HPLC法同时测定爱康九亨口服液中葛根素和橙皮苷的含量

2021-04-10彭乃焕

天津化工 2021年2期

彭乃焕

（百色市食品药品检验所，广西百色533000）

1 引言

爱康九亨口服液是以甘草、葛根、生姜、砂仁、白豆蔻、陈皮、赤小豆、丁香、蔗糖、蜂蜜、水为主要原料制成的保健食品，对化学性肝损伤有辅助保护功能。该保健食品的标志性成分为甘草酸，质量标准未建立葛根中葛根素和陈皮中橙皮苷的测定方法。本文采用HPLC法同时测定其中的葛根素和橙皮苷，为提高该保健食品的质量标准提供参考。

2 材料与方法

2.1 仪器、试剂与材料

高效液相色谱仪（美国Waters公司，e2695+2998），XS205DU型电子分析天平（感量为0.01mg，瑞士METTER TOLEDO公司），明澈-D24UV型纯水机（美国Millipore公司），SB-5200DTD超声波提取器（宁波新芝生物科技股份有限公司）；甲醇（色谱纯，默克公司）；水为超纯水；标准品葛根素和橙皮苷均购于中国食品药品检定研究院；爱康九亨口服液（天津和治药业集团有限公司生产）。

2.2 实验方法

2.2.1 标准品储备溶液的制备

精密称取葛根素20.43mg，置20 mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，作为葛根素标准储备液。精密称取橙皮苷9.78mg，置10mL容量瓶中，加入二甲基甲酰胺2mL溶解，再加甲醇定容至刻度，作为橙皮苷标准储备液。

2.2.2 混合标准溶液的制备

精密量取葛根素标准储备液10 mL，橙皮苷标准储备液2 mL，置20 mL容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，摇匀，作为混合标准溶液（含葛根素0.4878mg·mL-1,橙皮苷0.094mg·mL-1）。

2.2.3 标准曲线溶液的制备

分别精密吸取混合标准溶液0.25 mL、0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL，分别置10mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2.2.4 样品前处理

精密量取本品1 mL，置10 mL容量瓶中，加适量甲醇，超声处理（功率300w，频率50kHz）3min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取滤液作为供试液。

2.2.5 液相色谱条件

色谱柱：Waters SunFire C18（250mm×4.6mm,5μm）；柱温：30℃；流速：1.0mL·min-1；进样量：10μL；检测波长：283nm；流动相：A相为甲醇，B相为0.1%磷酸溶液，梯度洗脱：0~5min A相23%；5~20min A相梯度变化到28%；20~21min A相梯度变化到40%；21~40minA相维持40%。混合标准溶液、供试品溶液及阴性溶液色谱图见图1。

图1 A：供试品； B：阴性样品； C：混合对照品

3 结果与分析

3.1 线性关系与检出限、定量限

取配制好的标准曲线溶液，分别进样10μL，按“2.2.5”色谱条件下测定峰面积。以峰面积Y为纵坐标，以标准曲线溶液浓度X为横坐标进行线性回归，各组分的回归方程及相关系数见表1。可见该方法在实验范围内线性关系良好。以信噪比为3计算检出限，信噪比为10计算定量限，测得每1mL样品中葛根素、橙皮苷检出限分别为0.013mg、0.0074mg，定量限分别为0.04mg、0.024mg。