臭氧联合黄连膏封包外敷对银屑病患者的临床疗效及其对皮损处IL-17、IL-22水平的影响

桂俊芳，张怡，李影，邓文娅，章瑜，蒋裔

(同济大学附属皮肤病医院皮肤科，上海 200443)

银屑病是一种慢性皮肤病，俗称“牛皮癣”，主要表现为红斑鳞屑，以寻常型银屑病较为常见[1]。该病病程较长，且易复发，给许多患者带来很大烦恼，影响其生活质量。该病发病机制不清，可能与遗传、免疫、代谢、精神等相关，目前无特效药，如何简单快速地控制疾病仍是目前的研究重点[2]。祖国医学认为银屑病属于“白疕”范畴，起病以血热为主，多为情志内伤、外邪侵袭、血燥失养所致，因而治疗应以凉血、润燥、祛风为主[3]。黄连膏出自医宗金鉴，其主要成分为黄连，具有祛风除湿、温经散寒的功效，可治疗湿热诸疮，被广泛用于在外科、口腔、儿科等[4]。封包疗法是采用薄膜或医用辅料等对患者涂敷药处进行封闭式包裹，以提高皮肤对药物的吸收效率[5]。臭氧水则具有杀菌止痒、消炎止痛、促进血管形成等作用，毒副作用极少，具有天然、环保的优势[6]。本研究采用臭氧联合黄连膏封包外敷治疗银屑病，探究其临床疗效，及其对皮损处白细胞介素-17(interleukin-17，IL-17)、IL-22的影响，以期为临床治疗银屑病提供一定的参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2020年1月至2020年8月在同济大学附属皮肤病医院就诊的68例银屑病患者，按照不同的治疗方案分成观察组和对照组，每组各34例。纳入标准：(1)符合银屑病[7]诊断标准；(2)符合中医中“白疕”[8]诊断标准；(3)治疗前1个月内未使用过激素、免疫抑制剂等药物；(4)患者均知情并同意参与本研究。排除标准：(1)伴有严重心、肝、肾功能障碍患者；(2)伴有恶性肿瘤患者；(3)存在其他皮肤病患者；(4)对本研究药物过敏患者；(5)因外伤或烫伤等影响皮肤屏障功能患者；(6)妊娠及哺乳期女性。观察组中，男性18例，女性16例；年龄(31.25±6.28)岁，平均病程(6.32±1.25)年；牛皮癣面积和严重程度指数(psoriasis area and severity index，PASI)评分(7.46±5.18)分。对照组中，男性17例，女性17例；年龄(31.48±6.19)岁；平均病程(6.11±1.06)年；PASI评分(7.34±5.27)分。两组患者的一般资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。本研究经医学伦理委员会同意。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法 对照组采用消银胶囊(陕西摩美得制药有限公司)，5～7粒/次，3次/d，治疗1个月。观察组采用消银胶囊与臭氧联合黄连膏封包外敷联合治疗，臭氧水疗：采用HZ-2600A臭氧水疗仪(陕西凯思特电子科技有限公司)进行治疗，臭氧水浓度为3～5 mg/L，每次20 min，每日1次。将黄连膏(成分：黄连9 g、当归15 g、黄柏9 g、生地黄30 g、姜黄9 g、麻油360 g、黄蜡120 g)涂于皮损处，并用塑料保鲜膜封包。

1.2.2 皮损处IL-17、IL-22 mRNA水平检查方法 (1)引物合成：IL-17、IL-22及内参β-肌动蛋白引物均由上海英骏生物技术有限公司合成，引物序列如下：IL-22上游引物5’-ACAACACAGACGTTCGTCTCATTG-3’，下游引物5’-GAACAGCACTTCTTCAAGGGTGA-3’，IL-17上游引物5’-CTGTAATGCTGCTGTTGCT-3’，下游引物5’-GGTGTCCCGATAGTCCCT-3’，β-肌动蛋白上游引物5’-ATCATGTTTGAGACCTTCAACA-3’，下游引物5’-CATCTCTTGCACGAAGTCCA-3’。(2)总RNA提取及cDNA合成：治疗前、后取皮损组织，采用Trizol法提取总RNA，测定纯度并定量后参照试剂盒说明书进行cDNA合成，-20 ℃保存。(3)聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)反应：94 ℃预变性2 min，94 ℃变性1 min、退火56 ℃ 1min、延伸72 ℃ 1 min，循环32次，最后72 ℃延伸10 min。PCR产物于1.5%琼脂糖凝胶电泳后摄像并图像分析。利用β-肌动蛋白作为对照，采用2-△△t方法计算IL-17、IL-22 mRNA的相对表达量。

1.2.3 皮肤屏障功能检查方法 采用Antsci Skin-SP多功能皮肤检测仪(Antsci公司)检测患者的角质层的含水量及油脂含量，分别取头颈、上肢、躯干、下肢各三处皮损，每处测量1次，取平均值。

1.3 观察指标

(1)治疗前、后两组患者皮损程度的PASI评分[9]。将人体分成头颈、上肢、躯干、下肢4个部分，计算皮损面积(area，A)，再计算各部分鳞屑(desquamation，D)、浸润(infiltration，I)、红斑(erythema，E)的分数，严重程度由无到极重度分别为0、1、2、3、4分，PASI=A头部×(D头部+I头部+E头部)×0.1+A上肢×(D上肢+I上肢+E上肢)×0.2+A躯干×(D躯干+I躯干+E躯干)×0.3+A下肢×(D下肢+I下肢+E下肢)×0.4。(2)治疗前后两组患者的瘙痒程度，从0～10分别表示无瘙痒～最剧烈的瘙痒[10]。(3)治疗前、后两组患者皮损处的IL-17、IL-22 mRNA表达水平及皮肤屏障功能。

