武汉地区献血者TPPA确证阳性人群特征分析*

陈邦锐 赵磊 许婷婷 刘涛 张红 乐淼

梅毒是由梅毒螺旋体（treponema pallidum，TP）感染引起的一种慢性传染性疾病，传播途径主要包括性接触、血液传播、垂直传播。近年来，梅毒在我国的发病率迅速攀升，2010年上升至26.86/10万，居全国乙类传染病的第3位。武汉地区梅毒感染人群呈上升趋势，防治形势严峻[1]。而作为一家采供血机构，为了保证血液安全，一直遵守国家行业法律法规，不断提高血液检测能力。行业内针对无偿献血者的梅毒感染情况分析，多采用ELISA检测数据，鉴于目前的ELISA试剂，多有假阳性灰区值样本，所以其梅毒阳性献血者并不能反应真实的感染情况，对于单侧试剂阳性或灰区值没有剔除，没有进一步对ELISA阳性样本做梅毒螺旋体明胶凝集实验（TPPA）确证分析。TPPA采用的是纯化的致病性梅毒螺旋体 （Nichols株）抗原成分包被在人工载体明胶粒子上，对梅毒特异性抗体检测具有高度特异性和敏感性，是目前公认的梅毒确证试验。因此，为了解武汉地区自愿无偿献血人群的梅毒流行病学特征，加强临床用血安全控制，为制定梅毒经血液传播预防控制策略提供依据，本研究分析了212例武汉地区自愿无偿献血者血液梅毒TPPA确证阳性样本，分析其人群结构特征，现报告如下。

材料与方法

1 样本 武汉地区2018年1月～6月无偿献血样本78 997份经TP-ELISA双试剂检测，331例为TPELISA初筛阳性，再用TPPA方法进行确证实验，共有212例确证为TPPA阳性。

2 试剂 梅毒酶联免疫双抗原夹心法试剂（上海科华），试剂批号201708251；梅毒酶联免疫双抗原夹心法试剂（广州丽珠），试剂批号2017091608；梅毒螺旋体抗体明胶凝集试验TPPA（日本富士株式会社），试剂批号VN81025；快速血浆反应素实验RPR（上海科华），试剂批号20181005；梅毒胶体金试纸条（厦门新创），试剂批号2018113351；所用试剂均在有效期内使用，且经中国食品药品检定研究院批检合格。

3 仪器 FAME全自动酶免分析仪（瑞士HAMILTON）；STAR加样仪（瑞士 HAMILTON）；洗板机（TECAN）；酶标仪（SUNRISE）；离心机（SORVAL）；混旋仪。

4 方法 对所采集的血液标本采用2家试剂同时进行抗-TP检测（ELISA），经检测均为阳性标本再采用该试剂进行双孔复试，任一试剂复试结果阳性则均判为阳性。TP-ELISA阳性样本再用梅毒螺旋体抗体明胶凝集试验进行确证，最后针对TPPA确证为阳性的样本补充快速血浆反应素实验RPR、梅毒胶体金试纸条实验，具体操作严格按照试剂盒说明书进行。

5 统计学处理 应用SPSS20.0进行数据处理，采用卡方检验，计数资料以率（%）表示，P＜0.05表示差异有统计学意义。

结 果

武汉地区无偿献血样本78 997份经TP-ELISA双试剂检测，331例为TP-ELISA初筛阳性，再用TPPA方法进行确证实验，共有212例确证为TPPA阳性，献血人群梅毒确证阳性率为0.27%（212/78 997），见表1。TPPA确证为阳性的样本补充其他联合检测项目见表2，结果有快速血浆反应素（RPR）检出40例，梅毒胶体金试纸条检出193例；根据献血者信息进行分析，按照性别、年龄、婚姻状况、学历、职业分类，女性献血者确证阳性率0.34%高于男性献血者0.23%，差异有统计学意义（χ2=8.24，P＜0.05）；已婚献血者确证阳性率0.39%高于未婚献血者0.17%，差异有统计学意义（χ2=36.13，P＜0.05）；不同年龄段的献血者确证阳性率，以36～45岁年龄段阳性率最高，为0.66%，而18～25岁年龄段阳性率最低，为0.08%，不同年龄段间差异有统计学意义（χ2=149.80，P＜0.05）；在不同文化程度上，中专学历献血者梅毒确证阳性率最高0.76%，本科学历最低，阳性率为0.10%，不同文化程度的献血者之间确证阳性率差异有统计学意义（χ2=141.04，P＜0.05）；在职业分类上，农民和工人献血者确证阳性率最高为0.66%，学生人群阳性率最低0.05%，不同职业间差异有统计学意义（χ2=177.10，P＜0.05），具体见表3。

