尿胱抑素C和α1-酸性糖蛋白在早期糖尿病肾病诊断中的价值

翟迎九　付彬　姚强　慕开达　张菁　杨燕萍

[摘要] 目的 研究尿胱抑素C（Cystatin C，CysC）和α1-酸性糖蛋白（Alpha-1-acid glycoprotein，AAG）在早期糖尿病腎病诊断中的价值。 方法 选择2017年6月至2018年6月上海市浦东新区周浦医院内分泌科住院的2型糖尿病患者130例，根据尿微量白蛋白（Urine microalbumin，U-mALB）的不同分为单纯糖尿病组（对照组）和微量白蛋白尿组（试验组）。采用酶联免疫吸附法（ABC-ELISA）检测尿CysC、尿AAG，比较各组尿CysC和AAG水平的差异，分析尿CysC、尿AAG与尿U-mALB的相关性。 结果 对照组与试验组的尿CysC分别为（1.026±0.673）mg/L和（1.556±0.846）mg/L，尿AAG分别为（0.321±0.107）mg/L和（0.368±0.142）mg/L，两组比较，差异有统计学意义（P<0.05）;Pearson相关分析显示，所有入组的糖尿病患者尿CysC（r=0.434，P=0.000）和尿AAG（r=0.267，P=0.002）与尿U-mALB呈正相关;联合检测尿CysC和尿AAG的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均明显高于任一单项指标。 结论 检测尿CysC和尿AAG可反映糖尿病患者早期肾损伤情况，联合检测对于诊断早期糖尿病肾病具有较高的临床价值。

[关键词] α1-酸性糖蛋白;胱抑素C;2型糖尿病;糖尿病肾病

[中图分类号] R587.1          [文献标识码] B          [文章编号] 1673-9701（2021）04-0034-04

The value of urinary cystatin C and α1-acid glycoprotein in the diagnosis of early diabetic nephropathy

ZHAI Yingjiu1   FU Bin2   YAO Qiang3   MU Kaida1   ZHANG Jing1   YANG Yanping1

1.Department of Endocrinology， Zhoupu Hospital， Pudong New Area in Shanghai City， Shanghai 201318， China; 2.Kangqiao Health Service Center， Pudong New Area in Shanghai City， Shanghai 201315， China; 3.Zhoupu Health Service Center， Pudong New Area in Shanghai City， Shanghai 201318， China.

[Abstract] Objective To study the value of urinary cystatin C（CysC） and Alpha-1-acid glycoprotein（AAG） in the early diagnosis of diabetic nephropathy. Methods A total of 130 patients with type 2 diabetes in the department of endocrinology of Zhoupu Hospital， Pudong New Area in Shanghai City from June 2017 to June 2018 were enrolled. According to the difference of urine microalbumin（U-mALB）， they were divided into simple diabetes group（control group） and microalbuminuria group（experimental group）. Urine CysC and urine AAG were detected by enzyme-linked immunosorbent assay（ABC-ELISA）， and the differences in urine CysC and AAG levels between the groups were compared and analyzed. The correlation between urine CysC， urine AAG， and urine U-mALB was analyzed. Results The urine CysC of the control group and the experimental group were（1.026±0.673）mg/L and（1.556±0.846）mg/L， and AAG of the two groups were（0.321±0.107）mg/L and（0.368±0.142） mg/L， the differences were statistically significant（P<0.05）. Pearson related analysis found that urine CysC（r=0.434， P=0.000） and AAG（r=0.267， P=0.002） of all enrolled diabetic patients were positively correlated with urine U-mALB; the sensitivity， specificity， positive predictive value， and negative predictive value of combined detection of urine CysC and AAG were significantly higher than those of any single index. Conclusion The detection of urine CysC and AAG can reflect the early renal damage of diabetes， and the combined detection has high clinical value for the diagnosis of early diabetic nephropathy.

