安罗替尼治疗晚期卵巢癌对血清细胞凋亡分子和血管生成因子的影响

夏婷婷

卵巢癌是女性常见的恶性肿瘤，是妇科死亡的主要原因，早期症状不典型且不明显，当症状明显来院治疗时已经属于晚期，错过了手术时机。因此，保守治疗时延长晚期卵巢癌患者生存时间和提高生活质量的关键[1]。其中静脉化疗在临床上最为广泛，在杀灭肿瘤细胞的同时对正常组织和器官具有一定的损伤[2]。在常规化疗的基础上联合靶向药物治疗是治疗晚期肿瘤的新的治疗策略，最为被临床推崇[3]。血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体(VEGFR)是血管生成的重要蛋白，是抑制肿瘤的有效靶点，已经广泛运用于晚期非小细胞肺癌[4]，晚期结肠癌[5]等恶性肿瘤，并且取得了良好的效果。对于晚期卵巢癌的使用刚刚起步，是否具有良好效果需要更为系统的研究。本研究采用安罗替尼联合常规化疗治疗晚期卵巢癌的疗效显著，并且对血清细胞凋亡分子和血管生成因子具有影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2017年1月至2019年6月在我院就诊的晚期卵巢癌患者86例，按照随机数字法患者分为观察组和对照组，每组43例。观察组：年龄45～79岁，平均年龄(56.37±8.29)岁；体重44～72 kg，平均体重(56.38±8.19)kg；对照组：年龄43～79岁，平均年龄(55.92±7.68)岁；体重45～71 kg，平均体重(57.15±7.86)kg。2组年龄和体重等基线资料差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准：均行CT和病理确诊为晚期卵巢癌；未接受系统性的放化疗或者靶向治疗；卡氏评分>60分，预计生存期>3个月；均签署知情同意书和经医院伦理委员会审核通过。

1.2.2 排除标准：合并或者其他部位原发恶性肿瘤；合并心肝肾等重要脏器的功能不全；血液性和免疫性疾病；有药物过敏的患者；智力障碍和精神性疾病患者。

1.3 治疗方法 对照组予以TP方案化疗，观察组在对照组的基础上予以安罗替尼治疗。2组在化疗前予以地塞米松20 mg，奥美拉唑注射液40 mg和苯海拉明50 mg静脉推注。TP化疗方案：多西他赛注射液70 mg/m2加入250 ml 0.9%氯化钠溶液中，静脉滴注1 h；第2天卡铂50 mg/m2加入5%葡萄糖水500 ml静脉滴注1 h。3周为1个疗程，共6个疗程。观察组在对照组的基础上予以口服安罗替尼12 mg，1次/d，连续服用2周后，停1周，为1个疗程，共6个疗程。

1.4 疗效评价 2组6个疗程结束后评价疗效。症状消失且保持≥4周为完全缓解；病灶直径较治疗前降低≥30%，并且保持4周为部分缓解；病灶直径降低<30%但不超过20%为稳定；出现新的病灶或者病灶直径≥20%为进展。总有效率=(完全缓解+部分缓解)/总例数×100%。

1.5 血液标本保存与检测 患者入院时和6个疗程结束时抽取肘静脉血2 ml。采用离心机将血液离心，离心半径15 cm，离心速度3 000 r/min，离心15 min，抽取上清液放置在除酶管内，放置在-70℃冰箱中保存。血清标本癌抗原(CA)153、CA125、人附睾蛋白4(HE4)、β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、B细胞CLL/淋巴瘤2关联凋亡基因1(Bag-1)、生存素(Survivin)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、VEGF、乏氧诱导因子(HIF)-1ɑ和人血管生成素2(Ang-2)的检测采用酶联免疫法检测，试剂盒采用罗氏公司生产。

1.6 观察指标 观察2组的疗效和不良反应，及治疗前后血清CA153、CA125、HE4、β-HCG、Bag-1、Survivin、Bcl-2、Bax、MMP-2、VEGF、HIF-1α和Ang-2水平的变化。

2 结果

2.1 2组患者疗效比较 观察组的总有效率为86.05%，对照组总有效率为62.79%，观察组疗效明显优于对照组(χ2= 4.947，P<0.05)。见表1。

表1 2组患者疗效比较 n=43，例(%)

2.2 2组患者不良反应情况比较 2组患者不良反应情况差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 2组患者不良反应情况比较 n=43，例(%)

2.3 2组患者治疗前后血清CA153、CA125、HE4和β-HCG水平比较 2组患者治疗前血清CA153、CA125、HE4和β-HCG水平差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后2组均较治疗前明显降低，且观察组较对照组降低更明显，差异有统计学意义(P<0.01)。见表3。

表3 2组患者治疗前后血清CA153、CA125、HE4和β-HCG水平的变化

2.4 2组患者治疗前后血清凋亡因子含量比较 2组患者治疗前血清Bag-1、Survivin、Bcl-2和Bax水平差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后2组血清Bag-1、Survivin和Bcl-2水平较治疗前明显降低(P<0.01)，而血清Bax水平较治疗前明显升高(P<0.01)，观察组较对照组降低或升高更明显，差异有统计学意义(P<0.01)。见表4。

表4 2组患者治疗前后血清凋亡因子含量比较

2.5 2组患者治疗前后血清血管生成相关因子水平比较 2组治疗前血清MMP-2、VEGF、HIF-1α和Ang-2水平差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后2组均较治疗前明显降低(P<0.01)，而观察组较对照组降低更明显(P<0.01)。见表5。