1.4 疗效评定

(1)疗效指数=(治疗前PASI积分-治疗后PASI积分)/治疗前PASI积分×100%，痊愈：皮损全部消退或疗效指数≥95%；显效：疗效指数60%～94%；有效：疗效指数为30%～59%；无效：疗效指数<30%。总有效率=痊愈率+显效率+有效率。(2)安全性评价：观察治疗期间，两组出现不良反应的情况。

1.5 统计学分析

2 结果

2.1 两组患者临床疗效比较

治疗后，观察组的总有效率为91.18%，高于对照组的70.59%(P<0.05)。见表1。

表1 两组临床疗效比较[n(%)]

2.2 两组患者PASI评分及瘙痒程度比较

治疗后，两组患者PASI评分及瘙痒程度评分均较治疗前降低，且观察组的上述两项评分均低于对照组(P<0.05)。见表2。

表2 两组患者PASI评分及瘙痒程度比较分)

2.3 两组患者皮损处IL-17、IL-22 mRNA水平比较

治疗后，两组患者皮损处IL-17、IL-22 mRNA水平均较治疗前降低，且观察组的上述两项指标均低于对照组(P<0.05)。见表3。

表3 两组患者皮损处IL-17、IL-22mRNA比较

2.4 两组患者皮肤屏障功能比较

治疗后，两组患者的角质层含水量及油脂含量均较治疗前高，且观察组的上述两项检测指标均高于对照组(P<0.05)。见表4。

表4 两组患者皮肤屏障功能比较

2.5 两组不良反应情况

治疗期间，两组均无明显不良反应出现。

3 讨论

银屑病常给患者身心带来极大痛苦，需采取有效的治疗方式以改善临床预后[11]。臭氧是氧的同素异形体，具有抗炎、杀菌的作用，且能够改善微循环及患者免疫功能，对银屑病有一定疗效[12]。中医中该病属于“白疕”，与血热内蕴相关，风邪郁于皮肤不宣散，发为红斑、丘疹，热则微痒，需清热解毒、凉血活血[13]。黄连膏为古方，出自医宗金鉴，选用黄连、当归、黄柏、生地黄、姜黄，并用麻油、黄腊作为辅料，能够清热利湿，泻火解毒、活血止痒，对血热所致皮肤病有良好功效[14]。

本研究观察组患者治疗后的总有效率为91.18%，高于对照组的70.59%，且其PASI评分及瘙痒程度评分均低于对照组，说明采用臭氧联合黄连膏封包外敷对银屑病的疗效好，可有效改善患者皮损情况及瘙痒程度。黄连膏中黄连黄柏可清热燥湿、解毒止痛、收敛生肌，苦寒清热燥湿，当归可活血生肌、消疲止痛，生地黄清热凉血，姜黄破血行气、活血化瘀，麻油生肌止痛，黄蜡收涩敛疮，全方联用具有清热疖肿、通络止痛、润肤生肌、燥湿消肿之效[15]。采用封包外敷的方式，可提高药物的经皮吸收率。臭氧能够有效杀灭起病过程中的病原微生物，穿透力强，且能够抑制炎性反应因子，促进新陈代谢，改善皮肤血液循环[16]。两者联用可协同改善银屑病患者皮损及瘙痒症状。

既往研究[17]表明，以辅助性T细胞(T helper cells，Th细胞)介导的免疫反应与银屑病的发病相关，IL-17是由Th细胞分泌的细胞因子，在皮肤组织中可刺激角质形成细胞产生炎症因子，并且IL-17与银屑病患者的皮损程度密切相关。IL-22则可抑制角质形成细胞的终末分化，与上皮细胞分化增殖和迁移相关，而IL-17与IL-22在促进皮肤组织炎症和损伤方面有一定的协同作用[18]。本研究治疗后，两组患者皮损处IL-17、IL-22 mRNA水平均较治疗前降低，且观察组均低于对照组，说明臭氧联合黄连膏封包外敷能有效降低银屑病患者皮损处的IL-17、IL-22表达水平。现代药理学研究表明黄连的主要成分黄连素，具有广谱抗菌及免疫调节作用，黄柏可用于抑制金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌等多种细菌，当归具有抑制血小板聚集的功效，生地黄具有抗炎、调节免疫功能的效果，姜黄能够有效抗革兰氏阳性菌活性，四者联用可有效抗菌消炎，改善患者免疫水平[19]。臭氧能清除炎症反应中的氧化物质，并促进白细胞增殖，从而增加抑制炎性反应因子水平，臭氧与黄连两者联合作用，可发挥抗炎杀菌作用[20]。

银屑病患者的皮肤屏障功能被破坏，皮损处经表皮水分丢失，通常用角质层含水量及油脂含量来判断银屑病患者皮肤屏障功能[21]。治疗后，两组患者的角质层含水量及油脂含量均较治疗前高，且观察组均高于对照组，说明臭氧联合黄连膏封包外敷能有效改善银屑病患者的皮肤屏障功能。臭氧水疗联合黄连膏封包外敷能够增加皮肤抵御微生物的能力，增加角质层含水量，从而增加局部皮肤的温度和湿度[22]。治疗期间，两组均无明显不良反应出现，说明臭氧联合黄连膏封包外敷具有较高的安全性。

综上，臭氧联合黄连膏封包外敷治疗银屑病疗效显著，能有效改善患者皮损及瘙痒症状，并降低患者皮损处IL-17、IL-22水平，改善患者皮肤屏障功能。