HER-2 基因检测在乳腺癌检测中的意义分析

黄创新 胡鹏

随着我国医疗技术的技术,对常见肿瘤疾病的尽早发现及治疗取得一定成绩,其中乳腺癌作为女性群体最为常见的恶性肿瘤疾病,需有效治疗,评估预后［1］。根据临床研究可知,HER-2 基因扩增、蛋白过表达乳腺癌患者预后差,HER-2 和表皮生长因子的基因产物有广泛的同源性,是表皮生长因子受体家族中表达广泛的受体,可促进肿瘤新生血管生成,促进肿瘤细胞存活,增加肿瘤细胞的侵袭力,可作为预测乳腺癌预后的可靠依据［2］。为此,本次研究对乳腺癌患者行HER-2基因检测的意义进行了探讨,报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2018 年1 月～2019 年12 月本单位38 例手术切除乳腺癌石蜡标本,检测HER-2 基因状态,所有患者均经手术病理确诊为原发性乳腺癌［3］。患者年龄33～75 岁,平均年龄(51.02±3.26)岁,临床分期：Ⅰ期7 例,Ⅱ期21 例,Ⅲ期10 例。

1.2 方法

1.2.1 IHC 法 蜡块连续切片,厚度3 μm,置入60℃烤箱脱蜡,确保本中均有肿瘤组织。65℃烤片2～4 h,浸泡于二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ脱蜡各20 min,100%酒精20 min,95%酒精20 min,85%酒精20 min,水冲,切片置入0.3%过氧化氢-甲醇溶液中,室温下孵育10 min,水冲,磷酸缓冲液(PBS)洗,置入抗原修复液内微波修复10 min,PBS 液洗,滴50 μl 山羊血清,室温下孵育10 min,加一抗,37℃下孵育60 min,PBS 液洗,加物素化二抗工作液,37℃下孵育30 min,PBS 液洗,DAB 显色3～10 min,水洗、苏木素淡染,蓝化,脱水,透明,中性树胶封片。

1.2.2 FISH 法 蜡块切片,取多块3 μm 切片放置在玻片上,置于65℃下过夜烘烤,浸于二甲苯中室温脱蜡2 次,各10 min,浸入100%乙醇5 min,100%乙醇2 min,85%乙醇2 min,70%乙醇2 min,浸入去离子水中3 min,50℃下30%(W/V)酸性亚硫酸钠处理切片20～30 min,2X SSC 溶液中漂洗2 次,0.1 MHCI 浸泡5～10 min。2X SSC 溶液中漂洗2 次,乙醇脱水,丙酮固定,加热玻片至56℃。标记杂交区域,玻片(73±1)℃变性,乙醇梯度脱水,按照杂交缓冲液7 μl,去离子水1 μl,探针2 μl 配置,探针混合物73℃变性,探针46℃封闭,滴玻片杂交去,封片,42℃杂交。采用甲酰胺洗涤方案,暗处干燥玻片,15 μl DAPI 复染色,观察。

1.3 观察指标 分析FISH 法与IHC 法检测HER-2基因状态结果以及HER-2 基因扩增的相关因素。HER-2 基因扩增的相关因素包括乳腺癌患者年龄、月经状态、肿瘤直径、淋巴结转移情况、临床分期、组织学分级、雌激素受体、孕激素受体。

1.4 统计学方法 采用SPSS20.0 统计学软件处理数据。计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 FISH 法与IHC 法检测HER-2 基因状态结果分析 FISH 法阳性检出率44.74%(17/38) 与IHC 法的63.16%(24/38)比较,差异无统计学意义(χ2=2.595,P＞0.05)。见表1。

2.2 HER-2 基因扩增相关因素分析 HER-2 基因扩增患者与HER-2 基因未扩增患者的年龄、雌激素受体情况比较,差异具有统计学意义(P＜0.05)。HER-2 基因扩增患者与HER-2 基因未扩增患者的月经状态、肿瘤直径、淋巴结转移、临床分期、组织学分级、孕激素受体情况比较,差异均无统计学意义(P＞0.05)。见表2。

表1 FISH 法与IHC 法检测HER-2 基因状态结果分析(n)

表2 HER-2 基因扩增相关因素分析(n)

3 讨论

近年来我国乳腺癌检出率明显增加,病死率高,备受女性群体重视［4］。为实现对乳腺癌患者的有效治疗,需明确预后因素,针对性制定治疗方案,评估治疗效果,而预后因素与肿瘤生长及转移潜能密切相关,包含肿瘤直径、淋巴结转移情况、临床分期、组织学分级、雌、孕激素受体等,其中HER-2 属于预测乳腺癌预后的标记物［5,6］。近年来随着对HER-2 研究的深入,发现通过明确HER-2 基因扩增和蛋白过表达评估患者预后,因此临床加强FISH 法和IHC 法检测HER-2 基因HER-2 属于络氨酸激酶受体,对细胞的分裂和生长、细胞生长因子信号传导具有重要作用,导致信号传导途径异常,促使乳腺癌生长和增殖［7］。若HER-2 基因过度表达,则提示乳腺癌患者病情进展快,癌细胞易转移,易复发,预后较差。HER-2 定位于染色体17Q21.及活化后传导致分裂信号,在许多肿瘤细胞中呈高表达。正常细胞中有2 个HER-2 基因,细胞膜上5 万个蛋白,若HER-2 基因扩增呆滞蛋白过表达,则细胞膜的膜受体数量达到1 百万个［8,9］。而且HER-2 的异二聚体静若表皮生长因子受体(EGFR)与cabl 的偶联,EGFR 在细胞膜过度表达,加速细胞增殖,促使肿瘤形成及生长［10］。本次研究结果显示,FISH 法阳性检出率44.74%(17/38)与IHC 法的63.16%(24/38)比较,差异无统计学意义(χ2=2.595,P＞0.05)。HER-2 基因扩增患者与HER-2 基因未扩增患者的年龄、雌激素受体情况比较,差异具有统计学意义(P＜0.05)。HER-2 基因扩增患者与HER-2 基因未扩增患者的月经状态、肿瘤直径、淋巴结转移、临床分期、组织学分级、孕激素受体情况比较,差异均无统计学意义(P＞0.05)。提示可采用FISH 法检测HER-2 基因状态,检出HER-2 基因扩增占比较低,且明确HER-2 基因扩增与乳腺癌患者年龄、雌激素受体密切相关。HER-2 基因扩增与肿瘤直径、淋巴结转移情况、临床分期、组织学分级、孕激素受体等无关结果,本次研究结果纳入患者少,需进一步扩大研究范围,深入研究。

综上所述,乳腺癌患者行HER-2 基因检测可采用FISH 法,可明确ER-2 基因扩增,对评估乳腺癌患者预后有一定价值,研究价值较高。