表5 2组患者治疗前后血清血管生成相关因子水平比较

3 讨论

晚期卵巢癌的治疗主要予以铂类为主的TP方案化疗，患者缓解后有高达85%的患者出现复发[2]，故寻找更为有效，患者耐受的治疗方法异常成为晚期肿瘤治疗的热点。目前靶向治疗已成为恶性肿瘤尤其晚期恶性肿瘤治疗开辟了治疗的新时代。肿瘤的生长过程中，血管生成对肿瘤的生长和转移具有重要作用。肿瘤在生长过程中分泌多种细胞因子如VEGF、成纤维细胞生长因子和血小板生长因子，并与相应的受体结合后，激活信号通路促进肿瘤新生血管生成，促进肿瘤增殖和转移[6]。针对血管生成方面的靶向药物安罗替尼明显优于传统的索拉菲尼和舒尼替尼，不仅能够阻断多个血管生成途径的络氨酸激酶抑制剂而且能够通过对血管内皮生长因子受体[7]。本研究发现安罗替尼联合TP方案治疗晚期卵巢癌的疗效明显优于单纯TP方案化疗，并且在不良反应方面2组无明显差别，说明安罗替尼能够明显提高治疗晚期卵巢癌的治疗效果，并且不增加不良反应的发生。本研究发现安罗替尼联合TP方案与单纯TP方案治疗晚期卵巢癌降低机体血清的CA153、CA125、HE4和β-HCG水平更为明显。CA153和CA125均属于糖类抗原，属于光谱肿瘤标记物，在多种恶性肿瘤中呈高表达，并且是预后的重要指标[8]。本研究表明卵巢癌患者血清CA153和CA125水平呈明显升高，治疗后其水平出现明显降低，说明两者也是肿瘤负荷的重要指标。HE4是一种与精子成熟相关的蛋白酶抑制剂，在胚胎的发育过程中存在于体腔上皮化生组织的表面，在卵巢癌组织和患者血清中呈HE4高表达，并且是卵巢癌预后的独立预后因素，其水平升高预示着卵巢癌预后不良[9]。β-HCG是滋养层细胞分泌，是生殖系统恶性肿瘤的肿瘤标记物，在恶性肿瘤的诊断和预后判断方面具有重要作用[10]。结合本研究安罗替尼治疗能够更加明显降低机体血清CA153、CA125、HE4和β-HCG水平，说明安罗替尼对晚期卵巢癌的疗效显著。

肿瘤的生长与肿瘤血管生成和凋亡失衡具有重要关系，凋亡失衡是导致肿瘤持续增殖的根本机制，检测凋亡分子表达水平是评估肿瘤恶性程度和临床疗效的重要指标。Bag-1是抗凋亡家族成员，位于染色体9q12，是一种多功能蛋白，在正常组织中不表达，在多种肿瘤中呈高表达，与肿瘤分化，淋巴结转移和临床分期具有明显相关性[11]。Bcl-2也是一种抗凋亡基因，具有抑制肿瘤的凋亡，在肿瘤的发生发展具有促进作用，与肿瘤的分级，分期和预后具有明显相关性。Bcl-2与Bag-1具有高度同源性，两者可以形成复合物，增强抗凋亡的功能，与影响蛋白的稳定性有关[11]。本研究发现安罗替尼联合TP方案治疗晚期卵巢癌能够明显降低血清Bag-1和Bcl-2水平，抑制肿瘤细胞的凋亡，从而达到抑制肿瘤的作用。Survivin是一种抗凋亡基因，在多种恶性肿瘤中呈高表达，通过调节细胞增殖、转移、凋亡和细胞耐药的过程中具有重要作用[12]。Bax蛋白主要引起线粒体细胞膜的通透性，促进细胞色素C进入胞质，而Bcl-2主要维持线粒体膜的完整性，抑制细胞色素C的释放，故Bcl-2和Bax的比例调节细胞死亡和存活的动态平衡[13]。本研究发现安罗替尼联合TP方案治疗晚期卵巢癌能够明显降低血清Survivin和提高Bax水平，说明安罗替尼能够调整促凋亡因子和凋亡因子之间的平衡，从而达到抑制肿瘤的目的。

正常生理条件下血管生成在胚胎发育和组织修复阶段，而异常的新生血管是恶性肿瘤的特异性标志之一。VEGF是一种多功能的二聚体糖蛋白，与血管内皮细胞特异性结合，加速血管内皮细胞的分裂。在正常机体呈低表达，而在发生癌变是出现高表达，并且与肿瘤的预后具有重要的联系[14]。Ang-2是新生血管形成的强化因素，具有降低血管的稳定性，增强血管的可塑性，对血管形成过程具有明显的调节作用，参与了肿瘤血管的形成，促进肿瘤的侵袭和转移[15]。HIF-1α在多种肿瘤中呈高表达，促进靶基因的表达如VEGF等，从而增加肿瘤血管形成，促进肿瘤细胞增殖和转移，因此对调控VEGF的表达具有重要调控作用[16]。MMP-2在肿瘤血管形成中扮演着重要角色，能够降低血管基底膜和细胞外基质，参与血管内皮细胞的迁移过程[17]。在卵巢癌的研究中发现卵巢癌组织中表达明显高于正常卵巢组织，并且发现MMP-2对卵巢癌的诊断和浸润具有重要作用[18]。本组研究发现安罗替尼联合TP方案化疗较单纯化疗比较更加能够明显降低血清MMP-2、VEGF、HIF-1α和Ang-2水平，说明安罗替尼具有降低血清MMP-2、VEGF、HIF-1α和Ang-2的作用。

综上所述，安罗替尼联合TP方案治疗晚期卵巢癌的疗效显著，其机制与安罗替尼调整细胞凋亡分子和血管生成因子有关。