乙肝五项、PreS1Ag及HBV-DNA联合检测对乙型肝炎的诊断价值

颜晓芳

山东省单县中心医院核医学科，山东单县 274300

目前临床在乙型肝炎诊断上多采用血清标志物（hepatitis B virus marker，HBV-M）进行检验，包括表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）、表面抗体（hepatitis B surface antibody，HBsAb）、E抗原（hepatitis B e antigen，HBeAg）、E抗体（hepatitis B e antibody，HBeAb）、核 心 抗 体（hepatitis B core antibody，HBcAb）五种模式，组合模式多，且检验结果容易受到药物、病毒变异、检测方法等的影响，难以充分反映乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）的传染性，漏诊率、误诊率高[1-2]。随荧光定量（polymerase chain reaction，PCR）技术的发展，乙型肝炎病毒基因（hepatitis B virus-Deoxyribonucleic acid，HBV-DNA）定量检测在临床中已经得到了广泛应用，可通过对患者HBV复制状态的检测进行诊断，并已经成为了判断HBV感染、复制的金标准[3-4]。但PCR技术对仪器要求高，基层医院难以推广。前S1抗原（pres1 antigen，PreS1Ag）是检测HBV感染与复制的重要血清学指标，近年来其应用价值越发受到了临床重视[5-6]。故本研究以我院2019年1月至2020年6月收治明确诊断的乙型肝炎患者100例为研究对象，探讨乙肝五项、PreS1Ag及HBV-DNA联合检测的诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择我院2019年1月至2020年6月收治明确诊断的乙型肝炎患者100例。纳入标准：①满足乙型肝炎诊断标准；②对研究知情同意。排除标准：①恶性肿瘤者；②肝肾功能异常者；③合并自身免疫疾病者；④严重感染疾病者；⑤血液系统疾病者。本组100例患者中男56例，女44例，年龄21～73岁，平均（36.51±5.17）岁，经乙肝五项检验HBsAg阳性71例。本研究已经医院医学伦理委员会批准。

1.2 方法

所有患者入院后均完善临床资料，采集空腹肘正中静脉血2 ml， 3000转/min离心5 min后，采集血清保存在-18℃环境中待检。采用放射免疫分析法进行乙肝五项，使用试剂盒由北京北方生物技术研究所有限公司提供，所有操作严格按照说明书进行，以放免仪（西安核仪器厂，XH-6080十探头全自动γ放射免疫计数器，陕食药监械生产许20112081号）测定其水平；采用酶联免疫吸附法（ELISA）进行PreS1Ag的检测，使用试剂盒为上海阿尔法生物技术有限公司提供，所有操作严格按照说明书进行，以酶免仪（澳斯邦生物工程有限公司，E-STAR8CNH全自动酶免分析仪）测定其水 平。以PCR仪（Agilent Technologies Stratagene Mx3000P）检测HBV-DNA水平，评价感染情况，如检验值水平低于5×102Copies/ml，判定为阴性。

1.3 观察指标

①比较不同HBV-M模式下PreS1Ag、HBVDNA检测阳性率，为便于结果评价，HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb五项血清标志物分别以A、B、C、D、E表示。②分析HBsAg阳性下PreS1Ag阳性组与阴性组HBV-DNA水平分布情况，在HBV-M模式下按照PreS1Ag阳性与阴性分 组，分 析＜5×102、102～104、105～107、＞108四个级别下HBV-DNA水平分布情况。③比较HBsAg阳性下HBeAg阳性组与阴性组PreS1Ag阳性率。④比较HBsAg阳性下HBV-DNA阳性组与阴性组PreS1Ag阳性率。

1.4 统计学方法

采用SPSS 21.0统计学软件处理数据，计数资料以[n（%）]表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同HBV-M模式下PreS1Ag、HBV-DNA检测阳性率比较

不同HBV-M模式下PreS1Ag阳性率、HBVDNA阳性率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 不同HBV-M模式下PreS1Ag、HBV-DNA检测阳性率比较

2.2 HBsAg阳性下PreS1Ag阳性组与阴性组HBV-DNA水平分布情况

HBsAg阳性模式下PreS1Ag阳性与PreS1Ag阴性组比较，HBV-DNA水平分布情况差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

