胸腔积液Xpert MTB/RIF UItra检测对结核性胸膜炎临床诊断的价值分析

陈艳玲 钟益锴 黄 健

江西省胸科医院呼吸与危症医学二科，江西南昌 330006

随着医学技术的不断发展，结核病逐渐成为一种可提前预防、可治愈的疾病，其是由结核杆菌导致的疾病。通常感染肺部、淋巴系统，其他器官如：中枢神经、脑部、泌尿系统、循环系统、骨骼等也可受到感染，损害患者各项器官，严重威胁了人们生命健康[1-2]。结核病具有传染性，是全球十大死亡因素之一，在《2018 WHO 全球结核报告：全球与中国关键数据分析》中可知，我国每年新增病例越有91.8 万例，在全球结核病发病率较高[3]。在可持续发展过程中，为实现“终止结核病”这一愿景，及早筛查诊断结核病，成为关键。结核性胸膜炎，主要在患者胸膜腔处于高度过敏状态时，结核杆菌生成的代谢产物进入其中，导致胸膜炎症，部分为直接感染，临床表现为胸闷、胸痛、发热、乏力、盗汗、咳嗽等，无特异性症状。为特异性诊断结核性胸膜炎，区分非结核胸膜炎，对患者疾病治疗具有重要意义[4]。临床多使用超声波、X 线诊断胸膜炎，仪结合分枝杆菌培养判断是否为结核感染，但是，常规方式阳性率第，难以通过单一指标确诊，不利于疾病控制。因此，本研究分析了胸腔积液Xpert MTB/RIF UItra（以下简称Xpert UItra）检测对结核性胸膜炎临床诊断的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年6月—2020年6月江西省胸科医院收治的120 例疑似结核性胸膜炎患者作为研究对象，采集所有患者的胸腔积液制得胸水标本。其中，男64 例，女56 例，年龄23～63 岁，平均（48.02±4.12）岁。根据病理学检查为金标准将患者分为确诊组（58 例，确诊为结核性胸膜炎）、疑诊组（42 例，临床诊断结核性胸膜炎）和非结核病组（20 例，普通肺炎或胸膜炎患者）。本研究经江西省胸科医院医学伦理委员会审核批准。

纳入标准：①患者均有结核性胸膜炎症状，如胸痛、呼吸困难、咳嗽咳痰、发热盗汗等；②患者6 个月内未曾服用过抗结核药物；③影像学或组织病理学检査，患者疑似结核性胸膜炎；④抗酸涂片镜检、细菌培养及Xpert MTB/RIF（简称Xpert）检测，培养阳性者行表型药敏试验；⑤患者的随访时长均超过半年；⑥所有患者同意参与本研究。排除标准：①在-70℃保存的胸腔积液量＜1 mL；②污染标本；③患者的Xpert 检测结果不确定。

1.2 方法

细菌培养：参照《结核病诊断实验室检验规程》[5]进行标准化操作，取标本10 mL，在4℃环境中以3000 r/min 速度离心30 min，用N-乙酰基工半胱氨酸-氢氧化钠对1.5 mL 痰液去污染20 min，在PBS 中和至4 mL，4℃环境中以5 cm 的旋转半径、3000 r/min速度离心15 min。离心后将沉淀重悬于1.5 mL PBS中，取其中的0.5 mL 接种至BACTEC MGIT960 系统分枝杆菌培养管中。剩余的1 mL 冻存-70℃用于Xpert Ultra 检测，直至获得培养结果或在随访期结束时进行。仪器在42 d 之内自动报告MTB培养结果，将剩余处理后的标本冻存于-70℃冰箱，培养阳性者进一步行Xpert Ultra 检测。直至获得培养结果或在随访期结束时进行。对所有分离株进行MPT64 抗原测试，以确认结核分枝杆菌复合群的存在。

Xpert 检测，操作步骤：①使用新鲜胸腔积液标本，严格按照美国Cepheid 公司提供的检测盒使用说明操作，将1 mL 标本与2 mL 样本处理液混合，涡旋振荡至少10 s 后室温孵育10 min，再次涡旋10 s 并室温孵育5 min；②孵育后的2 mL 混合液转移至Xpert检测盒中并装载至Xpert 仪器，运行自动检测程序并报告结果。

Xpert Ultra 检测，操作步骤：①使用在-70℃冻存的10 mL 标本，孵育操作步骤与Xpert 检测一致。②孵育后，将2 mL 混合液转移到Xpert Ultra 检测盒，装载到Xpert 仪器，自动检测，得出检测结果。注意：若检测结果无效，应采用相同样本重复上述检验操作。

