-3β,24醇 (28)、豆甾-3-酮 (29)、β-谷甾醇-3-O-葡萄糖基(6→1)-十六烷酸苷 (30)、β-谷甾醇 (31)、β-胡萝卜苷 (32)；张晓峰等[7]分离得到了齐墩果酸 (25)、熊果酸 (33)、β-胡萝卜苷 (32)；周雪杉等[11]从DtM中得到了β-谷甾醇 (31)、α-香树脂醇 (34)和羽扇豆醇 (35)；郑洪婷等[12]发现了齐墩果酸 (25)、熊果酸 (33)、白桦酯醇 (24)和3β,20α-二羟基乌苏烷-21(22)-烯-28-酸 (36)；夏青等[13]得到了β-谷甾醇 (31)、齐墩果酸 (25)和β-胡萝卜苷 (32)，见图2.

图2 唐古特青兰中的三萜和甾体等类型化合物

3) 苯乙酰胺糖苷 Wang等[14]从DtM中分离了4个精胺糖苷类化合物dracotanosides A～D (37～40)，Ma等[9]分离得到了4个苯乙酰胺糖苷类化合物dratanguticumide B (41)、dratanguticumide C (42)、(E)4-O-[β-D-glucopyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl]phenylethylcinnamamide (43)以及dratanguticumide A (44)，见图3.

图3 唐古特青兰中的苯乙酰胺(糖苷)类化合物

4) 其他化合物 左马怡等[15]从DtM全草中分离得到了4个苯丙素类化合物(迷迭香酸(45)、迷迭香酸甲酯 (46)、2,3-2H-3-羟基-咖啡酸甲酯 (47)和咖啡酸 (48))、对羟基苯甲酸 (49)和原儿茶酸 (50)；Zeng等[8]还从该植物中得到的5个苯系物，它们分别是benzyl-6-[(2E)-2-butenoate]-β-D-glucopyranoside (51)、2-methoxy-4-(2-propen-1-yl)penyl-6-acetate-β-D-glucopyranoside (52)、2-methoxy-4-(2-propen-1-yl)penyl-6-[(2E)-2-butenoate]-β-D-glucopyranoside(53)、 benzyl-β-D-glucopyranoside (54)和2-methoxy-4-(2-propen-1-yl)penyl-β-D-glucopyranoside (55)，见图4.

图4 唐古特青兰中的其他类型化合物

5) 挥发油 肖远灿等[16]对产自青海的DtM鲜花和新鲜枝叶的精油分析结果表明，新鲜枝叶精油含有44种成分，而鲜花精油比新鲜枝叶精油多15种成分；乙酸芳樟酯在鲜花和新鲜枝叶中含量最高，相对含量分别为31.67%和36.16%，作者认为不同的产地，干燥的DtM会损失精油等原因会导致精油的含量不一样.

6) 多糖 庆易微等[17]用回流、浸渍、超声提取法提取DtM中的多糖，得到的多糖含量分别为15.6%、10.4%和4.2%；子巴等[18]采用L9(34)正交实验对确定了用超声法提取DtM多糖的最佳工艺条件是把药材切成段状，料液比为 1∶16，提取时间 5 h.高生英等[19]发现青海大通县的DtM多糖含量最高，适宜采集期为7月中旬，他们还发现DtM中的多糖提取中，各提取因素对多糖提取率的影响大小为：料液比>提取时间>提取温度.

7) 无机元素 文献报道唐古特青兰中的无机元素主要含有Ni、Cr、V、Mn、Cu、Zn、Co、Se、Fe、As、Pb、Al、Ba、Mg、K 和Ca等元素[20].

2 唐古特青兰的活性研究

国内外学者对DtM的药理活性作了一系列的研究，如抗缺氧、抗菌、抗病毒、抗心肌缺血、抗氧化、抗肿瘤、抗糖尿病等活性，本部分对唐古特青兰的活性研究做简要的综述.

1) 抗缺氧活性 DtM的抗缺氧活性研究较多，如李永芳等[21]报道DtM能显著降低低氧性肺动脉高压大鼠mPAP、RVHI 及肺组织MDA的含量，改善肺小动脉管壁增厚和管腔狭窄，显著升高肺组织GSH-Px和SOD活性，对低氧性肺动脉高压具有一定的防治作用；DtM还可通过降低ET-1(肺组织中内皮素)的含量促进eNOS(内皮型一氧化氮合酶)的表达，增加NO含量，调节NO/ET-1的平衡，从而防治低氧性肺动脉高压[22]；DtM还可通过抑制脂质的过氧化反应，从而防治高原低氧所引起的肝脏损伤[23].

