膜相关蛋白Numb在结肠癌中的表达和意义

王佳雷，陈锋

（南宁市第二人民医院 胃肠外科，广西 南宁 530031）

0 引言

结肠癌是临床消化科常见恶性肿瘤，主要指患者结肠黏膜上皮组织发生癌变，持续进展后患者以大便带黏液和血、大便次数增多，引发肠梗阻症状[1]。由于患者早期缺乏典型症状，因此需要对患者采取良好的诊断方式，其中Numb属于高度保守的蛋白，早期参与神经系统的对称分裂，不仅在神经发育中发挥作用，还广泛参与细胞再生凋亡，与肿瘤发生病理之间存在一定联系[2]。目前关于Numb基因在结肠癌发生发展机制并不清楚，但关于其治疗靶点，对诊断与预后的意义[3]，临床需要及时开展研究，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料。选择南宁市第二人民医院2019年1月至2021年1月收入的50例结肠癌患者作为研究组，抽取同期正常健康人30例作为对照组。纳入标准：①研究组患者均经过病理结果证实；②均为未经放、化疗处理的癌组织；③知晓本文相关内容。排除标准：①健康者合并其他恶性肿瘤；②相关资料不完善者。研究组男27例，女23例，年龄35～81岁，平均（56.47±4.05）岁。根据临床Dukes标准进行分期：A期3例、B期17例、C期24例和D期6例。组织学分化程度进行分组：高分化组16例、中分化组25例、低分化组15例，4例分化程度缺失。对照组男11例，女19例，年龄35～82岁，平均（56.21±4.11）岁。两组基本资料，无差异，P＞0.05，可研究。

1.2 方法。免疫阻化使用兔抗人Numb单克隆抗体，DMEM培养基及胎牛血清来自Hyclone公司，相关要求均按照试剂盒说明书进行。免疫组织检测：使用Numb表达阳性病例的切片作为阳性对照，PBS代替一抗作为阴性对照组，对组织芯片实施常规免疫组化染色。一抗Numb单克隆抗体浓度为1:200。结果需要由2名病理医师在双盲情况下实施判定，光学显微镜下随机观察10个高倍镜视野，视野下随机100个细胞，计算阳性细胞百分比。其中阳性细胞分别为0～4分，细胞染色强度分别为0～3分，根据AB之和计算阳性表达强度，其中阴性（-）0分，弱阳性（+）1～2分，阳性（++）3～5分，强阳性（+++）6～7分。细胞培养：将结肠癌细胞培养在平皿上，37℃下5%CO2的孵箱中，使用含有10%胎牛血清的DMEM培养液培养，3～4 d传代1次[4]。

1.3 观察指标。正常组织与癌组织Numb表达情况，不同组织Numb阳性表达情况[5]。

1.4 统计学处理。本研究采用SPSS 18.0统计软件对本文数据进行分析，计量资料用（）表示，采用t检验，计数资料用百分比表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 正常组织与癌组织Numb表达情况。正常组织与癌组织之间Numb阳性率无差异，Dukes分期之间阳性率无差异（P＞0.05）；不同分化程度之间存在明显差异，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 正常组织与癌组织Numb表达情况

2.2 正常组织与癌组织Numb阳性表达情况。Dukes分期阳性表达情况无差异（P＞0.05）；随着Numb表达阳性不断增强，高分化不断增高，低分化不断降低，在正常组织癌组织、分化程度之间存在明显差异（P＜0.05）。见表2。

表2 正常组织与癌组织Numb阳性表达情况

3 讨论

随着人们生活习惯及饮食结构的改变，结肠癌发病人数呈不断上升趋势，早期诊断治疗，对患者具有重要意义。而结肠癌在组织病理学上表现为细胞极性丢失，上皮细胞向间质细胞转变[6]。通过研究Numb在结肠癌的表达情况，能够深入了解结肠癌发病机制，寻求治疗新途径，研究中Numb能够参与肿瘤的发生发展，但目前关于其的报道研究并不多见[7]。

本文通过研究Numb与结肠癌组织之间的关系，将癌组织与正常组织进行分析，结果显示：正常组织与癌组织之间Numb阳性率无差异，P＞0.05；Dukes分期阳性表达情况无差异，P＞0.05；结果证实了在高分化组织具有较高的阳性，说明Numb作为调控细胞分化分子，能够维持正常的结肠腺上皮细胞形态功能，并具有重要意义[8]。Numb表达程度与肿瘤分化之间，也存在一定关系，不同分化程度之间存在明显差异，P＜0.05。高分化不断增高，低分化不断降低，随着Numb表达阳性不断增强，在正常组织癌组织、分化程度之间存在明显差异，P＜0.05。说明Numb在正常细胞中调控作用，会随着肿瘤恶性程度增高，出现破坏，Numb作为维持细胞正常的保护机制，随着肿瘤恶性程度增加，而出现着较大的变化。但本文结果中Dukes分期之间阳性率无差异，但在结肠癌细胞中，不同分期的肿瘤细胞Numb表达量是存在差异的。而不同分期的结肠癌组织，均有Numb高表达及低表达的发生，Numb表达与淋巴结转移及TNM分期为负相关，证实了Numb分子可通过Numb-Notch拮抗抑制肿瘤的发生。而低分化的结肠癌组织中阳性率下降，说明Numb在正常细胞调控作用下，随着肿瘤恶性程度增高，出现破坏。目前在不同的肿瘤中，Numb生物学功能也存在不同，认为其在结肠癌中可能发挥抑癌基因的作用，通过调控P53的表达水平，抑制肿瘤发生，维持干细胞稳定状态，并抑制上皮间质转化诱导的肿瘤，达到抑癌效果[9]。

综上所述，Numb分子能够很好抑制结肠癌患者肿瘤细胞，具有良好的调控作用，对这类患者具有重要意义，值得应用。