血清HE4、Anti-CCP及AMH水平与系统性红斑狼疮的相关性*

魏忠华，何思春，李先莉，吴 波

四川省达州市中心医院检验科，四川达州 635000

系统性红斑狼疮(SLE)是一种发病机制尚不明确的自身免疫性疾病，临床多表现为免疫复合物沉淀、自身抗体产生及系统损伤等特征，目前尚无有效的根治手段，患者多预后较差[1-2]。血清人附睾蛋白4(HE4)是乳清酸性4-二硫化中心蛋白家族一员，相关研究指出，HE4是预测SLE患者卵巢癌发病风险的肿瘤标志物之一[3-4]。抗环瓜氨酸肽抗体(Anti-CCP)是一种自身抗体，对类风湿关节炎的诊断具有较高的灵敏度，常用于类风湿关节炎的早期诊断。而SLE与类风湿关节炎均为自身免疫性疾病，且均伴有关节损伤[5-6]。抗缪勒氏管激素(AMH)是转化生长因子-β超家族一员，是在原始卵泡向促卵泡激素依赖的窦状卵泡发育过程中，由颗粒细胞表达[7]。相关研究显示，育龄期女性SLE发病率是绝经期女性的3倍[8]。这些研究提示HE4、Anti-CCP及AMH可能与SLE的发生有一定联系。本研究拟观察SLE患者血清HE4、Anti-CCP及AMH表达情况，旨在分析上述指标与SLE发生的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料 回顾性收集2020年2-5月本院收治的SLE患者67例作为观察组，其中男6例，女61例；年龄20～69岁，平均(37.68±12.25)岁；病程9 d至23年，平均(5.24±1.25)年。纳入标准：(1)SLE患者的诊断均符合《系统性红斑狼疮诊疗指南》[9]中的相关诊断标准；(2)均为初诊确诊SLE后接受治疗患者；(3)患者病历资料的抽取及阅读均获得患者知情同意。排除标准：(1)合并风湿性关节炎、干燥综合征、特发性炎性肌病等其他自身免疫性疾病患者；(2)合并高血压、糖尿病及心血管疾病患者；(3)合并良恶性肿瘤及急性感染患者；(4)合并原发性肾功能及肝功能异常患者；(5)入组前6个月具有分娩史及服用过避孕药物患者；(6)合并多囊卵巢综合征及妊娠者。另选取同期本院健康体检者67例作为对照组，其中男10例，女57例；年龄20～70岁，平均(38.02±12.34)岁。对照者均接受病史询问、影像学检查、实验室相关指标等检查。检查结果显示相关指标均在正常值范围内，明确诊断为健康者。2组的年龄、性别构成比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经本院医学伦理委员会审核批准。

1.2方法

1.2.1血清标本获取 健康体检者于当日，受试者于入院后次日清晨空腹抽静脉血4 mL，以3 000 r/min离心5 min分离血清，取血清保存于-70 ℃冰箱中备用。

1.2.2血清指标检测 采用罗氏公司Roche e601全自动电化学发光免疫分析仪及配套试剂盒，按照试剂盒说明书操作流程检测血清标本，测定血清HE4、Anti-CCP及AMH水平，标本于当日完成测定，所有项目室内质控在控。

1.2.3SLE疾病活动度判断 根据SLE疾病活动度评分[10](SLEDAI)进行评估：(1)精神症状、癫痫发作、视觉障碍、器质性脑病、狼疮性头痛及脉管炎等为8分项；(2)肌炎、关节炎、管型尿、血尿(红细胞计数>5个/高倍视野)、脓尿(白细胞计数>5个/高倍视野)、蛋白尿(>0.5 g/d)为4分项；(3)新出皮疹、脱发、胸膜炎、黏膜溃疡为2分项；(4)发热>38 ℃、白细胞计数<3.0×109/L、血小板计数<100×109/L为1分项。SLE疾病活动度判定标准：SLEDAI<10分为非活动期；≥10分为活动期，中度活动期为10～14分，重度活动期≥15分。

2 结 果

2.12组血清HE4、Anti-CCP及AMH水平比较 观察组血清HE4、Anti-CCP及AMH水平均高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 2组血清HE4、Anti-CCP及AMH水平比较

2.2活动期与非活动期患者基本资料及血清HE4、Anti-CCP及AMH水平比较 根据SLEDAI及SLE疾病活动度判断标准，将67例SLE患者分为活动期37例(55.22%)，非活动期30例(44.78%)。活动期与非活动期患者性别构成、年龄、病程、肾炎及类风湿关节炎比较，差异均无统计学意义(P>0.05)；活动期患者SLEDAI及血清HE4、Anti-CCP、AMH水平均高于非活动期患者，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 基本资料及实验室指标在活动期与非活动期患者间的比较

