新型茶树油提升沃柑果实低温贮藏效果

温中军，宋宏林，钟 愧，徐新慧，杨 俊，，5，6

（1.兴业县葵阳镇农业服务中心，广西 玉林537800；2.新乡医学院 药学院，河南 新乡453003；3.新乡市高新医药研究院，河南新乡453003；4.河南班廷生物科技有限公司，河南 焦作454003；5.山西中条山生物工程研究院，山西太原030012；6.山西现代农产品加工技术研发中心，山西太原030012）

沃柑（Orah Mandarin）源自以色列的研发，是“坦普尔”橘橙与“丹西”红橘的杂交品种。沃柑喜温，在有效积温较高的地方，沃柑可溶性固体物含量高达22%～26%；而在有效积温较低的地方，沃柑可溶性固体物含量只有14%～16%，且果实偏小，果肉的酸度增加。因此，在我国地域偏南的广西栽培的沃柑果实果径大、外观好、口感佳，明显优于云南、湖南、四川和重庆等地栽培的沃柑[1]。广西壮族自治区水果生产技术指导总站统计数据显示，2017年广西柑橘栽培面积为44.13万hm2，总产量为687万t，产值达213.47亿元，其中沃柑产业发展最快。

沃柑采摘期是1月—5月，近年来种植面积增大，春季天气不稳定，沃柑早春销售压力较大；3月气温回升，树体进入春梢抽生期和开花期，营养消耗，果实返青，糖度下降，也影响销售[2-3]。实行错峰销售，是解决沃柑产业发展的关键，这对沃柑的贮藏保鲜提出了更高要求。目前，柑橘多使用化学保鲜杀菌方法降低贮藏腐烂率，包括保鲜剂2,4-二氯苯氧乙酸、杀菌剂咪鲜胺、甲基托布津、抑霉唑、百菌清和敌克松。但是，化学保鲜杀菌方法均有安全隐患[4-6]。为了解决上述安全隐患，一些植物保鲜杀菌方法被开发出来，如大蒜保存法和松枝纸箱保存法。但是，这些方法的运行成本较高，不利于沃柑的规模化贮藏[7]。

互叶白千层（Melaleuca alternifolia）是桃金娘科白千层属灌木，原产于澳大利亚[8]，其新鲜枝叶用水蒸馏提取，得到互叶白千层精油，又称茶树油（Tea tree oil）。茶树油能有效地抑制致病菌和霉菌的功效，具有抑菌、抗炎、驱虫、杀螨的功能，且渗透性强、安全性高、无污染、无腐蚀性[9]。

茶树油主要成分1,8-桉叶素和松油醇-4，依据国际标准化组织标准（ISO 4730—1996）、澳大利亚标准（2782—1985）、美国标准（EOA）和中国标准（GB/T 26514—2011）的规定，茶树油中松油醇-4含量高于30%，而1,8-桉叶素含量低于8%。试验前期研究表明，茶树油中1,8-桉叶素产生药草香，不仅有解热、消炎、抗菌、防腐作用，而且有强促渗作用，增加其他成分进入果皮内层。可以说，茶树油中1,8-桉叶素具备了沃柑保鲜杀菌的条件。

团队采用基因组定点编辑强互叶白千层合成1,8-桉叶素，培育出新型互叶白千层，获得了新型茶树油（New tea tree oil），其粗品中1,8-桉叶素含量超过75%，松油醇-4含量低于8%[10]。基于新型茶树油的特性，采用其配制保鲜杀菌剂，研究新型茶树油对低温贮藏的沃柑的保鲜时间和果实品质的影响。

1 材料与方法

1.1 试验材料

在广西兴业县沃柑果园选取外观成熟、富有弹性、品相相近、无腐烂、无病虫害的沃柑500 kg，沃柑平均质量132.4±8.7 g。沃柑被随机分成5组（空白对照组，0.1%新型茶树油组，0.5%新型茶树油组，苏打水处理组，大蒜水处理组），每组质量100 kg。

将每个沃柑进行标记、称质量，并观察外观，剔除不符合标准的沃柑。

1.2 新型茶树油保鲜杀菌剂制备

用去离子水配制无任何添加剂（空白对照组），0.1%新型茶树油（0.1%新型茶树油组）、0.5%新型茶树油（0.5%新型茶树油组）的保鲜杀菌剂；另外，配制对照组，即将食用小苏打和去离子水按1∶100的比例溶解，配制保鲜杀菌剂（苏打水处理组）；将新鲜大蒜去皮捣碎，加入去离子水，熬成大蒜汁，冷却，配制保鲜杀菌剂（大蒜水处理组）。

