2018～2019年安阳市规模猪场猪流感病毒病调查研究

王庆云，赵 琳，郭希萍，王会英

(安阳市动物疫病预防控制中心，河南 安阳 455000)

猪流行性感冒简称猪流感(Swine Influenza, SI)是由猪流感病毒(swine influenza virus, SIV)引起的针对与不同日龄，性别和品种猪的一种急性、热性、高密度接触性呼吸道传染病。常见的病毒亚型包括H1N1、H3N2和H1N2等，也有H5N1和H9N2亚型的报道。各亚型病毒导致的猪流感在世界各地均有发生，给养猪业带来了巨大的经济损失。猪流感临床症状主要表现为突发、高热(高达40～42°C)、流涕、咳嗽和呼吸困难等。感染猪流感病毒的猪会表现出精神萎靡，食欲不振，眼鼻有粘性带血分泌物流出，并伴有阵咳和尖咳，呼吸急促，呈腹式呼吸，身体极度虚弱，甚至虚脱，卧地不起。若是怀孕母猪感染，会导致繁殖障碍，流产甚至死亡。对养猪业的影响极大。

猪流感的潜伏期一般为1～3 d，通常当猪发现症状24 h后，猪舍内便会出现同样症状的猪。猪流感病毒在猪的呼吸道系统，随着病猪呼出的气体及分泌物传播，健康猪通过与病猪的接触，2～3 d便可传遍猪群，呈现快速传播的态势。如若养殖人员采取治疗措施，该病会在7 d内得到有效的治疗，流行态势也会得到相应的控制。但如若饲养人员的忽视，后期继发感染其他传染性疾病，会使治疗难度加大，给养猪业带来不可估量的经济损失。另外，H1N1型流感病毒还可导致禽流感和人流感的发生。2009年3月，在墨西哥爆发的人甲型H1N1型流感疫情，仅半年时间就导致世界近有45万人感染，6 000多人死亡。猪被认为是人流感和禽流感病毒共同的易感宿主，被认为是流感病毒基因的重编辑的“混合器”，在流感病毒的适应性变异及新病毒株的形成中具有重要的作用，因此，对流感病毒的调查监测，不仅对猪养殖业具有必要性，而且对公共卫生领域也具有重要的指导意义。

为了解安阳市2018～2019年的猪流感的流行情况，本研究采用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法对该市猪血清样本进行检测调查，现将调查情况报道如下：

1 材料

1.1 受检样品

来源于安阳市文峰区，北关区，殷都区，龙安区，安阳县，汤阴县，内黄县，林州市等地区的养猪场，散养户，及生猪交易市场的1 169份猪血清。

1.2 材料

材料：猪流感病毒(H1亚型)ELISA抗体检测试剂盒和猪流感病毒(H3亚型)ELISA抗体检测试剂盒，购买于北京IDEXX元亨有限公司。

2 实验方法

严格按照购买的ELISA检测试剂盒使用说明书规范操作。1)用样品稀释液按照1︰50稀释被检测血清；2)加样。每孔加入100 μL，设置阳性对照和阴性对照各2孔，用封闭液封板室温封闭30 min；3)封闭完成后，弃封闭液，每孔加入350 μL洗涤液洗涤5次，每次15s，拍干；4)每孔加入100 μL酶标抗猪抗体，室温作用30 min；5)弃抗体，每孔加入350 μL洗涤液洗涤4次，每次15s，拍干；6)每孔加入底物反应液100 μL，室温避光显色15 min；7)每孔加入终止液100 μL，使用酶标仪检测各孔OD650的值，并对结果进行分析。结果判定：当阳性对照孔平均OD650值减去阴性对照孔平均OD650值≥0.15时，确定试验成立。S/P≥0.4，判被检样品为阳性；S/P<0.4，判被检样品为阴性。

3 结果与分析

3.1 安阳市H1亚型流感病毒感染情况

通过对安阳市1169份猪血清检测发现，H1亚型流感病毒的感染阳性率在33.98%～70.44%之间分布，平均感染率为54.49%。其中北关区的H1亚型感染率最高，高达70.44%；汤阴县的H1亚型感染率最低，为33.98%。详细结果见表1和图1。

表1 安阳地区SIV(H1)血清阳性检出率统计结果

图1 安阳市各县(市、区)SIV(H1)血清阳性检出率

3.2 安阳市H3亚型流感病毒感染情况

通过对安阳市1169份猪血清检测发现，H3亚型流感病毒的感染阳性率在24.37%～36.90%之间分布，平均感染率为30.62%。其中林州市的H3亚型感染率最高，为36.90%；内黄县的H3亚型感染率最低，为24.37%。详细结果见表2和图2。

表2 安阳地区SIV(H3)血清阳性检出率统计结果

图2 安阳市各县(市、区)SIV(H3)血清阳性检出率

3.3 安阳市H1和 H3亚型流感病毒重复感染情况

通过对安阳市1169份猪血清检测发现，安阳地区猪流感病毒H1和H3亚型流感病毒重复感染率在17.65%～34.52%之间分布，平均感染率为24.29%。其中林州市的H1和H3亚型流感病毒重复感染率最高，为34.52%；内黄县的H1和H3亚型流感病毒重复感染率最低，为17.65%。详细结果见表3和图3。

表3 安阳地区SIV(H1和H3)血清阳性检出率统计结果

图3 安阳市各县(市、区)SIV(H1和H3)血清阳性检出率

4 讨论

通过本次调查结果发现，在安阳市猪群中存在H1和H3亚型猪流感病毒的感染，且存在H1和H3亚型猪流感病毒的混合感染。安阳市H1亚型猪流感病毒的感染率较H3亚型猪流感病毒的高。我们发现，有关H1亚型猪流感病毒的感染主要在北关区，其养殖密度大，检测样本为247份，其中阳性为174份，阳性率最高，为70.44%。究其原因，可能与养殖密度，及猪流感的传播速度有密切关系。而在安阳县检测样本为96例，阳性样本为61例，阳性率也高达63.54%。我们发现地理位置上安阳县紧靠北关区，这就为猪流感病毒的传播提供了有利条件，由于猪交易市场或相邻猪场的交流，导致了安阳县H1亚型猪流感病毒的感染率也较高。

H3亚型猪流感的感染率最高地区为林州市，阳性率为36.90%。其次为北关区，阳性率为36.03%。结果表明，养殖的密集度与猪流感的传播有重要关系。另外，调查发现各地区的阳相率相差不大，这可能跟猪流感病毒的季节性流行有一定的关系。林州市的H1和H3亚型流感病毒的重复性感染率也是最高的，H1和H3亚型流感病毒存在混合型感染，甚至会存在其他病毒，例如猪瘟病毒、伪狂犬病毒等的感染。针对猪流行性感冒疾病，尚无特效治疗药物，所以养殖人员应该加强猪流感相关知识的学习，加强猪的饲养管理，尽早接种高效猪流感疫苗，发现疫情，尽早隔离病猪，做好环境消毒清洁工作。

研究表明，猪的呼吸道上皮细胞同时具有识别和结合人流感病毒与禽流感病毒的唾液酸受体，可成为人流感和禽流感的中间宿主。猪作为中间宿主可以在流感病毒的基因编辑中扮演重要的角色，从而产生新的病毒种类，对公共卫生安全造成重大威胁。另外，H1N1亚型的猪流感病毒能在人和猪种群中交互传播，可造成人类呼吸道疾病，如重症肺炎等疾病，对于人的生命安全有重大隐患。因此，对于猪流感的调查研究不仅能够规范养猪业，为生猪养殖提供预警，也是人类公共卫生安全所必要的。