[Key words] α1-acid glycoprotein; Cystatin C; Type 2 diabetes; Diabetic nephropathy

糖尿病导致的肾脏病变在慢性肾脏病（Chronic kidney disease，CKD）中的比例逐年增加，目前，在我国有20%～40%糖尿病患者合并糖尿病肾病[1]。糖尿病肾病发展缓慢，早期缺乏特异性临床症状，一旦发现，则往往已经是肾病终末期。因此，早发现并及早给予干预治疗非常重要。糖尿病肾病诊断的“金标准”依赖肾脏穿刺活检，有创检查在临床中的应用受到极大限制，而无创的糖尿病肾病早期诊断手段主要依赖实验室生物标志物检测。本研究以2型糖尿病患者130例为观察对象，检测其尿微量白蛋白（U-mALB）、尿胱抑素C（Cys C）和尿α1-酸性糖蛋白（AAG）及其他相关生化指标，评估尿CysC、尿AAG指标在糖尿病肾病早期诊断中的价值。

1 资料与方法

1.1一般资料

选择2017年6至2018年6月上海市浦东新区周浦医院内分泌科住院的2型糖尿病患者130例，其中男64例，女66例;年龄24～88岁，平均（61.21±14.23）岁。糖尿病诊断和分类标准采用目前通用的世界卫生组织（World health organization，WHO）1999年标准[2]。糖尿病患者排除标准[3]：①合并甲状腺功能减退、恶性肿瘤、冠心病、糖尿病急性并发症;②合并严重脏器疾病。根据尿U-mALB检测结果分为两组：单纯糖尿病组（U-mALB<30 mg/24 h）、微量白蛋白尿组（30 mg/24 h≤U-mALB≤300 mg/24 h）。以单纯糖尿病患者为对照组、以微量白蛋白尿患者为试验组。对照组65例，其中男32例，女33例;年龄30～88岁，平均（59.32±13.81）岁;糖尿病病程0～36年，平均（8.62±7.54）年;合并高血压35例。试验组65例，其中男31例，女34例;年龄24～88岁，平均（61.83±14.71）岁;病程0～30年，平均（9.92±7.73）年;合并高血压31例。两组一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。见表1。所有研究对象均对本研究知情同意，并签署知情同意书，本研究经上海市浦东新区周浦医院医学伦理委员会同意后实施。

1.2 方法

所有观察对象均过夜禁食禁水12 h后，于次日清晨空腹留取静脉血，采用AMS-300型全自动生化分析仪进行检测血糖、血脂分析、肾功能、尿酸等生化指标，同时嘱患者留取24 h尿，加入防腐剂，混匀后取2～4 mL，置于-70℃冰箱中保存，集中检测。尿CysC和尿AAG的检测采用酶联免疫吸附法（ABC-ELISA），仪器采用产自芬兰的酶标仪（型号DENLEY DRAGON Wellscan MK3），严格按照仪器及试剂说明书、项目SOP文件完成操作，测定时每日室内质控达标，仪器各项参数保持稳定。

1.3 评价标准[4]

将对照组的（x±2s）作为正常值范围，以尿CysC、尿AAG高于对照组的（x±2s）为阳性。敏感度=真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数），特异度=真阴性例数/（假阳性例数+真阴性例数），阳性预测值=真阳性例数/（真阳性例数+假阳性例数），阴性预测值=真阴性例数/（假阴性例数+真阴性例数）。

1.4 统计学方法

应用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析，计量资料用（x±s）表示，采用t检验;计数资料用[n（%）]表示，采用χ2检验;两变量间的相关关系采用Pearson相关分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组尿CysC、尿AAG比较

试验组的尿CysC、尿AAG水平高于对照组，两组比较，差异有统计学意义（P<0.01）。见表2。

2.2 Pearson相關分析

相关分析显示，尿CysC与U-mALB呈正相关（r=0.434，P=0.000），尿AAG与U-mALB亦呈正相关（r=0.267，P=0.002）。

2.3尿CysC、尿AAG对糖尿病肾病早期诊断的性能评价

尿CysC的灵敏度和特异度高于尿AAG，阳性预测值、阴性预测值也较高，两项指标联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均明显高于任一单项指标。尿AAG、尿CysC和联合检测的ROC曲线下面积分别为0.629、0.768、0.857。见表3，封三图5。