2.3血清HE4、Anti-CCP及AMH水平与SLE疾病活动度的相关性分析 采用Pearson相关分析血清HE4、Anti-CCP及AMH水平与SLE疾病活动度的相关性，结果显示，SLE患者血清HE4、Anti-CCP、AMH水平与SLE疾病活动度均呈正相关(r=0.319、0.594、0.482，P<0.05)。

2.4血清HE4、Anti-CCP、AMH水平对SLE发生的影响 将血清HE4、Anti-CCP及AMH作为协变量，SLE发生作为因变量(0=未发生SLE，1=发生SLE)，经Logistic回归分析显示，血清HE4、Anti-CCP、AMH水平升高可能是诱发SLE的因素(OR=1.087、1.125、2.982，P<0.05)，见表3。

表3 血清HE4、Anti-CCP及AMH水平对SLE发生影响的回归分析

2.5血清HE4、Anti-CCP、AMH水平对SLE发生的诊断价值 将血清HE4、Anti-CCP及AMH作为检验变量，将SLE发生作为状态变量(0=未发生SLE，1=发生SLE)，评价血清HE4、Anti-CCP、AMH水平诊断SLE的诊断价值，结果显示，当血清HE4、Anti-CCP、AMH诊断SLE的最佳临界值分别为52.65 pmol/L、16.25 U/mL、2.83 ng/mL时，约登指数最大分别为0.763、0.717、0.684，AUC均>0.8，HE4、Anti-CCP、AMH对SLE均有一定的诊断价值，并可获得最佳诊断价值，见表4。

表4 血清HE4、Anti-CCP及AMH水平对SLE的诊断价值

3 讨 论

SLE是一种多因素参与并相互作用而引起的复发自身免疫性疾病，常导致机体多脏器及组织损伤，SLE具体发病机制尚不清楚，目前主要认为与遗传、免疫、性激素等因素密切相关[11]。SLE发病呈女性优势，男女发病率占比约为1∶9，针对这种女性优势的原因尚未明确，推测均可能与性激素水平相关[12]。此外，SLE主要以活动期和非活动期交替及重型和轻型之间转化为特征，故延缓SLE疾病进程，促使SLE长期稳定在疾病缓解状态是目前治疗SLE的主要目标[13]。

HE4是一种由124个氨基酸组成的N-糖基化蛋白质，属于一种跨界蛋白酶抑制剂[14]。研究显示，HE4基因对细胞增殖具有明显抑制作用，可用过ERK通络及蛋白类系统调节细胞增殖、凋亡及迁移等[15]。血清HE4水平可调节免疫细胞的活化及增殖，促进细胞因子的分泌及释放，继而调控机体免疫系统，促使免疫调节通路发生紊乱，诱发SLE[16]。Anti-CCP是环状聚丝蛋白的多肽片段，是将19个氨基酸残基组成瓜氨酸肽链中的2个丝氨酸替换成半胱氨酸人工方法合成而来，可能与含瓜氨酸分子的细胞骨架抗原存在不同抗原决定簇，导致SLE患者机体内Anti-CCP存在一定异质性[17]。AMH是转化生长因子β超家族中的一员，在女性卵泡生长过程中扮演着重要角色。女性出生时外周血中几乎检测不到AMH，但在性成熟后可达到最高水平，直至绝经消失，且AMH在整个月经周期均呈稳定表达，比卵泡刺激素及黄体生成素能更加客观地反映卵巢储备功能[18-19]。AMH主要由卵巢颗粒细胞产生，可通过位于颗粒细胞及膜细胞上的AMHⅡ型受体发挥作用，能间接或直接降低生长卵泡对卵泡刺激素的应答，继而通过抑制卵泡刺激素依赖性的卵泡发育及优势卵泡的选择，间接抑制卵泡成熟[20]。本研究显示，观察组患者血清HE4、Anti-CCP、AMH水平均高于对照组，且活动期患者高于非活动期，差异均有统计学意义(P<0.05)，初步提示HE4、Anti-CCP、AMH可能参与了SLE的发生、发展。

为了分析HE4、Anti-CCP、AMH与SLE的关系，本研究进一步做了直线相关性、线性回归、ROC曲线分析，结果发现，SLE患者血清HE4、Anti-CCP、AMH水平与SLE疾病活动程度均呈正相关(r=0.594、0.482,P<0.05)，血清HE4、Anti-CCP、AMH水平升高可能是诱发SLE的因素，血清HE4、Anti-CCP、AMH对SLE的诊断均有一定价值，可用于SLE的早期风险评估及诊治指导。但本研究作为回顾性分析，纳入研究样本量较少，且尚未对患者用药情况分析，研究结果的准确性及可信度尚需进一步增加研究样本量，进行前瞻性大样本研究加以证实。

综上所述，血清HE4、Anti-CCP、AMH水平升高可能参与了SLE的发生与发展，并与SLE患者的疾病活动度密切相关。临床上可考虑通过检测HE4、Anti-CCP、AMH水平以评估SLE的发生风险及病情发展情况，为SLE的早期防治提供依据。