血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3对原发性肝癌患者近期疗效及预后的预测价值*

刘炼玲 李 勇

1.重庆市万州区人民医院消化内科 (重庆，404100) 2.重庆三峡中心医院(重庆大学附属三峡医院)消化内科

原发性肝癌(PHC)是临床常见的恶性肿瘤，我国为乙型肝炎大国，PHC发病率较高且仅次于肺癌和胃癌，位居我国各类恶性肿瘤发病率的第3位，死亡率高居第2位，对国民生命健康构成巨大威胁[1]。多项临床研究证实，PHC发病隐匿，病灶生长速度快，肿瘤细胞分化程度低，患者缺乏典型临床症状，就诊时病情已发展至中晚期，失去最佳手术时机而普遍采用经导管动脉化疗栓塞术(TACE)治疗，TACE术后肝内转移复发是影响远期疗效的重要因素[2,3]。随着分子医学的不断发展，目前发现多种与PHC相关的肿瘤抗原与细胞因子，其中甲胎蛋白异质体(AFP-L3)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、可溶性B7-H3(sB7-H3)是近年来PHC患者中发现的具有特异性的指标[4-6]，其在PHC发生发展过程中均发挥重要作用。本研究中通过检测PHC、肝脏良性肿瘤患者及健康体检者血清中上述指标的水平，分析血清AFP-3、CYFRA21-1及sB7-H3水平与PHC患者术后近期疗效及预后的关系，同时探讨上述指标对PHC的诊断效能。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016年1月至2017年1月于重庆市万州区人民医院行TACE术的PHC患者作为研究对象，设为PHC组，纳入标准：①患者符合《PHC诊疗规范(2019年版)》中关于PHC的诊断标准[7]；②经病理组织学、影像学确诊者；③卡氏功能状态评分(KPS)≥60分者[8]；④TNM分期为Ⅱa～Ⅲb者；⑤患者无TACE手术禁忌证；⑥患者均签订知情同意书。排除标准：①预计生存期<6个月者；②免疫系统抑制者；③凝血功能障碍、活动性胃出血者；④肝肾功能不全者；⑤入组前接受靶向药物治疗、放疗等；⑥合并其他部位恶性肿瘤者。同期选取于该院接受治疗的40例肝良性肿瘤患者，设为肝良性肿瘤组。纳入标准：①患者年龄≥18岁；②经病理组织学、影像学确诊者；③患者均签订知情同意书。排除标准：①合并心、肺等脏器功能严重障碍者；②沟通障碍者。另选取健康体检者40例作为正常对照组，均签订知情同意书。PHC组70例，男36例，女34例；年龄28～76岁，平均(58.40±10.34)岁。肝良性肿瘤组40例，男21例，女19例；年龄29～77岁，平均(58.52±10.41)岁。正常对照组40例，男22例，女18例；年龄28～78岁，平均(58.38±10.27)岁。3组受试者年龄、性别比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经本院伦理委员会批准。

1.2 检测方法 PHC组患者均进行TACE术治疗。具体操作：采用Seldinger改良技术，导管通过经皮右股动脉穿刺超选择性插入到肿瘤供血靶动脉或选择性插入肝固有动脉后，造影观察肿块的部位、大小及血供情况。采用GEMOX化疗方案：吉西他滨800～1 000 mg/m2，奥沙利铂85～100 mg/m2，混合上述药物与液态碘化油并以适当速度注入靶动脉，再注入明胶海绵颗粒进行靶动脉栓塞。每月重复1次，连续操作2～3次。采集3组受试者清晨空腹静脉血5 ml，以离心速度1 500 r/min，半径13.5 cm，离心10 min，取上清液保存于-80℃冰箱。采用酶联免疫吸附法测定3组受试者血清AFP-3、CYFRA21-1及sB7-H3水平，试剂盒购自上海恒斐生物科技有限公司，严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.3 近期疗效标准 参照文献[9]评估PHC患者的近期疗效：①完全缓解(CR)：目标病灶完全消失，所有病理性淋巴结短径低于10 mm；②部分缓解(PR)：目标病灶长径总和至少缩小30%；③稳定(SD)：目标病灶长径总和缩小未达PR或增加未达PD；④进展(PD)：目标病灶的长径总和至少增加20%或出现新病灶。按照近期疗效标准将PHC患者分为两组：CR+PR组(n=32)和SD+PD组(n=38)。

1.4 随访 以患者出院为观察起点，对PHC患者进行电话、微信结合复诊随访，随访3年，随访期间若患者死亡则终止随访，剔除失访患者，记录患者生存期(OS)。按照OS将PHC患者分为两组：OS>3年组(n=36)和OS<3年组(n=34)。

2 结果

2.1 3组受试者血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3水平比较 与正常对照组比较，PHC组和肝良性肿瘤组血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3水平均显著上升(P<0.05)；与肝良性肿瘤组比较，PHC组血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3水平均显著上升(P<0.05)。见表1。