1.3 沃柑预处理和低温贮藏

沃柑放入保鲜杀菌剂中浸泡清洗10 min，然后取出自然风干，置冷库中贮藏。冷库温度保持2～6℃，湿度保持85%～90%。

1.4 试验方法

1.4.1 沃柑测定时间

沃柑冷库贮藏1，2，4，6，8，10，12个月后取出，并进行外观分析和内在品质测定。每组每次样品取出10 kg。

1.4.2 外观指标

沃柑外观指标包含果实气味、腐烂率、失重率、冷害。鼻嗅法分析果实气味，即以新型茶树油气味为10分，去离子水气味为0分作为评判标准，让健康受试者嗅沃柑气味，给出相应气味分数；采用电子天平测量单果质量，计算失重率；肉眼观察腐烂和冷害（褐斑病和水肿病），计算腐烂率和冷害率。

1.4.3 内在品质

沃柑内在品质含果实口感、可溶性固形物、可滴定酸含量、固酸比、总糖和维C含量。品尝法判定果实口感，即以蔗糖甜度为10分，去离子水甜度为0分作为评判标准，让健康受试者品尝沃柑，给出相应口感分数；用手持折光仪测定果实可溶性固形物含量，酸碱滴定法测定果汁可滴定酸含量，计算固酸比；斐林试剂标定法测定总糖含量，用2,6-二氯靛酚法测定果实维C含量。

1.4.4 健康自愿者征集

试验征集了30名健康自愿者，其中男性17人，女性13人，年龄25～55岁，平均年龄35.6±9.3岁，去嗅沃柑气味和品尝沃柑口感。

1.5 统计分析

除部分外观指标（如腐烂、冷害）不能重复测定外，每个样品重复测定3次，以均值±标准偏差表示，利用SPSS 19.0软件进行方差分析。

2 结果与分析

2.1 沃柑低温贮藏后外观指标的变化

2.1.1 沃柑气味

与空白对照组沃柑相比，低温贮藏12个月，新型茶树油处理的沃柑气味显著增强（p＜0.05或0.01）。其中，沃柑气味最好时期为低温贮藏后第2个月（p＜0.01）；但是，低温贮藏12个月，苏打水或大蒜水处理的沃柑气味无显著改变。

沃柑冷库贮藏后果实气味的变化见表1。

2.1.2 腐烂率

空白对照组沃柑，低温贮藏后第4个月出现腐烂现象；新型茶树油处理的沃柑，低温贮藏后第6个月（0.1%新型茶树油处理组）或第8个月（0.5%新型茶树油处理组）才出现腐败现象，其腐败率远低于空白对照组、苏打水处理组和大蒜水处理组（p＜0.05或0.01）。

沃柑冷库贮藏后腐烂率见表2。

表1 沃柑冷库贮藏后果实气味的变化/分

表2 沃柑冷库贮藏后腐烂率 /%

2.1.3 冷害率

空白对照组沃柑，低温贮藏后第4个月出现褐斑病、水肿病等冷害现象；新型茶树油处理的沃柑，低温贮藏后第6个月（0.1%新型茶树油处理组）或第8个月（0.5%新型茶树油处理组）才出现冷害现象，其冷害率远低于空白对照组、苏打水处理组和大蒜水处理组（p＜0.05或0.01）。

沃柑冷库贮藏后冷害率见表3。

表3 沃柑冷库贮藏后冷害率/%

2.1.4 失重率

低温贮藏12个月，沃柑的失重率逐渐增高，但是各组间（空白对照组、0.1%新型茶树油处理组、0.5%新型茶树油处理组、苏打水处理组和大蒜水处理组）的失重率无明显差异（p＞0.05）。

2.2 沃柑低温贮藏后内在品质的变化

2.2.1 沃柑口感

与空白对照组相比，低温贮藏12个月，新型茶树油处理的沃柑口感显著提升（p＜0.05或0.01）。其中，沃柑口感最好时期为低温贮藏后第4个月（p＜0.01）。同样，与空白对照组相比，低温贮藏12个月，苏打水或大蒜水处理的沃柑口感也显著提升，但是口感增强幅度远不如新型茶树油处理组（p＜0.05或0.01）。

