两种敌敌畏乳油对家蚕的毒性和残毒期比较＊

陈伟国，戎凤鸣，赵明珠，杨一平，戴建忠，钱秋杰

（1.海宁市经济作物技术服务站，浙江 海宁 314400； 2.浙江雅云生态农业有限公司，浙江 海宁 314407）

敌敌畏（Dichlorvos）是一种高效、广谱有机磷杀虫剂，具有熏蒸、触杀、胃毒作用，对害虫的击倒力强，速效性好。施药后易分解，残毒期短，特别适合对农残要求严格的作物害虫的防治。高纯度敌敌畏更被广泛用于桑叶害虫的防治［1］。在NY/T 1027-2006《桑园用药技术规程》中，77.5%敌敌畏乳油用于防治鳞翅目、鞘翅目、半翅目、双翅目、缨翅目、同翅目等多种桑树害虫，推荐浓度为1000倍稀释液［2］。

敌敌畏常规剂型是以苯类为溶剂的乳油，为降低成本、减轻溶剂对环境的污染，近年来研发高含量、新剂型敌敌畏产品逐渐受到重视［1，3］，宾荣佩等［4］报道了90%敌敌畏可溶液剂应用于桑树害虫的防治效果。目前，江苏省南通江山农药化工股份有限公司的90%敌敌畏乳油已取得农药登记［5］，为掌握敌敌畏高含量新产品在桑树上使用的安全性，测定比较了90%敌敌畏乳油和77.5%敌敌畏乳油对家蚕的急性食下毒性及其在桑叶上的残毒期，现将结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试农药

供试农药90%敌敌畏乳油（农药登记证号PD20150856）、对照农药77.5%敌敌畏乳油（农药登记证号PD85105-2），均由江苏省南通江山农药化工股份有限公司生产。

1.1.2 供试家蚕

供试家蚕品种为“白玉×秋丰”，由浙江省海宁市新兴蚕种制造有限公司生产。饲养至3龄起蚕备用。

1.1.3 供试桑园及桑树品种

浙江雅云生态农业有限公司桑园，强桑1号，2年生，中干偏低树型养成，每667 m2桑园栽植750株。

1.2 试验方法

1.2.1 两种敌敌畏乳油对家蚕急性食下毒性试验

经预备试验，将77.5%敌敌畏乳油和90%敌敌畏乳油按质量浓度分别稀释成5个浓度梯度，供试桑叶浸入不同浓度的稀释液中1 min，取出后自然晾干，放置于保鲜盒内，每个浓度处理小区给入20头3龄起蚕，以清水处理为空白对照，重复3次，在温度（26.5±1.0）℃、相对湿度75%～85%的恒温室内饲养，24 h后更换成新鲜无毒桑叶继续饲养，直至4龄起蚕，每天调查幼虫中毒死亡率。采用DPS统计软件对药液质量浓度对数与幼虫死亡率概率值进行线性回归分析［6］，求出致死中浓度（LC50）和95%置信限。

1.2.2 两种敌敌畏乳油在桑叶上的残毒期试验

将90%敌敌畏乳油稀释成500倍、1000倍和1500倍液（敌敌畏质量浓度分别为1800 mg/L、900 mg/L、600 mg/L），77.5%敌敌畏乳油稀释成1000倍液（敌敌畏质量浓度为775 mg/L）。将各浓度药液均匀喷洒于供试桑树，桑叶正反叶面喷湿为度，处理间设保护行隔离。喷药后每天采摘不同浓度药液喷洒的桑叶，以新鲜无毒桑叶为对照，每处理小区30头3龄起蚕，重复3次，饲养至4龄起蚕结束，逐日调查记载各处理区中毒死亡蚕头数，计算中毒死亡率。

1.2.3 避光冷藏对两种敌敌畏乳油处理桑叶的残毒期影响

将1.2.2喷药处理的桑叶在药液晾干后连同枝条剪下，用塑料袋封装后置于5℃的冷库中冷藏，间隔不同时间采摘桑叶喂蚕，饲养方法同1.2.2。

2 结果与分析

2.1 两种敌敌畏乳油对家蚕3龄起蚕的急性食下毒性

采用浸叶法测定2种浓度敌敌畏乳油对3龄起蚕的急性食下毒性，添毒24 h的致死中浓度（LC50）分别为90%敌敌畏乳油17.6212 mg/L和77.5%敌敌畏乳油16.1004 mg/L（表1），两者对家蚕的急性食下毒性差异很小。参照2014年发布的GB/T 31270.11-2014《化学农药环境安全评价试验准则第11部分：家蚕急性毒性试验》附录A“农药对家蚕的毒性等级划分”［7］，90%敌敌畏乳油和77.5%敌敌畏乳油对家的毒性等级均为高毒（0.5＜LC50≤20 mg/L）。

表1 90%敌敌畏乳油和77.5%敌敌畏乳油对3龄起蚕的急性食下毒性Table 1 Acute Ingestion Toxicity of 90%Dichlorvos EC and 77.5%Dichlorvos EC to Newly Exuviated Silkworms of 3rd Instar

2.2 两种敌敌畏乳油在桑叶上的残毒期

由表2可见，90%敌敌畏乳油和77.5%敌敌畏乳油稀释液喷于桑叶后2 h采叶饲喂3龄起蚕，中毒死亡率均达到100%；喷药后1 d采叶喂蚕，90%敌敌畏乳油500倍液的死亡率为41.11%，90%敌敌畏乳油1000倍和1500倍液均无中毒和死亡，对照农药77.5%敌敌畏乳油1000倍液的死亡率为40.00%；喷药后2 d采叶喂蚕，90%敌敌畏乳油500倍液的死亡率下降到5.56%，90%敌敌畏乳油1000倍和1500倍液均无中毒和死亡，对照农药77.5%敌敌畏乳油1000倍液的死亡率为10.00%；喷药后3 d～5 d，90%敌敌畏乳油和77.5%敌敌畏乳油各浓度药液处理的桑叶饲喂3龄起蚕均无中毒和死亡。试验结果表明：90%敌敌畏乳油500倍与77.5%敌敌畏乳油1000倍的残毒期相似，90%敌敌畏乳油1000倍和1500倍的残毒期短于77.5%敌敌畏乳油1000倍。