表1 三组患者血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3水平的比较

2.2 不同近期疗效患者血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3水平的比较 治疗后CR+PR组和SD+PD组患者血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3水平均较治疗前降低(P<0.05)，且CR+PR组患者血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3水平均显著低于SD+PD组(P<0.05)。见表2。

表2 PHC患者不同近期疗效与血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3水平的比较

2.3 不同预后受试者血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3水平 OS>3年组患者血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3水平均显著低于OS<3年组(P<0.05)。见表3。

表3 不同预后受试者血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3水平比较

2.4 血清AFP-L3、CYFRA21-1、sB7-H3及三者联合对PHC的诊断效能 血清AFP-L3、CYFRA21-1、sB7-H3联合检测诊断PHC的敏感度高于单独检测。见表4。

表4 血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3及三者联合对PHC的诊断效能 (%)

2.5 血清AFP-L3、CYFRA21-1、sB7-H3及三者联合诊断PHC的ROC曲线 构建AFP-L3、CYFRA21-1、sB7-H3及三者联合诊断PHC的ROC曲线，结果显示三者的曲线下面积分别为0.885、0.815、0.764、0.911。见图1。

图1 血清AFP-L3、CYFRA21-1、sB7-H3及三者联合诊断PHC的ROC曲线

3 讨论

3.1 PHC早期诊断的意义 目前尚未完全阐明PHC的发病机制，相关研究显示与环境因素、病毒性肝炎、黄曲霉、肝纤维化等有关[10]。全身化疗是目前被国际认可的治疗PHC的主要手段，其优点在于可满足无法手术患者的治疗需求，此外通过肝动脉局部注射化疗药物的栓塞治疗已被临床广泛应用，而对于无法手术的中晚期PHC患者，TACE已成为主要治疗手段。TACE能使PHC患者病灶部位肿瘤完全坏死率达到15%～20%，疗效确切[11]。但有研究指出，TACE治疗会影响患者肝功能，单纯TACE对延长肝癌患者生存期效果不佳[12]。PHC临床疗效取决于早期诊断的准确性，其预后影响因素也较多，关于PHC诊疗及预后的相关研究一直以来是医务人员关注的热点问题。

3.2 血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3水平与PHC患者近期疗效及预后的关系 本研究中3组受试者的血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3水平比较差异有统计学意义，且患者与健康体检者比较上述因子水平更高，而PHC组患者的上述因子水平高于肝良性肿瘤组，提示AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3可能与疾病严重程度有关。AFP-L3是AFP一种亚型之一，其由肿瘤细胞表达，血清AFP-L3水平升高提示肿瘤细胞生成更多的AFP-L3分子，与肿瘤细胞数量增多有关，AFP-L3体现出肿瘤细胞的异质性[13]。与AFP相比，AFP-L3具有更高的特异度。CYFRA21-1是一种细胞角蛋白19可溶性片段之一，属于构成细胞框架的间丝状物，在癌变细胞中细胞角蛋白能够促进CYFRA21-1的表达及释放，参与癌细胞的增殖、转移，导致血清CYFRA21-1表达水平上升[14]。王斐斐等[15]测定了PHC患者与健康人群中CYFRA21-1表达水平，结果显示PHC患者CYFRA21-1表达水平高于健康者，同时该研究指出CYFRA21-1水平与PHC患者的临床分期、肿瘤浸润深度具有相关性。另一项研究指出，血清中CYFRA21-1表达水平升高提示组织中CYFRA21-1表达水平降低，该指标能够客观反应肝癌患者肝脏组织的坏死程度[16]。sB7-H3是人体中一种Ⅰ型跨膜蛋白，在机体多种组织内均可检测到sB7-H3的mRNA表达。目前研究证实在B细胞、单核细胞、树突状细胞及活化T细胞中均能检测到sB7-H3的表达，该分子可直接参与机体免疫应答的各个过程[17]。李成德等[18]研究显示，sB7-H3在乳腺癌、胰腺癌、骨肉瘤、肾癌、肝癌等肿瘤患者中高水平表达且参与肿瘤的发生发展过程。本研究探讨了AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3与PHC患者近期疗效及预后的相关性，结果显示，CR+PR组患者的血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3水平均显著低于SD+PD组；OS>3年组患者的血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3水平均显著低于OS<3年组，提示AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3水平与PHC患者近期疗效及生存期之间存在一定关系。

3.3 血清AFP-L3、CYFRA21-1、sB7-H3水平对PHC的诊断价值 本研究通过检测PHC患者血清AFP-L3、CYFRA21-1、sB7-H3的表达水平，结果显示血清AFP-L3、CYFRA21-1、sB7-H3联合检测诊断PHC的敏感度高于单独检测，三者联合检测曲线下面积最大，提示上述指标诊断PHC虽有不同程度的诊断价值，但各自存在一定的局限性，联合检测可弥补单独检测的不足，故能提高诊断效能。

综上所述，血清AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3与PHC患者的近期疗效及远期预后均具有一定相关性，联合AFP-L3、CYFRA21-1及sB7-H3水平检测诊断PHC时诊断效能更高，具有一定的临床价值。