表1 无偿献血者梅毒初筛及确证结果

表2 TPPA确证为阳性的样本多项目分析（212例）

表3 无偿献血者TPPA确证阳性人群特征分类

讨 论

武汉地区无偿献血者总体梅毒抗体阳性率，与国内其他地区相比，阳性率处于中游水平。值得注意的是，近几年来的年度阳性率呈递增趋势，血站因梅毒阳性导致的血液报废率，在所有四项免疫学检测项目中仅次于HBsAg阳性的报废率。因此在本地区积极开展献血宣传，进一步加强献血前的征询，尽量从源头上排除梅毒感染高危人群，是今后血液采集工作的努力方向之一，以期能进一步降低因梅毒阳性造成的血液报废。而在以往同行业文献报道中，采用数据多为ELISA检测阳性数据，这其中就包括了大量单侧阳性和灰区结果，据报道其中包含有一定比例的假阳性，笔者从另一角度，直接选取ELISA阳性样本，再做TPPA确证，将其中确证为阳性的样本进行分析，从表1可以看出，无偿献血者在本地区的感染率为0.27%，低于南京地区的0.35%[2]、广州地区的0.37%[3]，可能与笔者采用的数据为确证后的阳性数据有关。从表2可以看出，RPR阳性占总体梅毒确证阳性的18.87%（40/212），TPPA确证和RPR同时阳性表明该献血者处于现症感染，说明存在较多的现症感染献血者，有必要做好相关的咨询告之工作，建议其采取进一步的检测治疗，从而有效减少其在家庭内部和社会上的传播，同时现症感染者参与无偿献血，不排除其带有自我体检的目的，因此给采血前的征询工作也带来挑战与压力。另外在表2中，金标试纸条阳性占TPPA确证阳性的91.04%（193/212），说明能有效在献血前剔除大部分梅毒抗体阳性献血者，金标法具有检测时间快、假阳性少的优点，适合批量快速筛查，但其灵敏度较低，会导致少量漏检，笔者总结漏检的原因还有以下几点：①手工加样，有差异，因加量不足而导致弱阳性漏检；②另外强阳性标本因为带现象而出现假阴性；③金标试纸条在存放使用、室外操作环境条件方面难以得到保证，造成金标试纸条灵敏度有所下降；④批量筛查时因反应时间不够，过早判读结果导致弱阳性漏检；⑤加样时如果过早的加入缓冲液，导致层析速度过快，没有充分反应就越过了检测线而漏检。以上问题我们在以后的工作中会予以注意，严格操作要求，提高操作水平，提升检测能力。

在表3中，我们从性别、年龄、婚姻、文化程度、职业多角度分析，献血者梅毒阳性率在不同年龄、学历、职业间存在差异，这与国内许多地方的报道结果一致。初中和中专学历献血者，其梅毒阳性率越高，说明低学历人群对梅毒了解少，健康卫生知识缺乏，这个与广州、开封、襄阳等地一致[3-5]，说明这是个共性问题；年龄上阳性率呈上升趋势，以36～45岁人群居多，这类人群不属于献血主力人群，反而梅毒确证阳性数最高，可能由于梅毒属于可治愈的性传播疾病，多数人在患病后有意或无意中接受了青霉素治疗而痊愈，死亡病例不多，导致梅毒抗体阳性人群随年龄增长而累积。从职业上比较，农民和工人的阳性率最高，与兰州、茂名[6，7]等地相似，可能与农民和工人的个人卫生以及健康安全防范意识不强，且参与献血的农民和工人多为外地人，常年离家在外，不排除寻求生理慰藉而感染的可能，这类人员实际上很多是无固定职业人员，在今后的工作中应加强对这部分人员的献血宣传，以免造成不必要的资源浪费。全国无偿献血者梅毒感染总体情况是上个世纪女性献血者阳性率明显高于男性，到21世纪后男性献血者梅毒感染率明显上升。本文中的结果是女性献血者梅毒比例高于男性，有差异性，这与石家庄地区一致[8]，而与嘉兴地区相反[9]；而婚姻状况中，已婚献血人群多于未婚，这也是与年龄有关，随着年龄的增长，已婚比例自然增高，同时梅毒确证阳性中已婚人群比例的增高，也为整个社会梅毒的预防提出新要求，夫妻间传播，继而导致垂直传播。

综上所述，武汉地区无偿献血者梅毒感染情况分析，基本上与全国其他地区一致，比如在年龄、婚姻、文化程度、职业上的特征是吻合的，除了性别因素，在同行业的调查中，各地区间也不一致，可能与每个地区的献血者性别比例差异有关。

近年来随着武汉无偿献血事业的快速发展，献血人群覆盖面广，流动人口也在不断增加，部分人群对献血知识的认知仍有所欠缺，这给血液安全带来了挑战。如何提供安全、可靠的血液资源来满足日益增长的临床用血需求一直是采供血机构面临的一项艰巨的任务。为了尽可能的提高血液的合格率，降低宝贵的血液资源的浪费，我们认为至少应该做到以下几点：①通过多种媒体形式，特别当前社会流行的自媒体，提高献血人群对无偿献血知识的认知度，了解相关疾病防控知识。②对献血前咨询提出更高要求，严格把好无偿献血招募质量关，力求献血者能真实面对献血登记表上所列的相关问题，加强完善保密性弃血等相关工作，让高危人群能自觉放弃。③加大宣传力度，特别是针对18～35岁之间的青壮年学生群体，更要加强宣传，尽可能的发展为自愿定期的无偿献血固定人群。④采血前开展快速检测以降低检测不合格率，我们应该尽快的把TP金标法快速检测提上日程，这个从表2中已经可以有效看出，试纸条在TPPA确证为阳性的样本中检出率高达91.04%，说明如果采用献血前快速筛查法将有效降低梅毒血液报废率。⑤继续扩大固定无偿献血者队伍，加强固定献血者队伍建设，从低危人群中采集血液。

利益冲突所有作者均申明不存在利益冲突