细胞块石蜡切片联合细胞涂片检查对恶性浆膜腔积液的诊断效能

周艳平

(长葛市人民医院 病理科，河南 许昌 461500)

浆膜腔积液是多种疾病的常见并发症，发育过程中恶性基本特征不明显，且恶性浆膜腔积液中肿瘤细胞分散又少，临床诊断具有一定难度，常采用脱落细胞学检查鉴别其为恶性或良性[1]。细胞涂片法检查较简单快捷，但难以区分增生间皮细胞与肿瘤细胞，不能准确判断肿瘤细胞起源。细胞块石蜡切片法能使细胞聚集，所收集细胞数量多，清晰显示组织学结构[2]。本研究探讨细胞块石蜡切片联合细胞涂片检查对浆膜腔积液的诊断效能。

1 资料和方法

1.1 一般资料选取2018年4月至2019年4月在长葛市人民医院就诊的腹腔、胸腔、心包积液患者114例，包括腹腔积液36例、胸腔积液32例、心包积液31例、多浆膜腔积液15例(积液≥2处)。患者中男57例，女57例；年龄18～85岁，平均(49.66±14.21)岁；积液为黄色者79例，红色血性者30例，乳糜性者5例。纳入标准：经长葛市人民医院影像学诊断、穿刺确诊浆膜腔积液，患者签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1检查方法 所有患者均行细胞块石蜡切片+细胞涂片检查及病理诊断。(1)细胞涂片检查：取新鲜浆膜腔积液10～20 mL，高速离心2 000 r·min-1，5 min后取沉渣，采用推片法制片(5～7张/例)，自然干燥后进行染色(吉姆萨染色)。血性混浊标本离心，取有核细胞层制片，涂片疑似癌细胞，可缩短染色时间。(2)细胞块石蜡切片：室温下浆膜腔积液静置10～20 min，尖底离心管取50 mL底层标本，高速离心(5 000 r·min-1)，5 min后弃去上清液，留沉淀物于离心管；加入体积分数为4%的中性甲醛5～10 mL，固定1 h，离心后弃去上清液；加入体积分数为4%中性甲醛5～10 mL，混匀补充固定1 h，离心后弃去上清液，用滤纸包裹沉淀物；若浆膜腔积液沉淀物少，加入体积分数75%乙醇5～10 mL，静置30 min凝固硬化，于显微镜擦镜纸上，包好，放入脱水机处理，制成石蜡细胞块，切成3 μm厚度切片，60 ℃下烘干1 h。并按照如下方法阅片：将制好的细胞涂片与细胞块石蜡切片放置于显微镜下观察，具有恶性特征≥10个细胞为阳性，无异型细胞为阴性，有异型细胞但未确定恶性的结合临床诊断。联合诊断标准为细胞块石蜡切片、细胞涂片任一阳性即为阳性。(3)病理诊断：经手术病理、胸腹腔镜、穿刺活检等确诊为恶性积液。

1.2.2观察指标 统计恶性肿瘤来源，以病理诊断作为“金标准”，比较细胞块石蜡切片、细胞涂片单独检查与联合诊断恶性浆膜腔积液的结果及诊断效能，包括敏感度、特异度、准确度，并观察显微镜下具体表现。

1.3 统计学方法采用SPSS 22.0统计软件分析数据，计数资料以频数和率(%)表示，不同诊断方法对疾病的诊出率差异比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 恶性肿瘤来源114例浆膜腔积液患者经病理诊断证实恶性积液者51例、良性积液者63例；恶性肿瘤中恶性胸腔积液占66.67%，其中以原发性肺癌和乳腺癌为主，分别占37.25%和11.76%；恶性肿瘤中恶性腹腔积液占23.53%，其中以消化道肿瘤为主，占9.80%；恶性心包积液占9.80%。见表1。

表1 恶性肿瘤来源(n，%)

2.2 诊断结果采用细胞涂片诊断出恶性积液32例、良性积液82例；采用细胞块石蜡切片诊断出恶性积液34例、良性积液80例；联合诊断出恶性积液47例、良性积液67例。见表2。

