野生与种植博落回各部位生物碱含量分析

苏海兰，郑梅霞，陈宏, 李永，周贵斌，朱育菁

摘要：探究野生与种植博落回不同部位的原阿片碱、别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱和总生物碱的含量差异。采集明溪野生、明溪种植、光泽野生的博落回样品，利用HPLC方法对各部位原阿片碱、别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱和总生物碱含量进行测定，并利用SPSS 180进行数据的统计与分析。研究结果表明，野生与种植博落回除茎部中的原阿片碱含量和叶部中的别隐品碱外，其他生物碱含量差异不显著。不同的生长条件下博落回同一部位的生物碱含量差异较小，而同一生长条件下博落回不同部位的生物碱含量差异较大，其中根部各生物碱含量更为丰富。

关键词：博落回;生物碱;野生;种植;不同部位

中图分类号：R 2841 文献标志码：A文章编号：0253-2301（2021）02-0032-05

DOI： 1013651/jcnkifjnykj202102006

Analysis on Alkaloid Content in Different Parts of the Wild and the Planted Macleaya Cordata

SU Hailan1， ZHENG Meixia1， CHEN Hong1， LI Yong2， ZHOU Guibin2， ZHU Yujing1*

（1. Institute of Agricultural Biological Resources， Fujian Academy of Agricultural Sciences， Fuzhou，

Fujian 350003， China; 2. Fujian South Pharmaceuticals Co.， Ltd.， Sanming， Fujian 365200， China）

Abstract： In order to investigate the differences in the content of fumarine， allocryptopine， sanguinarine， chelerythrine and total alkaloids in different parts of the wild and the planted Macleaya cordata， the samples were collected from the wild and the planted Macleaya cordata in Mingxi County and the wild Macleaya cordata in Guangze County. Then， the contents of fumarine， allocryptopine， sanguinarine， chelerythrine and total alkaloids in each part were determined by HPLC method， and SPSS 180 was used for the data statistics and analysis. The results showed that there was no significant difference in the contents of other alkaloids between the wild and the planted Macleaya cordata except for the contents of fumarine in the stem and allocryptopine in the leaves. Under different growth conditions， the content of alkaloids in the same part of Macleaya cordata had little difference， while under the same growth condition， the content of alkaloids in different parts of Macleaya cordata had great difference， among which the content of alkaloids in the root was more abundant.

Key words： Macleaya cordata; Alkaloids; Wild; Planting; Different parts

博落回Macleaya cordata Wild.R.Br.系罌粟科博落回属多年生植物，在我国分布广泛＼[1＼]。博落回属植物具有杀虫、止痒、清热、解毒等功效，在临床上用于治疗肺炎、肝炎和皮肤病等，还有抗肿瘤活性作用＼[2-4＼]。明确野生与种植条件下不同部位的生物碱含量差异，对于增加博落回的利用效率，满足市场供给需求具有重要意义。博落回属植物含有多种化学成分＼[5＼]，现代药理研究表明其生物碱为主要的活性成分＼[6＼]。生物碱是由氨基酸衍生而来的低分子量、含氮且不包括氨基酸、蛋白质、核苷、叶啉和胆碱甲胺等开链的简单脂肪胺的有机化合物。作为一类重要的次生代谢产物，生物碱具有抵抗食草动物和抗病原体的作用。研究表明博落回根和地上部分可以分离出血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱、别隐品碱、去甲血根碱、6丙酮基二氢白屈菜红碱、博落回根碱、二氢血根碱等多种生物碱成分＼[7-8＼]。其中博落回的主要生物碱成分为血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱、别隐品碱。杜先华等＼[9＼]研究表明适宜浓度的血根碱对肠癌细胞和肺癌细胞有一定的抑制效果。李杰等＼[10＼]研究表明，不同浓度的血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱、别隐品碱可以促进猪肠上皮细胞的增殖。

随着药材需求量的不断增加与药用资源的匮乏，人工种植成为药用植物生产的重要手段。不同的生长条件会对植物的生物碱含量产生一定影响，并且植株不同部位的生物碱含量也会有所不同。张之鹏＼[11＼]研究表明铁皮石斛在野生条件下生物碱含量高于苗床栽培下的含量，并且随着栽培年限的增加生物碱含量逐渐递增。赵凤春＼[12＼]研究表明，苦参不同部位的生物碱含量存在较大差异，其中种子与药用部位的含量相近且为最高，其次为花，而其他部位的生物碱含量很低。目前对博落回的药用活性成分的鉴定研究较多，而缺乏对野生与种植条件下不同部位的生物碱含量差异的研究。本研究通过测定野生与种植条件下博落回不同部位原阿片碱、别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱和总生物碱含量，分析比较不同样品间各部位生物碱含量的差异，进一步明确博落回各部位生物碱含量的影响因子，为后续进一步提高博落回的药用价值提供理论依据。