沃柑冷库贮藏后口感的变化见表4。

表4 沃柑冷库贮藏后口感的变化/分

2.2.2 总糖含量

低温贮藏12个月，各组的沃柑总糖含量均升高。沃柑总糖含量升高幅度由强到弱的排序是0.5%新型茶树油处理组、0.1%新型茶树油处理组、大蒜水处理组、苏打水处理组、空白对照组，各组间沃柑总糖含量变化相差显著（p＜0.05或0.01）。

沃柑冷库贮藏后总糖含量变化见表5。

2.2.3 维C含量

低温贮藏12个月，各组的沃柑维C含量均升高。沃柑维C含量升高幅度由强到弱的排序是0.5%新型茶树油处理组、0.1%新型茶树油处理组、大蒜水处理组或苏打水处理组、空白对照组，各组间沃柑维C含量变化相差显著（p均＜0.05或0.01）。

表5 沃柑冷库贮藏后总糖含量变化 /g

沃柑冷库贮藏后维C含量变化见表6。

表6 沃柑冷库贮藏后维C含量变化/g

2.2.4 可溶性固形物、可滴定酸含量和固酸比

低温贮藏12个月，各组间（空白对照组、0.1%新型茶树油处理组、0.5%新型茶树油处理组、苏打水处理组和大蒜水处理组）的可溶性固形物、可滴定酸含量和固酸比无明显差别（p＞0.05）。

3 讨论

互叶白千层（Melaleuca alternefolia）是澳大利亚土著人抗炎镇痛、促进伤口愈合的植物药[5]，其新鲜枝叶经水蒸馏后得到茶树油（Tea tree oil），香味独特，具有杀菌抑菌、抗炎镇痛、抗敏止痒、促进伤口愈合的效果，且安全无毒。团队发明“基因组定点编辑植物天然产物合成”技术，培育出新型互叶白千层，其新鲜枝叶经水蒸馏后得到新型茶树油（1,8-桉叶素含量＞75%）。研究发现，茶树油中1,8-桉叶素不仅有解热、消炎、抗菌、防腐作用，而且有强促渗作用，增加其他成分进入果皮内层[8]。采用新型茶树油配制喷洒剂，不仅预防沃柑病虫害，还提升沃柑果实的外观指标（气味、单果质量和果皮厚度）和内在品质（口感、可溶性固形物、可滴定酸、总糖和维C含量和固酸比）[9]。新型茶树油是一种无污染、安全、可配制喷洒剂，不仅防治病虫害，还能提升沃柑果实品质。然而，新型茶树油是否对采摘后沃柑果实贮藏影响，尚未见报道。

试验研究沃柑外观指标显示，新型茶树油不仅提升低温贮藏的沃柑气味，还降低低温贮藏沃柑的腐烂率和冷害率，说明新型茶树油可延长沃柑的低温贮藏期。另外，试验研究沃柑内在品质也显示，新型茶树油不仅提升低温贮藏沃柑口感，还提高低温贮藏沃柑的总糖含量和维C含量，说明新型茶树油可提高低温贮藏沃柑的内在品质。

试验研究结果表明，新型茶树油对低温贮藏沃柑的失重率（外观指标）、可溶性固形物、可滴定酸含量和固酸比（内在品质）影响与苏打水处理组、大蒜水处理组和空白对照组无显著差别，说明新型茶树油对低温贮藏沃柑的常规变化（如失重、可溶性固形物和酸性物质）无影响，这可能与新型茶树油的水溶特性，且配比容量（0.1%和0.5%）过低有关。

新型茶树油（1,8-桉叶素含量＞75%）是如何保护沃柑低温贮藏质量，延长沃柑贮藏期，提升沃柑果实品质的，尚需进一步研究。预测可能是通过1,8-桉叶素果皮渗透性，调节沃柑果实生理过程来完成。

4 结论

新型茶树油不仅能提升低温贮藏的沃柑气味，降低低温贮藏沃柑的腐烂率和冷害率、延长沃柑的低温贮藏期，还能提升低温贮藏沃柑口感，提高总糖含量和维C含量，提升了低温贮藏沃柑的内在品质。新型茶树油是一种无污染、安全、可配制的保鲜杀菌剂的原料。