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富源某养殖场猪链球菌病诊断体会

2021-06-23荀绍雄李华高付兆金雷洪梅李方志

畜牧业环境 2021年3期
关键词:狂犬病毒抗原猪瘟

晏 波,荀绍雄,李华高,付兆金,雷洪梅,潘 基,李方志

(1.富源县大河镇农业农村综合服务中心,云南富源 655000;2.富源县农业农村局动物疫病预防控制中心,云南富源 655000)

1 前言

富源县某养殖场2019年8月存栏数340头,母猪42头,仔猪172头,小肥猪126头。8月16日2头母猪高发病,体温41.2℃,8月17日突然死亡,未见任何症状。8月20日,仔猪突然死亡12头,小肥猪9头。8月21日至9月2日,陆续有有猪死亡,症状均不明显。经剖检,肝脏明显肿大,脾脏正常,肠系膜了针尖大小出血点,腹股沟淋巴结肿大、血性浸润,胸腔可见少量黄色渗出物。采集猪肾脏、脾脏、淋巴等组织样品编为病料1号,猪全血编为病料样品2号,送检云南农业大学动物健康检测与评价与评价云中心。

2 材料与方法

2.1 检测项目

猪瘟病毒抗原、猪伪狂犬病毒抗原、猪蓝耳病毒抗原。

2.2 检测方法

2.2.1 猪瘟病毒抗原检测。采取送检病料,用TAKARA试剂盒法提取样品中RNA,进行RT-PCR反转录成cDNA后,使用TAKARA公司rTaq,加入PCR扩增相应特异性片段。扩增产物用琼脂糖凝胶电泳检测,凝胶成像仪照像。

2.2.2 猪伪狂犬病毒抗原检测。采取送检病料,采用TaKaRa DNA提取试剂盒提取样品组织中的DNA,加入PCR 扩增相应特异性片段。扩增产物用琼脂糖凝胶电泳检测,凝胶成像仪照像。

2.2.3 猪蓝耳病毒抗原检测。采取送检病料,用TAKARA试剂盒法提取样品中 RNA,进行RT-PCR反转录成cDNA后,使用TAKARA公司rTaq,加入PCR扩增相应特异性片段。扩增产物用琼脂糖凝胶电泳检测,凝胶成像。

3 结果

3.1 猪瘟病毒抗原结果

目的条带大小为:272bp,本次检测结果未检出猪瘟病毒抗原。

3.2 猪伪狂犬病毒抗原结果

猪伪狂犬病毒目的条带:343bp,本次检测结果病料未检出猪伪狂犬病毒抗原。

3.3 猪蓝耳病毒抗原结果

猪蓝耳病毒目的条带:835bp,本次检测结果病料1和病料2均未检出猪蓝耳病毒抗原阳性。

4 结果分析

结果表明检测的猪瘟病毒抗原、猪伪狂犬病毒抗原为阴性、猪蓝耳病毒抗原均为阴性。3种需检测的结果均为阴性,进行梳理后,做猪链球菌检验。细菌初培养:严格的无菌操作下剪切组织病料,放入营养肉汤的EP管中,在37℃摇床培养过夜。细菌的鉴别培养:取菌液划线接种于兔血液琼脂培养基,37℃过夜培养后观察菌落形态,革兰氏染色后镜检。检测结果:1号细菌并未出现溶血;2号细菌在血平板上生长良好,并出现浅灰色、圆整湿润的露滴样优势菌落,周围有溶血现象,革兰氏染色后镜检后观察到球状阳性菌,判定为链球菌。结论:经培养鉴定以及镜检判断,样品中链球菌阳性。

5 结语

该养殖场之所以出现链球菌病,导致巨大的经济损失,甚至面临清场,其原因有下列几个方面:(1)该养殖场管理混乱,档案不齐全,生产区、生活区,管理区三位一体。(2)环境卫生极差,生物安全控制基本为零。(3)基础免疫虽然做了,但对非洲猪瘟防控意识不到位。(4)没有基本的消毒设施,保险公司查勘理赔人员任意进出养殖场,病原微生物带进养殖场内在所难免。

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