2.3 HBsAg阳性下HBeAg阳性组与阴性组PreS1Ag阳性率比较

HBsAg阳性样本中HBeAg阳性组PreS1Ag阳性率高于HBeAg阴性组阳性率，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

2.4 HBsAg阳性下HBV-DNA阳性组与阴性组PreS1Ag阳性率比较

HBsAg阳性样本中HBV-DNA阳性组PreS1Ag阳性率高于HBV-DNA阴性组阳性率，差异有统计学意义（P＜0.05），见表4。

表2 HBsAg阳性下PreS1Ag阳性组与阴性组HBV-DNA水平分布情况

表3 HBsAg阳性下HBeAg阳性组与阴性组PreS1Ag阳性率比较[n（%）]

表4 HBsAg阳性下HBV-DNA阳性组与阴性组PreS1Ag阳性率比较[n（%）]

3 讨论

HBV感染已经成为全球性公共卫生问题，据WHO统计世界范围内乙型肝炎携带者已达3.5亿[7]。我国是乙型肝炎流行高发区，乙型肝炎患者以及病毒携带者多，及时诊断、预防、治疗对乙型肝炎控制有显著价值[8]。HBV为双链环装DNA病毒，前S1蛋白存在于Dane颗粒、管形颗粒中，主要对病毒的装配、复制以及感染等过程产生作用[9-10]。前S1蛋白的21～27位肽段能够介导病毒黏附肝脏细胞，和细胞膜受体进行结合，也可结合IL-6识别位点[10-11]。且该蛋白有肝细胞膜受体，具有较高免疫原性，在病毒入侵肝脏细胞中也发挥了重要作用[12-13]。

本研究中，对乙型肝炎患者进行乙肝五项、PreS1Ag及HBV-DNA检测发现，HBsAg阳性血清标本中HBV-DNA与PreS1Ag的阳性率均较高，而阴性标本中阳性检出率偏低，故可认为该抗原检出主要在HBsAg阳性模式中，考虑与前S1蛋白基因编码与HBsAg基因均处在HBV开放阅读框S区相关[13-14]。而在A-组中，仍然存在部分HBV-DNA检出，提示HBsAg阴性并不代表病毒转录、复制停止，仅代表着病毒复制能力的降低。HBeAg是判定HBV复制活跃性以及传染能力的重要指标，如出现HBeAb则说明病毒复制能力与传染性降低，本研究中HBsAg阳性标本中HBeAg阳性组PreS1Ag阳性率为74.65%，高于阴性组阳性率的17.24%，差异有统计学意义（P＜0.05），提示HBeAg阳性组PreS1Ag阳性率更高，而两者同时阳性时，病毒处在高度活跃状态，能够反映出病毒的复制情况以及传染能力。王碧玉等[15]研究中，HBeAg阳性组PreS1Ag阳性率为81.8%，高于阴性组的50.8%，差异有统计学意义（P＜0.05），与本研究一致，也佐证了本研究。另本研究中，HBsAg阳性样本中HBV-DNA阳性组PreS1Ag阳性率为94.64%，高于阴性组阳性率的58.82%，差异有统计学意义（P＜0.05），由此可认为HBV-DNA阳性组PreS1Ag阳性率更高。冯变莹等[16]研究中，HBV-DNA阳性组（60～69岁）PreS1Ag阳性率为93.3%，高于阴性组的76.7%，差异有统计学意义（P＜0.05），也说明HBV-DNA水平与PreS1Ag水平存在一定关联。此外，本研究中HBsAg阴性患者中也存在PreS1Ag阳性与HBV-DNA阳性检出情况，考虑为HBsAg前C区启动区变异，导致变异病毒和原生病毒同时存在相关。

综上所述，乙肝五项能够反映感染HBV后的免疫状态，但不能反映HBV复制情况，通过HBVDNA定量测量，可了解病毒感染、复制情况，而PreS1Ag不光可反映HBV复制情况，也能够弥补由于病毒变异而导致的HBeAg无法检出的问题，由此乙肝五项、PreS1Ag及HBV-DNA联合检测可有效检出患者并全面了解患者病情，可为临床诊断与治疗提供可靠的依据，可在后续推广应用。考虑基层医院PCR检测普及难度大，故考虑推广联合PreS1Ag进行检测，以提高基层医院检测的准确性。