1材料与方法

苏海兰等：野生与种植博落回各部位生物碱含量分析2021年第2期2021年第2期苏海兰等：野生与种植博落回各部位生物碱含量分析11主要仪器

1200系列G1311A型高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）;JP030型超声波清洗机（深圳市结盟清洗设备有限公司）;sartoriusBSA124S分析天平（北京赛多利斯科学仪器有限公司）;恒温水浴锅B260（上海亚荣生化仪器厂）;eppendorf5418R型离心机（上海实维实验仪器技术有限公司）。

12主要材料与试剂

野生和种植博落回样品于2019年5月采自福建省三明市明溪县和南平市光泽县，未结果，植株分为根、茎、叶三部分。标准品血根碱（SAN）、白屈菜红碱（CHE）、原阿片碱（PRO）（纯度≥98%，上海源叶生物有限公司）;标准品别隐品碱（ALL）（纯度≥98%，成都瑞芬思生物科技有限公司）;无水甲醇、无水乙醇（分析纯，西陇科学股份有限公司）;乙腈（分析纯，德国simark公司）;矿泉水（娃哈哈集团）;磷酸（分析纯，上海阿拉丁试剂有限公司）。

13标准溶液的制备

分别精密称取原阿片碱、别隐品碱适量溶于50%甲醇（含1%盐酸）溶液，配成质量浓度为017 mg·mL-1的原阿片碱和别隐品碱的储备液，冰箱冷藏保存。分别精密称取血根碱、白屈菜红碱适量溶于50%甲醇（含1%盐酸），配成质量浓度为025 mg·mL-1的血根碱和白屈菜红碱的储备液，冰箱冷藏保存。

14博落回样品预处理

博落回根、茎、叶分别洗净，于60℃电热鼓风机中烘干至样品恒重，通过粉碎机和石臼将样品研磨成粉末并过50目筛备用。

15试验方法

151博落回生物碱的提取生物碱的提取采用超声甲醇补足提取法＼[13＼]（ultrasonic assisted methanol complement extraction，UAMCE）。精确称取博落回样品1 g粉末至平底烧瓶，加入100 mL 50%甲醇（含1%盐酸），称定重量;密封后于35℃超声60 min， 超声功率为180 W;待冷却后补足失重，取出放冷至室温，离心，取上清液用022 μm滤膜过滤，备用。

152博落回生物堿的HPLC分析采用Kromasil1005C18色谱柱（Dim：46 mm×250 mm，Part/Serial：M05CLA25/e124315）;流动相为01%磷酸乙腈（A）和01%磷酸水（B）;体积流量为10 mL·min-1;进样量为5 μL。检测波长为284 nm。以原阿片碱、别隐品碱、血根碱和白屈菜红碱标准样品为对照，根据峰面积和浓度的线性关系，分析4种生物碱含量和总生物碱含量。

153数据分析采用SPSS 180对试验数据进行显著性分析。

2结果与分析

21野生与种植博落回生物碱含量比较

211野生与种植博落回根部生物碱含量比较野生与种植博落回根部各生物碱含量见表1。光泽野生样品的原阿片碱含量最高，且与明溪野生样品有显著差异。别隐品碱含量最高的是明溪种植样品，血根碱含量最高的是明溪野生样品和光泽野生样品，白屈菜红碱含量最高的是光泽野生样品，总生物碱含量最高的是明溪种植样品。

212野生与种植博落回茎部生物碱含量比较野生与种植博落回茎部各生物碱含量见表2。明溪种植样品的原阿片碱含量最高，且各处理间均有显著差异。别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱和总生物碱含量最高的是明溪种植样品，其中明溪种植样品、明溪野生样品的别隐品碱含量与光泽野生样品有显著差异，总生物碱各处理间均有显著差异，血根碱和白屈菜红碱各样品间没有显著差异。

213野生与种植博落回叶部生物碱含量比较野生与种植博落回叶部各生物碱含量见表3。明溪种植样品的原阿片碱含量最高，但各处理间没有显著差异。别隐品碱和总生物碱含量最高的是明溪种植样品，其中明溪种植样品的别隐品碱含量与明溪野生样品和光泽野生样品间均有显著差异，总生物碱含量与明溪野生样品及光泽野生样品均无显著差异。血根碱含量最高的是光泽野生样品，与明溪种植样品的血根碱含量有显著差异。白屈菜红碱含量最高的是光泽野生样品，各样品间没有显著差异。