1.3 观察指标

①观察三组患者两种检验方式的阳性率与阴性率。②观察计算两种检验方式对确诊结核性胸膜炎患者诊断的灵敏度、特异度与准确度。灵敏度=真阳性例数/（假阴性+真阳性）例数×100%；特异度=真阴性例数/（假阳性+真阴性）例数×100%；准确度=（真阳性+真阴性）例数/总例数×100%。

1.4 统计学方法

采用SPSS 17.0 统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用t检验；计数资料采用率表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 确诊组、疑诊组和非结核病组两种检验方式检验结果的比较

在对确诊组检测时，Xpert UItra 检测的阳性率高于Xpert 检测，差异有统计学差异（P＜0.05）；在对疑诊组检测时，Xpert UItra 检测阳性率高于Xpert 检测，差异有统计学差异（P＜0.05）；在对非结核病组检测时，Xpert UItra 检测阳性率低于Xpert 检测，差异有统计学差异（P＜0.05）（表1）。

表1 确诊组、疑诊组和非结核病组两种检验方式检验结果的比较[n（%）]

2.2 两种检验方式对结核性胸膜炎患者诊断灵敏度、特异度与准确度的比较

对58 例确诊结核性胸膜炎和20 例非结核病患者进行诊断，Xpert UItra检测对结核性胸膜炎的敏感度为96.50%，特异度为95.00%，准确度为96.15%，均高于Xpert 的82.76%、70.00%、79.49%，差异有统计学意义（P＜0.05）（表2）。

表2 Xpert 与Xpert UItra 检测结核性胸膜炎患者诊断灵敏度、特异度与准确度的比较[%（n/N）]

3 讨论

结核病作为全球十大死亡原因之一，发病率、死亡率较高，严重危害人民健康。若在早期发现结核病并对症治疗，能够降低结核病的传染性，降低结核病患者死亡率。结核性胸膜炎作为特殊类型的肺结核，主要因胸膜被分枝杆菌直接感染或者胸膜对结核杆菌高敏感性，当分枝杆菌的代谢物进入胸膜，导致炎症[6-8]。

在临床上，为有效诊断是否为结核性胸膜炎，胸腔积液检验非常关键。传统常见检测方式有抗酸染色、荧光定量聚合酶链式反应（pdymerase chain reactien，PCR）等，但是，各类检测方式均存在假阳性率高、等待时间长、敏感度与特异度低等缺陷，不利于结核病的筛查[9-10]。Xpert MTB/RIF 的问世，为结核病早期诊断带来便捷、有效的筛查方式。该检测方式由半巢式实时定量PCR 技术发展而来，是一种基因扩增技术，可通过PCR 循环阈值了解胸腔积液内结核杆菌的数量，通过半定量分析，可在2 h 内快速、准确判断患者是否为结核性胸膜炎[11-13]。Xpert 检测为封闭式系统，可全自动操作，降低了人为操作带来的误差与标本污染情况，具有检测时间短暂、敏感度与特异度高等特点。Xpert UItra 为Xpert 检测的升级版，以半定量巢式PCR 技术发展，PCR 体系升高，引进高分辨溶解曲线技术，提高了检验敏感性，rpoB 突变类型的区分更加准确等[14-15]。本研究结果显示，在对确诊组检测时，Xpert UItra 检测的阳性率为96.55%，高于Xpert的82.76%，差异有统计学差异（P＜0.05）；在对疑诊组检测时，Xpert UItra 检测阳性率为66.67%，高于Xpert 的45.24%，差异有统计学差异（P＜0.05）；在对非结核病组检测时，Xpert UItra 检测阳性率为5.00%，低于Xpert 的30.00%，差异有统计学意义（P＜0.05）。Xpert UItra检测对结核性胸膜炎的敏感度为96.50%，特异度为95.00%，准确度为96.15%，均高于Xpert 的82.76%、70.00%、79.49%，差异有统计学意义（P＜0.05）。提示Xpert UItra 检测会提高结核性胸膜炎的特异度、敏感度和诊断准确度，诊断价值较高。

综上所述，结核性胸膜炎作为特殊类型的肺结核，常规检查方式浪费时间长，阳性率与敏感度较低，筛查难度相对较高。相对而言，Xpert 检测作为新型检测方式，准确率更高，阳性检出率升高，自动化检测降低了误差。Xpert UItra 作为Xpert 检测的升级版，研究显示其阳性率、敏感度、特异度与准确度更高，能够快速判断患者是否为结核性胸膜炎，为患者的后续治疗提供帮助，具有较高临床推广价值。