表2 诊断四格表(n)

2.3 诊断效能细胞涂片、细胞块石蜡切片、联合诊断灵敏度、准确度比较，差异有统计学意义(P<0.05)，特异度比较，差异无统计学意义(P>0.05)。两两比较，联合诊断灵敏度高于细胞涂片和细胞块石蜡切片单独诊断，差异有统计学意义(P<0.05)；联合检测准确度高于细胞涂片生物和细胞块石蜡切片单独诊断，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

2.4 显微镜表现(1)细胞块石蜡切片：细胞数量较多，细胞结构完整，呈现大量集中样，且有核细胞密度较高，图像背景清晰，有助于观察分析。(2)细胞涂片检查：细胞数量较少，细胞排列良好，呈现堆积重叠或分散样，具有较多背景杂质，可用于判断肿瘤来源。

表3 诊断结果[%(n)]

3 讨论

恶性浆膜腔积液由癌栓堵塞淋巴管、癌细胞刺激等引起，且任意系统恶性肿瘤均可能会发生浆膜腔内转移，常见于乳腺癌、肺癌、卵巢癌、胃肠道癌、恶性淋巴癌等，特征不明显，诊断困难。临床上可通过病理诊断确诊，如胸腹腔镜、纤维支气管镜、穿刺活检等，但会对患者造成一定程度损伤或意外伤害[3]。

本研究中114例浆膜腔积液患者经病理诊断证实恶性积液51例、良性积液63例；其中恶性肿瘤主要来源包括恶性胸腔积液66.67%，恶性腹腔积液23.53%，恶性心包积液9.80%。表明恶性浆膜腔积液来源广泛，筛查难度高，且发病情况风险性更高。临床应积极采取诊断措施确认病情发展情况，并给予积极及时治疗。刘科等[4]研究表明，细胞块切片免疫细胞化学染色能提升浆膜积液阳性检出率，有助于肿瘤来源的判断。应用浆膜腔穿刺采取抽取液查找癌细胞，能快速诊断疾病，减少对患者不必要的伤害。细胞涂片法易行、快速、简便，但检出率较低，易造成误诊。细胞块石蜡切片细胞基数大，能辅助鉴别癌细胞与间皮细胞，帮助判断肿瘤细胞起源与病理学亚型。本研究结果显示，联合诊断灵敏度高于细胞涂片和细胞块石蜡切片，联合检测准确度高于细胞涂片和细胞块石蜡切片，提示细胞块石蜡切片联合细胞涂片检查能提高恶性浆膜腔积液患者诊断的灵敏度、准确度。细胞涂片法细胞排列整齐，与原细胞形状、体积近似，反映其真实性、颗粒性、染色性及器官功能状态、反应性变化，但收集细胞数量少，涂片时常出现厚薄不匀，涂片太厚则细胞重叠，影响观察，涂片太薄只能观察少数细胞形态变化，难以判断。同时，细胞成分复杂且来源较多，易造成假阴性，降低灵敏度。细胞块石蜡切片法中厚薄均匀，结构完整，背景清晰，且蜡块可间断、反复切片，采用敏感抗体化学染色，明确标记区分肿瘤细胞与间皮细胞，从而便于观察，并诊断鉴别，确定肿瘤来源。但石蜡切片在切片、浸蜡、脱水过程中可能有人为损害和固缩，从而造成细胞形态不清晰，而造成假阴性现象[5]。因此临床上采用上述两种方法联合检查，结合二者优势，能提高诊断灵敏度、准确度。检测应注意：(1)穿刺抽取大量积液的患者时，若使用刚开始抽取的清澈积液，离心后获得沉淀块不宜制成细胞块石蜡或体积太小，因此应选取最后抽取的浑浊积液；(2)穿刺抽液应在实时超声监视下完成，避免发生并发症；(3)对于乳糜性及血性积液，应对红细胞脱色处理。

综上所述，恶性浆膜腔积液来源广泛，且采用细胞块石蜡切片联合细胞涂片检查能提高诊断的灵敏度、准确度，有助于临床早期诊断和治疗。