PTEN、P53蛋白表达与甲状腺癌发生发展的关系
2021-07-07许丽颖魏兰涛
李 明 许丽颖 魏兰涛
在临床上，甲状腺癌是常见的头颈部恶性肿瘤之一，在我国的部分地区甲状腺癌的发病率正以每年4%的速度增长。侵袭与转移是甲状腺重要的特征，也是导致甲状腺癌患者死亡的重要因素，相关资料表明肿瘤的转移和浸润是1种复杂的动态过程，同肿瘤基因失控以及多种细胞因子和受体之间作用关系密切[1]。PTEN基因属于具有磷酸酶火星的抑癌基因，能够对细胞增殖产生抑制作用，促进细胞凋亡并参与细胞周期调控过程，近年来发现在恶性肿瘤转移过程中也起到重要作用；P53基因目前已经证实为抑制癌基因常见的的一类，而在肿瘤组织中一半以上出现P53基因突变，发生空间构象改变造成对细胞生长凋亡过程失去控制继而转变为癌基因，但是临床对于甲状腺癌患者体内两种基因变化情况临床报道少见[2]。本研究分析了甲状腺癌组织中人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)、P53蛋白的表达及其意义，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
本次研究收集了我院在2017年1月至2019年10月期间收治的80例甲状腺癌组织及80例甲状腺良性肿瘤组织。入选标准：①甲状腺癌的诊断标准参考2015年NCCN制定的甲状腺癌诊断指南中的标准；②年龄≤79岁；③经病理学检查予以证实；④患者无放化疗史及内分泌治疗史。排除标准：①有甲状腺其他手术史者；②合并有其他恶性肿瘤者；③免疫功能疾病患者；④病理学资料缺失。甲状腺癌组，年龄33～78岁，平均(52.2±12.6)岁，其中男性29例、女性51例；病理类型：乳头状癌64例、滤泡癌11例、髓样癌5例；肿瘤分化程度：低分化32例、中分化29例、高分化19例；颈部淋巴结转移阳性40例；TNM分期：Ⅰ期20例、Ⅱ期28例、Ⅲ期25例、Ⅳ期7例。良性组，年龄29～79岁，平均年龄(50.8±14.3)岁，其中男性25例、女性55例，经病理学检查证实：结节性甲状腺肿38例、甲状腺纤维瘤32例、其他10例。2组患者就一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。
1.2 指标检测方法及判断标准
对获取的组织进行切片在载玻片烘烤，在二甲苯浸泡1.5 h进行脱蜡和水洗，冲洗后加入缓冲液加入山羊血清进行封闭，加入一抗后在4 ℃过夜，加入二抗放置15 min置入缓冲液，加入辣根酶标记链霉卵白素置入缓冲液，进行DAB显色后用苏木精复染细胞核，然后再次水洗、乙醇脱水再用二甲苯透明、中性树脂封片。在显微镜下进行观察。
免疫组化结果判定：PTEN蛋白、P53蛋白阳性表达分为黄色、棕黄色和褐色。①根据着色强度分为：0分为无色、1分为淡黄色、2分为棕黄色、3分为褐色、黑色；②根据阳性细胞比例分为：1分为阳性细胞所占比例≤10%、2分为阳性细胞占比例11%～50%、3分为阳性细胞占比例51%～75%、4分为阳性细胞占比例>75%，阴性为两种积分相乘总分<3分、阳性为≥3分；“-”表达；为3～5分，“+”表达；为6～9分，“++”表达；>9分，“+++”表达。
1.3 统计学处理
2 结果
2.1 甲状腺癌与甲状腺良性肿瘤组织中的PTEN蛋白、P53蛋白阳性表达率差异
甲状腺癌组织中PTEN蛋白阳性表达率(68.75%)和P53蛋白阳性表达率(63.75%)，均高于良性组的15.00%、17.50%，具有统计学差异(P<0.05)。见表1、表2。
表1 甲状腺癌与甲状腺良性肿瘤组织中的PTEN蛋白阳性表达率差异/例
表2 甲状腺癌与甲状腺良性肿瘤组织中的P53蛋白阳性表达率差异/例
2.2 甲状腺癌组织中的PTEN蛋白、P53蛋白阳性表达率与临床病理学特征的关系
在不同TNM分期、是否发生淋巴结转移的甲状腺癌组织中的PTEN蛋白阳性表达率具有统计学差异(P<0.05)；是否发生淋巴结转移的甲状腺癌组织中的P53蛋白阳性表达率具有统计学差异(P<0.05)。见表3、表4。
