73%丙炔氟草胺·乙草胺乳油的高效液相色谱分析方法

李世忠

（辽宁省农药检定站，辽宁 沈阳 110034）

1 前言

丙炔氟草胺·乙草胺乳油主要由丙炔氟草胺和乙草胺复配而成，丙炔氟草胺·乙草胺乳油为玉米田苗后除草剂，适用于防除玉米田一年生和多年生禾本科杂草和阔叶杂草。目前对于丙炔氟草胺·乙草胺乳油复配有效成分含量的检测，多采用气相色谱和液相色谱分别检测。通过大量的实验测定并结合本实验室的条件，找到了丙炔氟草胺·乙草胺乳油的液相色谱分离方法，结果表明，方法快速准确，适用于农药企业质量控制和质检机构市场监控。

2 实验部分

2.1 仪器与试剂

安捷伦HP1100液相色谱仪，具二极管阵列检测器；色谱工作站；KQ-100超声波清洗器；BP221S赛多利斯电子天平；色谱柱：Hypersil ODS 4.6 mm×250 mm 5μm。

丙炔氟草胺标样≥98.0%；乙草胺标样≥98.0%；2,4-滴异辛酯≥98.0%。

2.2 色谱条件

流动相：V（乙腈）∶V（水）=50∶50；经滤膜过滤，并进行脱气；

流速：1.0 mL·min-1；

检测波长：230 nm；

进样体积：5μL；

保留时间（min）: 丙炔氟草胺约5.2 min，乙草胺约10.6 min。

在上述色谱条件下，丙炔氟草胺和乙草胺的标样谱图见图1，丙炔氟草胺·乙草胺乳油样品的色谱图见图2。

图1 丙炔氟草胺·乙草胺标样谱图

图2 丙炔氟草胺·乙草胺乳油样品谱图

由此可见，色谱峰分离较好。

2.3 分析步骤

2.3.1 标样溶液的配制：

称取丙炔氟草胺标样约0.03（精确至0.000 1 g）置于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀、备用。称取乙草胺标样约0.085 g (精确至0.000 1 g），置于50 mL容量瓶中，用移液管准确移取5 mL上述丙炔氟草胺溶液至于其中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀、制成混合标样溶液备用。

2.3.2 试样溶液的配制

准确称取约0.12 g样品（准确至0.000 1 g ）于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解，超声振荡后，冷却至室温后用孔径为0.45 μm的滤膜过滤，待测。

2.3.3 测定

在上述操作条件下，待仪器稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻两针丙炔氟草胺（乙草胺）峰面积相对变化小于1.5%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

2.3.4 计算

将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中辛酰溴苯腈（烟嘧磺隆、2，4-滴异辛酯）分别进行平均。

将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液峰面积分别进行平均，丙炔氟草胺（乙草胺）的质量分数X1按式(1)计算：

式中：m1—标样溶液中丙炔氟草胺（乙草胺）的质量，g；

m2—试样的质量，g；

A1—标样溶液中丙炔氟草胺（乙草胺）峰面积的平均值；

A2—样品溶液中丙炔氟草胺（乙草胺）峰面积的平均值；

ω—标样中丙炔氟草胺（乙草胺）的质量分数，%；

r—标样稀释倍数丙炔氟草胺r=10，乙草胺r=1。

3 结果与讨论

3.1 线性关系试验

称取丙炔氟草胺标样0.301 2 g （精确至0.000 1 g）（质量分数99.3%），置于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀、备用。称取乙草胺标样0.856 2 g（精确至0.000 1 g）（质量分数99.2%），置于50 mL容量瓶中，用移液管准确移取5 mL上述丙炔氟草胺溶液至于其中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀、用移液管分别移取3、4、5、6、7 mL至50 mL容量瓶中，用乙腈定容，配置成5个梯度浓度的标准溶液。待仪器稳定后按浓度从低到高顺序进样。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标制得标准曲线。见图1、图2。

图3 丙炔氟草胺测定方法线性关系图

图4 乙草胺测定方法线性关系数据

3.2 精密度试验

对73%丙炔氟草胺·乙草胺乳油试样进行5次平行测定，检验分析方法的精密度。测得丙炔氟草胺的标准偏差为0.004，相对标准偏差为0.18%，相对标准偏差低于2.33% Horwits公式计算值，测得乙草胺的标准偏差为 0.229，相对标准偏差为0.33%，相对标准偏差低于1.41% Horwits公式计算值。因此本方法对73%丙炔氟草胺·乙草胺乳油中的丙炔氟草胺和乙草胺含量测定有良好的精密度。

3.3 准确度试验

为验证本方法的系统误差，对方法的准确度进行了验证，按照配方比例要求，将除原药以外的所有助剂混合，做制剂空白。按制剂标称值在制剂空白中分别添加一定质量的丙炔氟草胺标样、乙草胺标样，分别测定丙炔氟草胺、乙草胺的回收率，最终测定丙炔氟草胺回收率在98.6%～100.1%之间，乙草胺回收率在98.8%～99.9%之间，分析方法具有良好的准确度。

3.4 特异性测定试验

本标准分析方法采用HPLC-DAD峰纯度分析法对丙炔氟草胺、乙草胺进行鉴别。由谱图可知，73%丙炔氟草胺·乙草胺乳油在该分析方法下丙炔氟草胺、乙草胺于230 nm处对紫外光均有较强的吸收信号。从色谱图可以清晰地看出，有效成分丙炔氟草胺、乙草胺处无其他物质干扰，色谱峰纯度因子丙炔氟草胺为999.8、乙草胺为999.8、符合定量分析要求。

3.5 非分析物干扰试验

助剂中的任何干扰物均会导致分析方法出现系统偏差，分析时同时测定不带助剂的丙炔氟草胺、乙草胺原药和空白样品，通过不加助剂的原药色谱图和不加原药的助剂色谱图判定，结果显示，非分析物对有效成分丙炔氟草胺、乙草胺的分析不构成干扰。

4 结束语

用本高效液相色谱法检测丙炔氟草胺·乙草胺乳油中的丙炔氟草胺和乙草胺，具有快速准确等优点，且重现性、稳定性、分离效果均能满足产品的质量要求，是一个较为理想的检验方法。