3讨论

众所周知，糖尿病肾病是糖尿病的常见慢性并发症，其最终会导致患者出现肾功能衰竭。目前公认U-mALB检测是判断早期糖尿病肾病的重要指标[5]，但U-mALB检测易受多种因素干扰，检测结果不能很好地符合临床病情。有研究报告，在被观察的4597例2型糖尿病患者中，有16.5%患者的肾小球滤过率小于60 mL/（min·1.73 m2），其中中度蛋白尿和重度蛋白尿者占比分别为30.9%和23.7%，而有45.4%的患者尿清蛋白排泄率正常[6]。通过检测U-mALB来实现对糖尿病肾病进行早期诊断的方法存在一定局限性，因此，人们一直努力寻找能更好反映糖尿病肾脏病变的生物学指标，多项生物学标志物被观察到对早期糖尿病肾病的诊断有价值，这其中就包括尿CysC、尿AAG等。

CysC是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，它能够自由通过肾小球滤过膜，通过调节半胱氨酸蛋白酶的活性而发挥作用。CysC在肾小管中被完全重吸收，如果它出现在尿液中，则提示肾小管受损或肾小管功能障碍，因此可以认为尿CysC是一种反映肾小管功能的生物标志物[7]。目前已有文献报道，尿CysC作为肾脏损伤的标志物在不同类型肾脏疾病诊断中的评价及应用[8]。有研究结果显示，糖尿病患者尿CysC水平与尿微量白蛋白排泄率呈正相关，即使在无蛋白尿的患者中也有部分患者的尿CysC水平增高，提示尿CysC可用于评估糖尿病患者早期肾小管功能障碍[9]。还有研究结果显示，糖尿病患者肾脏足细胞损伤与尿CysC水平独立相关，推测晚期糖基化终产物可能影响足细胞和近端小管，导致尿CysC增高[10]。有研究结果显示，血清CysC是早期糖尿病肾病的标志物，比微量白蛋白尿和血清肌酐（肾病的常用标志物）更早反映肾脏功能下降[11]。AAG是由肝细胞产生的急性时相反应蛋白，在健康人血清中含量很低，Jain等[12]通过蛋白质组学研究发现，AAG在糖尿病和健康人尿液中存在明显差异，且尿AAG的升高往往伴有尿清蛋白排泄率升高。在对早期糖尿病肾病的临床研究显示，U-mALB水平与血中AAG密切相关，也间接提示AAG水平与早期糖尿病肾脏病变的发生与发展有关[13]。有研究显示，早期糖尿病肾病患者尿AAG水平明显升高，且与血尿素氮、肌酐、尿酸水平及肾小球滤过率指标密切相关，推论糖尿病患者尿AAG水平对早期糖尿病肾病诊断具有一定意义[14]。

本研究结果显示，试验组的尿Cys C和尿AAG水平较对照组明显增高，组间比较，差异有统计学意义（P<0.05），与近年来的研究报道相一致[15-16]。对所有入组糖尿病患者的指标进行Pearson相关分析，结果显示，U-mALB与尿CysC呈正相关（r=0.434，P=0.000），与尿AAG亦呈正相关（r=0.267，P=0.002），提示尿CysC、尿AAG与U-mALB有较好的一致性。尿CysC、AAG对糖尿病肾病早期诊断的性能评价显示，尿CysC的灵敏度和特异度高于尿AAG，两项指标联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均明显高于任一单项指标。

综上所述，尿CysC和尿AAG水平在糖尿病肾病患者中明显增高，并且与目前公认的检测指标U-mALB存在明显的正相关，因此，检测糖尿病患者的尿CysC和尿AAG水平，尤其是两项指标联合检测，对于诊断早期糖尿病肾病具有较高的临床价值。

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（收稿日期：2020-07-14）