新型冠状病毒肺炎患者康复后血清抗体水平检测结果分析

张智州 路华敏

湖北省襄阳市襄州区人民医院 441100

2019年12月底以来，一场突如其来的疫情逐渐在全球蔓延，引起这场疫情的罪魁祸首就是后来被命名为2019-nCoV的新型冠状病毒。该病毒传染性强，人群普遍易感，故感染者众多，给人民的生命健康造成巨大威胁，给医疗单位和公共卫生系统带来巨大负担。目前临床上多用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测病毒RNA进行诊断，检测病毒特异性抗体进行辅助诊断。抗体检测不仅可弥补RNA检测易造成假阴性的缺陷，还可对病情进行监测，对患者的恢复情况进行预判，对临床诊疗具有一定的指导作用。本研究利用化学发光法检测新型冠状病毒肺炎康复者体内的特异性IgG、IgM抗体，动态监测抗体的变化，以了解新型冠状病毒肺炎患者体内特异性抗体的浓度及其变化规律，以期为临床诊疗和流行病学调查提供帮助。

1 资料与方法

1.1 标本来源 选取2020年1—2月在本院住院的新型冠状病毒肺炎患者，所有患者经荧光定量PCR检测，新型冠状病毒RNA均为阳性，并符合《新型冠状病毒肺炎诊疗方案》(试行第六版)的诊断要求，共105例，其中男54例，女51例，年龄9～88岁。根据《新型冠状病毒肺炎诊疗方案》临床分型，将上述患者分为4型，即普通型12例，轻型85例，重型6例，危重型2例。因重型和危重型患者太少，将此二型患者合并为一组进行统计分析。

1.2 仪器试剂 深圳亚辉龙生物科技股份有限公司生产的iFlash3000全自动化学发光免疫分析仪及其配套试剂。

1.3 抗体检测 依患者发病时间计算，分别于患者发病后2、3、4、6个月采集血液标本，用化学发光法检测血清中的新型冠状病毒特异性IgG和IgM抗体。当样本中抗体浓度>10.0AU/ml时，为有反应性，判为阳性，反之为无反应性，判为阴性。

1.4 统计学方法 所有数据用SPSSAU分析，计数资料以百分率表示，用χ2检验，计量资料先进行方差齐性检验，符合正态分布的以均数±标准差表示，用单因素方差分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组患者各阶段特异性抗体阳性率比较 三组患者IgM抗体阳性率较低，至3个月时，只有极少数患者呈阳性反应，而IgG抗体阳性率高，至4个月时，各组阳性率仍高达87%以上，但到6个月时，也只有个别患者呈阳性。三组患者各阶段特异性抗体阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。详见表1。

表1 三组患者各阶段特异性抗体阳性率比较(%)

2.2 三组患者各阶段特异性抗体浓度变化比较 大部分患者在发病后，都产生针对病毒的特异性抗体，IgM消失快，浓度逐渐下降，IgG抗体在较长一段时间内呈现高浓度状态，至6个月左右，抗体基本消失，三组患者各阶段特异性抗体浓度比较差异无统计学意义(P>0.05)。详见表2。

表2 三组患者各阶段特异性抗体浓度变化比较

3 讨论

病毒侵犯机体后，一般经过3～7d的潜伏期后出现临床症状，在这个过程中，病原体刺激机体免疫系统发生免疫应答，产生针对病原体的特异性抗体。在这一过程中产生最早的是IgM类抗体，一经感染，迅速产生，且消失较快，因此IgM抗体可作为近期感染的标志。稍晚产生的是IgG抗体，由于IgG抗体的产生晚于IgM抗体，且持续时间较长，因此，IgG抗体一般为感染中晚期或是恢复期的标志。新型冠状病毒是冠状病毒家族中的一员，现已证实，其抗体产生也遵循这一规律[1]。

目前临床多采用RT-PCR方法检测RNA做为诊断感染的依据，但是很多因素[2-3]影响核酸检测的阳性率，为了弥补这一缺陷，国家卫健委《新型冠状病毒肺炎防控方案(试行第七版)》[4]将特异性IgM、IgG抗体作为诊断的辅助指标，李萍[5]、徐万洲[6]等对抗体的特异度和敏感度做了研究，其敏感度和特异度均较高，可作为新型冠状病毒感染的有效筛查和诊断指标。

一般认为，随着病情的好转，IgM逐渐降低直至消失，而IgG抗体浓度会持续较长一段时间，若恢复期IgG由阴性转为阳性或是浓度较急性期升高4倍以上，可作为复发的标志。因此，动态监测血清抗体浓度，明确其变化规律，对于明确治疗效果、评估患者状态及判断病情转归具有重要意义，对于流行病学调查也具有重要的意义。

张兵华、谢毓滨等对新型冠状病毒肺炎康复者较短时期内抗体变化做了研究[7-8]。本研究动态观察新型冠状病毒肺炎康复者血清中的抗体情况，分别于患者发病后2、3、4、6个月采集血清标本检测抗体，以观察较长时间内抗体的变化。研究发现，2个月时，IgM抗体阳性率已较低，三组的阳性率分别是25.00%、29.41%、62.50%，差异无统计学意义(P>0.05)。3个月时，只有极少数病例呈阳性。IgG抗体阳性率较高，至4个月时，三组的阳性率仍高达91.67%、87.06%、100.00%，但到6个月时，只有个别病例呈阳性。这也证实了IgM和IgG的变化规律，即随着病情的好转，IgM快速消失，而IgG持续较长一段时间。对于那些抗体阴性者，可能是因为检测时，已过了高峰期，抗体浓度下降所致，也可能是有些患者免疫功能较弱，而没有产生较高浓度的抗体所致。另外，也可能与试剂本身有关，李萍、徐万洲等的研究显示[5-6]，IgM和IgG抗体检测的灵敏度分别只能达到70%左右和90%左右，故而有些患者虽然产生了抗体，但由于试剂靶抗原选择的原因，而检测不出，造成假阴性。

本次研究发现，大部分患者在发病后，都产生针对病毒的特异性抗体，一般IgG浓度高于IgM浓度，但有极少数患者IgG浓度小于IgM浓度的现象。2个月时，IgM一般表现为低浓度，但有2例轻型患者，IgM浓度仍异常增高，分别为495.45AU/ml和365.76AU/ml。IgG在较长一段时间内维持较高水平，下降缓慢，至4个月时仍有较高浓度，但到6个月时，浓度多已降到阴性值以下。张兵华等[7]的研究发现，IgG的峰值可能在40d左右，本研究的数据可能已过了峰值，处于缓慢下降期。

对SARS康复者的研究表明，重症患者抗体浓度高于轻症患者[9]，有学者[10]推测，新冠肺炎患者可能也是这样。本研究发现，重型和危重型组在各阶段的阳性率和浓度多高于轻型和普通型组，但经检验各组间比较没有统计学差异。每组数值有高有低。个体差异较大，可能与个体的免疫反应的强弱有关，有人反应强，产生的抗体浓度高，反之则低。

通过以上研究发现，新型冠状病毒肺炎患者康复后，大多能产生针对病毒的特异性抗体，但并不能产生持久的免疫力，IgM抗体可能在2～3个月后消失，而IgG抗体在半年左右消失。

本次研究不足之处在于：病例数太少，特别是重型和危重型患者太少，结果可能存在片面性；早期没有监测抗体，未能监测到抗体达到峰值的时间；以及监测间隔时间太长，未能明确抗体转阴的具体时间。