赤霉素、吲哚乙酸对贵州雷山绿茶品质的影响

李惠林，金 芬，刘文锋，李 俊，杨奕海，吴从娟，杨正兴

（黔东南州雷山县雷山农业农村局，贵州雷山 557199）

0 引言

茶叶是贵州省重要的支柱产业之一，省委省政府和各地方政府建立的一系列措施，减少了茶叶种植中农药的使用。同时，由于病虫害防治和茶叶质量的要求，在茶叶种植管理中需要寻找相应的替代手段，如使用对人体危害较小的植物生长调节剂（下称：PGR）等替代品。对贵州茶园中PGR使用情况进行试验，为掌握PGR在茶树上使用的发展趋势提供了基础数据和参考价值。

本论文选取贵州省银球茶（绿茶）主要生产地的贵州省雷山县作为样本，针对不同浓度的赤霉素、吲哚乙酸进行田间试验，相比不同浓度的赤霉素、吲哚乙酸对茶叶主要品质指标（可可碱、咖啡因、氨基酸、儿茶素类）的影响。

1 田间试验

在《农药注册试验指南（NY/T788）》和《农药注册残留田间试验标准操作规程》的指导下进行试验设计，并根据本研究的试验目的进行适当的调整。

本次试验，主要选择黔东南州雷山县茶叶种植区进行实地调研。依据植物生长调节剂的特点，在2018年春季进行残留试验，实验地点为雷山县脚雄茶业种植区。茶园面积约1 000 m2。试验前10天茶树应经过轻修剪处理。试验前未施用过PGR。供试的绿茶茶树，品种为福鼎华茶2号（GSCT2），树龄为6—9年。

1.1 供试药物

赤·吲乙·芸可湿性粉剂。

1.2 试验分区

试验前茶叶基地一年以上未施用过植物生长调节剂，试验划分为3个小区，每个试验设三个重复，分别以希腊字母I，II，III标记，共分为12个区块。

其中3块为对照，对照组为未喷施供试药物区，喷施纯净水，记为CK。其它9块为喷药处理区块，每个处理设置三次重复试验。分别设置减半浓度处理区，记为处理①区；推荐浓度处理区，记为处理②区；加倍浓度处理区，记为处理③区。各个区块间隔设置缓冲区，区块应随机排列。

1.3 采样方式

喷药后，根据每个实验块的茶树发芽情况进行发芽率的实验记录，出芽后，采集一芽二叶茶青样品，用于测定芽的重量及含水量，同时拍照记录形态；采集一芽二叶1.5 kg，500 g鲜叶直接烘干（烘青样品）用于理化检测。

2 绿茶中主要品质指标检测方法建立

2.1 仪器与设备

高效液相色谱仪（美国Waters公司），配有ACQPDA检测器；电子天平。

2.2 样品前处理

样品粉碎，过30目筛，称取1 g（精确至0.001 g）样品到250 mL锥形瓶中，量取100 mL的90℃超纯水至锥形瓶中，盖塞后立刻放入沸水浴，超声提取20 min，持续振摇取出，用流动冷水冷却1 min，加5 g氧化镁，混匀，沸水浴超声20 min后取出，冷却至室温。上清液转移至100 mL离心管中，4 500 r/min离心5 min，待测备用。

2.3 测定条件

C18液相色谱柱（5 μm，150 mm×3.9 mm）；吸光度210 nm；分离度4.8 nm；采样速率20点/s。流动相为超纯水＋乙腈溶液（V/V）；梯度洗脱模式；流速0.3 mL/min，按梯度洗脱程序进行洗脱。

2.4 检测方法的建立与优化

本试验参照《食品安全国家标准 饮料中咖啡因的测定》（GB5009.139），对色谱条件进行进一步的优化，检测波长由仅能测定咖啡碱的275 nm，优化为可涵盖更多品质指标的210 nm。得到更广泛的检测范围。

本方法的线性范围在221 ng/mL～438 μg/mL之间。检出限：0.7 ng（以三倍基线噪音信号确定）；取样量1 g，检出限16 mg/kg，定量限50 mg/kg。品质指标分离情况较好，出峰情况对比如图1。

图1 绿茶中主要品质指标出峰情况

3 对贵州雷山绿茶中营养成分的影响

通过绿茶中营养成分指标检测方法对贵州雷山绿茶中主要品质指标（可可碱Theobromine，咖啡因Caffine，茶氨酸L-Theanine）进行试验。通过色谱图计算各品质指标在茶叶中的含量，重复进样两次，取平均值，得出下表1和表2。

表1 不同赤霉素、吲哚乙酸浓度处理后茶叶中三种营养成分的影响

表2 不同赤霉素、吲哚乙酸浓度处理后茶叶中儿茶素类含量的影响

本研究利用SPSS软件对数据进行处理，参照田间试验统计方法分析得知，图表中删除线的数据为异常值，不参与最终结果计算。根据数据讨论在四种不同植物生长调节剂施用浓度（CK、①、②、③）和三个区块重复（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）之间是否有交互影响，从不同植物生长调节剂施用浓度来讨论对茶叶中品质指标是否存在显著差异性。

若P<0.05，说明差异源间存在显著差异，若P<0.01，则差异源之间的差异非常显著，见表3。

表3 赤霉素、吲哚乙酸浓度对茶叶中品质指标的影响的方差分析

4 结语

赤霉素、吲哚乙酸浓度对表没食子儿茶素EGC含量的增长有显著影响，对绿茶中茶氨酸（L-Theanine）的含量的增长有非常显著的影响。相较之下，对于如：绿茶中可可碱（Theobromine）、绿茶中儿茶素（C）、绿茶中咖啡因（Caffine）、绿茶中表儿茶素没食子酸酯（ECG）、绿茶中表儿茶素（EC）、绿茶中表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）的作用不够明显。

在茶叶生产过程中，可以通过施用赤霉素、吲哚乙酸等植物生长调节剂，促进茶叶中水分的增加，从而有效增量，增效，增强经济效益。同时通过对茶氨酸、表没食子儿茶素的作用，改善茶叶滋味的鲜度等，从而提高茶叶的口感。