2) 抗菌活性 海平等[24]用Kir by-Bauers纸片扩散法对DtM的乙醇粗提物、水煎液和挥发油进行体外抗菌试验，结果认为DtM没有抗菌作用；而胡君茹等[25]发现DtM提取物对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌有抑菌作用，对大肠杆菌和粪肠杆菌没有抑菌作用.

3) 抗病毒活性 吉守祥等[26]用细胞病变效应法测定32种藏药提取物的活性，发现DtM具有抗HSV-1(单纯疱疹病毒Ⅰ型)的活性.

4) 抗心肌缺血 刘凤云等[27]发现DtM的水提液能显著的减少大鼠急性心肌缺血的面积，可以显著降低T波幅度，降低心肌缺血造成的心电图ST段位移，并减少血清LDH的释放量，证实了DtM的水溶液对该模型的急性心肌缺血有明显的保护作用.

5) 抗氧化活性 谢建锋等[28]使用超声波辅助提取DtM总黄酮，发现该方法提取率高，提取物有明显的抗氧化活性.

6) 抗癌活性 郑思建等[29]通过对100种常用的藏药提取物使用MTT法对2个肝癌细胞株HepG2和SMMC-7721进行抗肿瘤活性测试，同时选用L-02细胞来评价其体外毒性，发现DtM的乙酸乙酯提取物能诱导HepG2细胞凋亡，有显著的抗肿瘤活性.

7) 抗糖尿病活性 顾健等[30]用DtM挥发油灌胃治疗Ⅱ型糖尿病大鼠，有显著治疗作用，认为其作用机制可能是DtM能够改善胰岛素受体水平、增加肝细胞膜胰岛素受体数量；DtM挥发油和醇提物能明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖水平，有显著的治疗作用，对正常小鼠的血糖水平没有明显的影响[31].

8) 药物代谢研究 廖敬礼等[32]通过HPLC测定DtM醇提取物中的齐墩果酸的药代动力学规律，发现齐墩果酸在大鼠体内的代谢符合一室模型，吸收快，消除快.

9) 唐古特青兰中得到的化合物的活性研究 Zeng等[8]对从该植物中得到的7个化合物进行了对LPS诱导原代264.7巨噬细胞产生NO抑制活性研究，发现化合物(19)和(20)对NO产生的抑制率IC50值分别为64.33和 48.02 μmol/L，而化合物51～55没有明显的活性.Ma等[9]对从中分离得到的3个苯乙酰胺糖苷类化合物(41～43)进行了抗高血糖和抗真菌(白色念珠菌)活性测试，发现它们对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖的消耗率分别为(20.80 ± 1.47)%,(21.48 ± 2.44)%和(21.57 ± 1.35)%，但它们没有明显的抗真菌活性.化合物37～40对K562 和 K562/A02细胞株没有明显的细胞毒活性[14].Wang等[6]对化合物1～17进行了细胞保护和系统的抗氧化活性研究，并对化合物7进行了对阿霉素(DOX)诱导的细胞损伤的保护作用、对DOX引起Ca2+的浓度的影响和对DOX抗肿瘤活性的影响.他们发现DtM中的黄酮如果B环的3′、4′位含有羟基，C-2和C-3之间有双键(如化合物7、9和16)有很强的细胞保护活性；不同浓度的化合物7预处理后可降低DOX的细胞毒性；化合物7预处理H9c2细胞后，在DOX诱导的形态学变化中得到了明显保护；化合物7预处理后显著抑制了细胞内DOX诱发的细胞内活性氧化物(ROS)的浓度；在正常细胞中，Ca2+的含量很低，而DOX会增加Ca2+的含量，经过化合物7预处理后则会抑制DOX引起的Ca2+升高；此外，还发现化合物7预处理后不会降低DOX抗肿瘤活性；研究者认为化合物7很有可能成为一个能预防心脏毒性的药物.

3 结语

藏药唐古特青兰有显著的生物活性和多种化学成分，具有很好的研究价值和广阔的应用前景.近年来，随着天然药物化学研究手段的发展，对唐古特青兰的化学成分和生物活性研究也不断深入.虽然该植物中发现的化合物种类较多，但总数仍然不够多，还需进一步研究以发现结构更新颖，且具有更好活性的化合物；该植物的部分黄酮已经有了初步的构效关系研究，发现了1个有潜力成为预防心脏毒性药物的化合物，但仍需深入研究；此外，该植物中其他结构类型的化合物的活性还需要进一步研究，以更好的研究开发藏药唐古特青兰.