表2 90%敌敌畏乳油和77.50%敌敌畏乳油在桑叶上的残毒期测定结果Table 2 Residual Toxicity of 90%Dichlorvos EC and 77.50%Dichlorvos EC on Mulberry Leaves

2.3 两种敌敌畏乳油处理桑叶在避光冷藏条件下的残毒期

由表3可见，90%敌敌畏乳油500倍、1000倍、1500倍和77.5%敌敌畏乳油1000倍液处理的桑叶在5℃环境中避光冷藏，间隔1 d、2 d、3 d后饲喂3龄起蚕，死亡率均为100%；间隔4 d后，90%敌敌畏乳油1500倍液的死亡率下降到87.78%，其余处理的死亡率均为100%；间隔5 d后，90%敌敌畏乳油500倍液的死亡率100%，90%敌敌畏乳油1000倍、1500倍和77.5%敌敌畏乳油1000倍液的死亡率分别下降到75.56%、18.89%和35.56%；间隔8 d后，90%敌敌畏乳油500倍液的死亡率仍达100%，90%敌敌畏乳油1000倍、1500倍和77.5%敌敌畏乳油1000倍液的死亡率则下降到5.56%、3.33%和1.11%。

表3 两种敌敌畏乳油处理桑叶在避光冷藏下的残毒期测定结果Table 3 Residual Toxicity Period of Mulberry Leaves Preserved Low Temperature and Dark Condition after Treated with the Two Kinds of Dichlorvos EC

对比表2和表3可见，90%敌敌畏乳油和77.5%敌敌畏乳油稀释液处理的桑叶，在田间生长条件下的毒性降解很快，但在避光冷藏条件下的毒性降解很慢。

3 小结与讨论

试验结果表明，90%敌敌畏乳油对家蚕3龄起蚕的急性食下毒性（LC50）为17.6212 mg/L，略低于77.5%敌敌畏乳油的16.1004 mg/L，但差异很小，均属于高毒级；两种敌敌畏乳油在桑叶上的毒性残留都很短，90%敌敌畏乳油1000倍和1500倍稀释液喷药后1 d的桑叶、90%敌敌畏乳油500倍和77.5%敌敌畏乳油1000倍稀释液喷药后3 d的桑叶，饲喂3龄起蚕无中毒症状和死亡蚕；但两种敌敌畏乳油稀释液处理桑叶在避光冷藏条件下，残毒期比田间环境中的农药处理桑叶大大延长，说明光照和温度会显著影响敌敌畏的降解。

几十年来，敌敌畏是最常用农药之一［8］，目前登记在桑树上使用的有50个敌敌畏乳油制剂产品，其中77.5%（80%）的有39个，48.0%（50%）的有11个［5］。需要说明的是至今敌敌畏乳油含量规格标注值尚未完全统一，是因为敌敌畏乳油的生产工艺和有效成分含量检测技术发生变化所致。敌敌畏乳油最初采用敌百虫碱解法的生产工艺，在原中华人民共和国化学工业部标准HG 2-297-65《敌敌畏乳油》中，敌敌畏有效成分含量应用碱解分析法检测；1981年制订的中华人民共和国国家标准GB 2548-81《敌敌畏乳油》取代了原化工部标准HG 2-297-65，应用敌百虫碱解法生产的敌敌畏乳油仅1种80%的规格，在技术指标要求中使用碱解法测定敌敌畏含量应≥80.0%，以气相色谱法为仲裁法，测得的敌敌畏含量应≥77.5%；上世纪九十年代逐渐开始应用产品质量更高、生产成本更低的亚磷酸三甲酯法工艺路线直接合成敌敌畏，碱解分析法已不适用于敌敌畏含量检测，且随着气相色谱测定方法的普及，在第一次修订的国家标准GB 2548-1993《敌敌畏乳油》中规定，敌百虫碱解法和亚磷酸三甲酯法两种工艺路线生产的敌敌畏含量测定采用气相色谱法，尽管取消了碱解分析法，但仍然沿用了两种检测法的数据，在技术指标要求中80%敌敌畏乳油的敌敌畏含量≥77.5%，另外还新增了50%敌敌畏乳油的规格（敌敌畏含量≥48.0%），这种规格和含量不一致现象困扰了推广使用；因此，在第二次修订的国家标准GB 2548-2008《敌敌畏乳油》中将规格由80%和50%分别改为77.5%和48.0%，从而使规格和含量实现了统一［9～11］。

90%敌敌畏乳油相比于77.5%敌敌畏乳油，有效成分含量增加，相应减少了辅剂用量，感观上农药的刺鼻臭味也有所减轻，符合农药产品更加环保的发展趋势。

虽然本试验结果和宾荣佩等［4］报道的2种90%敌敌畏制剂在桑叶上的残毒期均很短，但目前取得正式登记证号的3个90%敌敌畏制剂（1个乳油、2个可溶液剂），仅登记在水稻、十字花科蔬菜和观赏菊花等作物上使用。因此，在桑园害虫防治时应谨慎推荐未登记在桑树上使用的产品，如生产上无其他替代药剂或需要紧急防治的，应当与生产厂家签订质量保证协议并向农业主管部门报备，以规避技术推广部门和使用者的风险。