表3 甲状腺癌PTEN蛋白表达与肿瘤临床病理学特征的关系(例，%)
表4 甲状腺癌P53蛋白表达与肿瘤临床病理学特征的关系(例，%)
2.3 甲状腺癌组织中的PTEN蛋白、P53蛋白表达的相关性分析
甲状腺癌组织中PTEN蛋白与P53蛋白阳性表达呈显著正相关关系(Spearman秩相关系数=0.836，P<0.05)。见表5。
表5 甲状腺癌组织中的PTEN蛋白、P53蛋白表达的相关性分析/例
3 讨论
甲状腺癌是1种临床上常见的头颈部恶性肿瘤，其发病率为全身其他部位恶性肿瘤的1%[3-4]，且在各个年龄段均可以发病，女性患者是男性的3倍之多，近年来呈上升趋势。临床上对该病治疗主要采用手术切除的方法，但是术后有些患者会出现复发和转移[5-6]。在早期，颈部肿物并不明显，患者不会产生不适，但是到晚期后，会对压迫与侵犯人体组织，使患者出现吞咽、呼吸及发音功能异常等，对患者生活带来不便，威胁患者生命安全[7-8]。
本研究分析了甲状腺癌PTEN、P53蛋白表达情况，PTEN为最早发现的抑癌基因，具有磷酸酶活性，因此可以保证人体物质代谢过程与内环境稳定，一旦PTEN缺失同恶性肿瘤进展过程以及预后不良关系密切[9]。动物学试验证实了PTEN 缺陷的鼠胚胎细胞出现明显增生与胚胎致死性表现，杂合子基因的敲击动物在不同组织类型中肿瘤的发生率均显著增高[10]。研究发现PTEN基因一方面会造成细胞周期停滞与程序性死亡，对细胞粘连、移动与分化产生调节作用，通过下调PIP3 水平造成细胞停止于G1期诱导细胞凋亡；另一方面PTEN 还可以调节细胞生长、增殖、迁移、分化等多种效应，但是其对于患者性别、年龄以及包膜完整性方面无明显关联，而是与肿瘤的分期、区域淋巴结转移具有高度相关性，而且临床分期越高以及淋巴结转移出现后其表达水平越低，说明同恶性肿瘤生物学行为与预后关系紧密，同本研究报道相似[11]。此外基因学发现PTEN基因含具备9个外显子和8个内显子，含有的多个CGG重复序列可以为甲基化提供基础，其高甲基化会让基因处于静止状态，造成PTEN基因低水平转录甚至缺失[12]。P53基因则是抑癌基因常见的一类，在恶性肿瘤研究中广泛研究，人类肿瘤组织中一半以上发现有P53基因的突变，细胞空间和构象发生变化，造成了该基因对于细胞生长凋亡及DNA修复的调控作用[13]。研究显示P53基因的突变会导致甲状腺癌的形成，同时可以让甲状腺癌由高分化转变为低分化或者未分化进展，突变的P53蛋白可以抑制人体野生类型P53基因活性，表现会细胞突变、丢失、重排等形式而失活，造成了DNA损伤并无法修复，细胞的遗传不稳定并向恶性增殖演变[14]。研究发现PTEN为具有双特异磷酸酶活性的抑癌基因，具有促进自噬体的形成作用，而p53蛋白则可以抑制人体野生型基因活性，造成DNA损伤不能被修复，细胞遗传不稳定，因此两者可能通过相互影响、相互促进作用造成患者体内抑癌基因转为癌基因，促进了肿瘤发生和发展[15]。本研究显示，甲状腺癌组织中的PTEN蛋白阳性表达率68.75%、P53蛋白阳性表达率63.75%均高于良性组的15.00%、17.50%，说明在甲状腺癌中呈现PTEN蛋白、P53蛋白阳性表达。在不同TNM分期、是否发生淋巴结转移的甲状腺癌组织中的PTEN蛋白阳性表达率具有统计学差异；是否发生淋巴结转移的甲状腺癌组织中的P53蛋白阳性表达率具有统计学差异，说明PTEN蛋白、P53蛋白阳性表达对于甲状腺癌发生淋巴结转移具有重要判断价值，而PTEN蛋白阳性表达对甲状腺癌分期具有一定的价值。甲状腺癌组织中的PTEN蛋白与P53蛋白阳性表达呈显著的正相关关系，说明两项指标与甲状腺癌的发生具有显著相关性。本研究优势在于证实了PTEN蛋白、P53蛋白在甲状腺癌呈现高表达状态，而且对于肿瘤分期和淋巴结转移情况具有辅助判断作用。
综上所述，甲状腺癌PTEN、P53蛋白呈高表达较甲状腺良性肿瘤组织，并且与肿瘤的发生发展具有一定的密切关系。
