锁阳对少弱精大鼠模型精液质量及性激素水平的影响

顾娟，厉振北，祁玉娟，曹义娟

（江苏省徐州市中心医院生殖医学中心，江苏 徐州221000）

男性不育症的发病率在世界范围内均呈上升趋势，遗传、内分泌紊乱、感染、免疫功能障碍、环境因素可能是导致该疾病的病因[1-2]。其中，精子数量减少、活力减弱的少弱精症患者比例最高，占男性不孕症患者的46%左右[3]。有研究指出[4]，在西方国家，每年精力密度下降幅度为2.6%，每年精子活力下降速度为0.3%，而在我国，每年精子质量的下降幅度为1%[5]。家庭对生育的的需求以及逐渐上升的发病趋势，使得少弱精症的治疗成为临床研究的热点与难点。中医上，肾主藏精，肾气的强弱决定生精功能的强弱，其中阳虚型主要表现为少弱精症，是临床最常见的类型，也是目前重点研究的方向。锁阳具有补肾、益精、润燥功效，主治阳痿滑精、腰膝痿软、肠燥便秘。现代医学也从锁阳提取物中发现了大量发挥药理作用的化学成分，包括萜类、有机酸类、黄酮类等[6]，也有相关研究分析其对生殖系统的作用[6-7]。本研究分析锁阳水提取物对生殖系统的影响，旨在进一步阐释其作用机制，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料SPF级SD健康雄性大鼠60只，6～8周龄；平均体质量约（250±10）g，由徐州医科大学实验动物中心提供[动物许可证号SYXK（苏）2010-0011]。

1.2 方法

1.2.1 锁阳水提取物的制备锁阳原药材中加入10倍量的0.9%NaCl溶液，先浸泡1 h，再煎煮30 min，用滤布过滤，收集滤液；残渣加入5倍量的0.9%NaCl溶液，浸泡30 min煎煮20 min，过滤得到滤液；残渣再加入5倍量的0.9% NaCl溶液，浸泡30 min煎煮10 min，过滤得到滤液。合并3次滤液并再次过滤，浓缩滤液至1 mL溶液（相当于0.5 g生药），冷藏备用。

1.2.2 动物分组及处理60只SD大鼠按照随机数字法分为空白组、模型组和锁阳实验组，每组20只。空白组大鼠正常饲养；模型组和锁阳实验组大鼠予以环磷酰胺腹腔注射，剂量为30 mg/（kg·d），持续1周，继续饲养1周后，两组各选取1只大鼠处死，观察睾丸组织，验证造模成功。锁阳实验组大鼠再予以锁阳水提取物灌胃，剂量0.5g/（kg·d），每天1次，空白组与模型组予以等量的0.9%NaCl溶液灌胃，疗程均为4周。

1.3 观察指标①比较3组大鼠精子质量：干预结束后，使用精子质量分析系统检测附睾尾部精子密度、精子活率、精子活力以及直线运动速度。②比较3组血清性激素水平：用EP管取大鼠静脉血0.8 mL，室温放置，凝固后分装，按照试剂盒检测方法检测大鼠血清睾酮（T）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）水平。

1.4 统计学方法采用SPSS 22.0统计软件进行数据分析，计量资料以“±s”表示，比较采用t/F检验，计数资料用[n（%）]表示，比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组大鼠精液质量情况比较3组大鼠精子密度、精子活率、精子活力以及直线运动速度比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。空白组大鼠精子密度、精子活率、精子活力以及直线运动速度均高于模型组与锁阳实验组，差异有统计学意义（P＜0.05）；锁阳实验组大鼠精子密度、精子活率、精子活力以及直线运动速度高于模型组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 3组大鼠精液质量情况比较（±s）Table 1 Comparison of semen quality of rats among three groups(±s)

表1 3组大鼠精液质量情况比较（±s）Table 1 Comparison of semen quality of rats among three groups(±s)

注：与空白组比较，aP＜0.05；与模型组比较，bP＜0.05

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2.2 3组大鼠性激素水平情况比较3组大鼠血清T、FSH、LH水平比较差异有统计学意义（P＜0.05）。模型组血清T水平低于空白组与锁阳实验组，血清FSH、LH水平高于空白组与锁阳实验组，差异有统计学意义（P＜0.05）；锁阳实验组血清T水平低于空白组，血清FSH、LH水平高于空白组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 3组大鼠性激素水平情况比较（±s）Table 2 Comparison of sex hormone levels among three groups(±s)

表2 3组大鼠性激素水平情况比较（±s）Table 2 Comparison of sex hormone levels among three groups(±s)

注：与空白组比较，aP＜0.05；与模型组比较，bP＜0.05

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3 讨论

目前，少弱精症所致不育症的发病率呈上升趋势，临床上多采用辅助生殖技术以解决生育问题，而针对其病症的治疗尚缺乏明确的药物及手段[8-9]。在传统医学与现代医学不断融合的发展趋势下，越来越多的中药被研究应用于临床各类疾病。锁阳自古以来是补肾助阳的良药，肾气的虚衰与生殖能力密切相关。现代分子生物学的发展进一步揭示了锁阳的生物活性成分、药理作用等[10]，也有众多基础及临床研究报道其各类生物学作用，包括对生殖系统的影响[11]。研究发现[12-15]，锁阳对大鼠模型具有促进成骨分化、保护神经细胞、降血糖等作用。曹义娟[16]研究发现，锁阳水提取物有助于少弱精症大鼠模型精子数目、精子活率的恢复，可能通过降低脂质过氧化产物及活性氧水平改善精子活力，其对卵泡刺激素分泌有促进作用，进而促进相关基因的表达及精原干细胞的增殖。

本研究结果表明，相较于模型组，锁阳水提取物组在精子密度、精子活率、精子活力以及直线运动速度上均有明显提高，但仍低于空白组，说明锁阳水提取物对提高少弱精症大鼠的精子质量有显著作用，但不能使其完全恢复到正常水平。进一步分析大鼠激素水平发现，锁阳水提取物组睾酮水平较模型组显著提高，FSH、LH分泌水平降低，接近空白组。睾酮水平的提高与精子质量的提高相关，FSH、LH水平的降低说明少弱精症大鼠的性激素负反馈调控系统运作趋于正常，病理性的促性腺激素大量分泌问题得到改善[16]。锁阳水提取物干预后的模型大鼠较正常大鼠仍存在差异，针对此不足，可从提高药物浓度、联合用药等方面进一步改进研究。

综上所述，锁阳水提取物可以显著提高少弱精症大鼠模型的精子密度、精子活率、精子活力以及直线运动速度，并促进大鼠睾酮的分泌，抑制FSH和LH的异常分泌而调节性腺激素水平。