液相色谱-串联质谱法检测水产品中磺胺类和喹诺酮类药物残留

2021-04-25殷素平

商品与质量 2021年13期

殷素平

广东省广州市番禺区农产品质量监测所广东广州 511450

磺胺类和喹诺酮类药物均是常见的合成抗生素，广泛存在于水产养殖中，且可以通过多种途径积蓄到人体中，尤其是喹诺酮类药物会残留于人体破坏造血系统，进而导致溶血性贫血症，严重时引发癌症[1]。

1 试验设计环节

所选用的高效液相色谱-串联质谱法采购美国AB科技有限公司3200QTRAPLC/MS/MS。本次试验所选择的色谱柱型号为AgilentEdipsePlusC182.5mm×100mm，5μm，柱温控制为35℃，流量控制为0.8ml/min，进取量设定为20μL。流动相为甲醇-1%甲酸5mmol乙酸铵，经过0-15min甲醇含量由最初的50%增加至90%，当甲醇比例达到90%时各个化合物的出峰效果达到最佳状态，严格将流速设定为0.8ml/min。表1是具体的磺胺类和喹诺酮类的检测离子与条件。

2 试验操作环节

试验过程中先将样品解冻，在50ml的离心管中准确称取5g的样品，准确加入50μL混合内标标准工作液，加入10g的无水硫酸钠搅拌，然后再加入乙腈涡旋混合，确保各种物质可以充分搅匀，最后10000r/min离心5min分离。上清液中缓缓倒入已经准备好的正已烷溶液，充分振荡确保可以分层，提取下层的清液倒入至旋转蒸发瓶中。此过程中需要注意的一点是，残渣需要再进行一次提取，提取完成后合并两次提取液到蒸发瓶中，确保蒸发近干，用1ml的流动相经涡流混合，过0.2μm滤膜，对滤液开展3200QTRAPLC/MS/MS分析[2]。

3 试验结果分析

3.1 前处理条件的合理选择

本次试验发现，磺胺类化合物在酸性条件下溶解度较大，如果选用酸化乙腈加以提取则可以进一步提升提取效率。试验时在旋蒸至2-3ml时加入10ml的无水乙醇，以便确保提取液可以蒸发至近干，经研究发现喹诺酮类药物的提取效率较为稳定，重复性良好。

3.2 质谱条件的合理选择

通过试验发现，本次所选择的5种化合物和2种内标均可以获得较高的（M＋H）母离子，而通过调节毛管电压和椎孔电压，发现目标物质的信号响应能力可以达到最高。将乙腈、甲醇和0.1%甲酸的5mmol/l乙酸铵溶液、0.1%甲酸溶液、0.1%甲酸的2mmol/l乙酸铵溶液作为流动相。试验结果表明，当甲醇作为流动相时目标物的灵敏度可以大大提升，且所形成的峰形更好，而如果将0.1%甲酸溶液作为流动相时同样可以得到良好的离子化效果。由此可以得出，在正离子模式下，最佳的质谱条件为乙醇和0.1%甲酸5mmol/l乙酸铵溶液溶液。

3.3 基质效应分析

本次试验发现高效液相色谱-质谱法对磺胺类药物基质有良好的抑制效应作用，这对于提升检验数据的真实性具有十分重要的意义。本次试验采用内标法。在应用试剂配制标准溶液这一方法时，质量分数控制为4.0μg/kg，发现无法开展准确的定量，继而将质量分数控制为10.0μg/kg，发现恩诺沙星与氘代环丙沙星的回收率均可以达到94.7-112%，但磺胺类药物的回收率却仅仅只达到20-50%，且重复性不佳。应用基质配制标准溶液这一方法时，先将质量分数控制为1.0μg/kg，发现回收率仅仅可以达到45-67%，重复性不佳。然后加入内标物，质量分数控制为0.20μg/kg，实际质量分数控制为0.163-0.255μg/kg，回收率可以达到87-120%。在应用向空白样本中加入标准品这一方法时，发现在处理过程中待测物质均发生了不同程度的损失，尤其是本身含量较低的样品损失更加明显。