22博落回不同部位生物碱含量比较

221明溪种植博落回各部位生物碱含量比较明溪种植的博落回各部位生物碱含量见表4。叶部原阿片碱含量最高，且各部位间有显著差异。根部的别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱和总生物碱含量最高，根茎叶各部位的原阿片碱、别隐品碱和总生物碱含量存在显著差异。

222明溪野生博落回各部位生物碱含量比较明溪野生的博落回各部位生物碱含量见表5。根部的原阿片碱别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱和总生物碱含量最高，根部与茎部的原阿片碱含量有显著差异，并且根部的别隐品碱、总生物碱含量与叶部和茎部有显著差异。

223光泽野生博落回各部位生物碱含量比较光泽野生的博落回各部位生物碱含量见表6。根部原阿片碱含量最高，叶部与其余两部位间有显著差异。根部的别隐品碱和总生物碱含量最高，根部两种生物碱含量均与茎部差异显著。叶部的血根碱含量最高，与茎部和根部差异显著。叶部和根部的白屈菜红碱含量相同，均与茎部的白屈菜红碱含量差异显著。

3讨论与结论

不同的生长条件下，博落回的原阿片碱、别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱和总生物碱的含量存在差异，明溪种植的博落回根茎叶中总生物碱含量均为3个样品中最高，并且茎部中的原阿片碱含量和叶部中的别隐品碱含量均为最高。其余样品同一部位野生与种植差异不明显。刘秀斌等＼[14＼]研究表明博落回根、茎、叶、果同一器官中4种生物碱含量动态变化趋势整体上有一定的相似性。钟明等＼[15＼]研究表明博落回根、茎、叶和果实在不同时期所含生物碱的种类和含量不同。博落回不同器官生长期内4种生物碱的代谢累积水平存在一定的差异，可能是不同产地的地理、气候等环境差异造成的＼[16-18＼]。

本试验中同一生长条件下的博落回根部的原阿片碱、别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱和总生物碱含量均为最高，其次是叶部，茎部最低。博落回的同一部位中4种生物碱含量依次为别隐品碱>原阿片碱>血根碱>白屈菜红碱。博落回各部位的原阿片碱、别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱含量范围分别在008%～154%、016%～486%、003%～025%、003%～016%。郭宇鸽等＼[19＼]的研究表明在博落回叶中原阿片碱、别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱的含量分别为048%～200%、036%～172%、018%～081%、007%～033%，与其相比，本试验中的博落回叶部的生物碱含量均处于较高水平。汪学军等＼[20＼]研究表明博落回根部提取液的抑菌效果较其他部位更强。黄敬等＼[21＼]研究结果表明，博落回不同部位原阿片碱、别隐品碱含量有差异;其中根中别隐品碱含量最高，两种生物碱之和在博落回不同部位中含量为：根>果实>叶>茎。博落回的单一部位富集的生物碱在整株植物的生物量中占比很小，如果仅利用单一部位作为有效成分提取原料，必然会造成植物资源的巨大浪费。在实际生产中，从不同药用部位或全草中提取有效成分的生产工艺和生产成本也存在很大不同，所以大生产过程中需要根据原料的采收期和采收部位选择不同生产工艺＼[22-23＼]。

本试验通过比较明溪野生、明溪种植和光泽野生博落回样品间不同部位的原阿片碱、别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱和总生物碱含量，明确了野生与种植除根部和叶部中的原阿片碱含量以及叶部中的别隐品碱外其他生物碱含量差异不显著，同一生长条件下生物碱含量最为丰富的是根部，其次是叶部。该研究结果为进一步研究博落回的药用活性成分提供了数据支持，为博落回资源的合理应用提供了参考。

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（责任编辑：柯文辉）

苏海兰，郑梅霞，陳宏，等野生与种植博落回各部位生物碱含量分析＼[J＼]福建农业科技，2021，51（2）：32-36.

收稿日期：2021-01-20

作者简介：苏海兰，女，1980年生，硕士，高级农艺师，主要从事药用植物资源利用与仿生栽培研究。

*通信作者：朱育菁，女，1972年生，博士，研究员，主要从事农业生物资源保护与利用（Email：zyjingfz@163com）。

基金项目：福建省科技计划项目——省属公益类科研院所基本科研专项（2020R1034008）;福建省农业科学院自由探索科技创新项目（ZYTS2019010）。