血清miRNA-196a联合糖类抗原125、糖类抗原19-9对宫颈癌的诊断价值

荆菁华，史九波，史玲玲

三门峡市中心医院检验科，河南 三门峡 472000

宫颈癌是常见的妇科疾病，占生殖系统恶性肿瘤50%以上，发病率仅次于乳腺癌，病死率居女性恶性肿瘤首位。该病病因尚未完全明确，但临床认为，环境、吸烟、多孕多产、人乳头瘤病毒感染等诸多因素均与宫颈癌发生相关。以手术为主的综合治疗手段具有较好的疗效，临床研究证实，早期宫颈癌5年生存率可高达70%～90%，因此宫颈癌的早期诊疗对于延长生存期、改善预后均十分关键。传统宫颈癌诊疗方式如宫颈刮片、阴道镜检查等由于患者早期症状不明显，易造成漏诊或误诊，耽误最佳治疗时机。随着分子生物学及免疫学的不断进步及发展，血清肿瘤标志物检测在肿瘤患者的筛查、诊断、评估预后及病情转归方面具有重要意义，已逐步成为肿瘤早期筛查、诊断及预后判断的重要依据。糖类抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9，CA19-9）及CA125均是常见的肿瘤标志物，既往诸多研究证实，其在卵巢癌、肺癌、胃癌等多种恶性肿瘤中存在高表达，且具有一定诊断及预测价值，但其在宫颈癌中的诊断价值仍有待证实。同时，研究证实，微小RNA（microRNA，miRNA）可在细胞各种生理过程中发挥作用，异常表达可导致包括恶性肿瘤的多种疾病。miRNA-196a已被证实在胃癌、子宫内膜癌等恶性肿瘤形成中发挥促进作用，且表达量与患者预后存在相关性，但宫颈癌患者血清中miRNA-196a表达情况尚未完全明确。基于上述理论基础，本研究旨在探讨血清miRNA-196a联合CA125、CA19-9诊断宫颈癌的临床价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2018年1月至2019年12月三门峡市中心医院收治的宫颈癌患者的病历资料。纳入标准：病理诊断证实为宫颈癌，符合《宫颈癌诊断与治疗指南（第四版）》标准；均为原发性肿瘤；均接受血清miRNA-196a、CA125、CA19-9检测；病历及随访资料完整。排除标准：术前接受放疗、化疗等其他抗肿瘤治疗；合并其他妇科疾病；血液系统疾病；免疫系统疾病；超敏反应性疾病；凝血功能障碍；急性或慢性感染；精神疾患；重要器官严重器质性障碍；哺乳期或妊娠期妇女；存在其他原发恶性肿瘤；未完成随访。根据纳入、排除标准，共纳入180例宫颈癌患者（宫颈癌组），年龄35～64岁，平均（50.18±9.34）岁。选取三门峡市中心医院同期收治的50例宫颈良性肿瘤患者（良性组），年龄34～65岁，平均（51.36±8.97）岁；另选取三门峡市中心医院50例同期健康体检者（对照组），年龄33～66岁，平均（51.10±9.01）岁。3组研究对象年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 检测方法 3组研究对象均行空腹静脉采血3～5 ml，静置30 min，以3000 r/min（离心半径15 cm）离心10 min后收集血清，采用酶联免疫发光分析仪及配套试剂，以酶联免疫吸附法检测血清CA19-9、CA125水平。所有实验室检测严格依据说明书进行，室内质控数据均在控。采用Taq Man microRNA检测试剂盒检测血清miRNA-196a表达量，由第三方检测机构广东金域医学检验中心完成检测操作。

1.2.2 研究方法 依据《国际妇产科联盟子宫颈癌分期标准（2018年）》将宫颈癌患者进行临床分期Ⅰ～Ⅳ期，比较不同临床分期宫颈癌患者血清CA19-9、CA125及miRNA-196a水平；并比较宫颈癌组、良性组和对照组的血清CA19-9、CA125及miRNA-196a水平；采用受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线分析血清miRNA-196a、CA125、CA19-9单独及联合检测对宫颈癌的诊断效能，并比较曲线下面积（area under the curve，AUC）。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 不同临床分期宫颈癌患者血清miRNA-196a、CA125、CA19-9水平的比较

180例宫颈癌患者中，Ⅰ期51例，Ⅱ期68例，Ⅲ～Ⅳ期61例，不同临床分期宫颈癌患者血清miRNA-196a、CA125、CA19-9水平比较，差异均有统计学意义（P＜0.01）；Ⅲ～Ⅳ期宫颈癌患者血清miRNA-196a、CA125、CA19-9水平均高于Ⅱ期与Ⅰ期患者，Ⅱ期宫颈癌患者血清miRNA-196a、CA125、CA19-9水平均高于Ⅰ期患者，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（表1）

表1 不同临床分期宫颈癌患者血清miRNA-196a、CA125、CA19-9水平的比较（±s）

2.2 3组研究对象血清miRNA- 196a、CA125、CA19-9水平的比较

3组研究对象血清miRNA-196a、CA125、CA19-9水平比较，差异均有统计学意义（P＜0.01）；宫颈癌组患者血清 miRNA-196a、CA125、CA19-9水平均高于良性组和对照组，良性组患者血清miRNA-196a、CA125、CA19-9水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（表2）

表2 3组研究对象血清miRNA-196a、CA125、CA19-9水平的比较（±s）

2.3 血清miRNA-196a、CA125、CA19-9单独及联合诊断宫颈癌的价值

经 ROC 曲 线 可 知 ，miRNA-196a、CA125、CA19-9诊断宫颈癌的AUC分别为0.793、0.791、0.857，三者的诊断截断值分别为3.17、54.18 U/ml、23.72 U/ml，三者联合检测的AUC为0.950，大于三者单独诊断（P＜0.05）。（表3、图1）

表3 血清miRNA-196a、CA125、CA19-9单独及联合诊断宫颈癌的价值

图1 血清miRNA-196a、CA125、CA19-9单独及联合检测诊断宫颈癌的ROC曲线

3 讨论

宫颈癌是起源于子宫颈及宫颈管的恶性肿瘤，居女性生殖系统恶性肿瘤首位。既往流行病学调查显示，中国宫颈癌病死率居总肿瘤病死率的第四位，且患者发病年龄在各国报道中均存在差异，中国以中年妇女较为常见。由于宫颈癌早期无典型临床症状，极易出现漏诊或误诊，多数患者确诊时已属中晚期，因此早期有效、科学地诊断宫颈癌对于患者预后十分关键。人乳头瘤病毒筛查、液基薄层细胞学检查、阴道镜检查等方式被公认是宫颈癌早期筛查诊断的金标准，但随着临床检测技术的进步与发展，血清肿瘤标志物检测亦成为宫颈癌诊断、评估预后的重要辅助指标。

肿瘤标志物是由肿瘤细胞产生并分泌的一类生物活性物质，血清肿瘤标志物检测具有安全、无创、操作简便、重复性高等特点。CA125是糖蛋白性肿瘤相关性抗原，多在生殖系统肿瘤中明显表达，长期以来被作为卵巢癌的血清标志物。CA125是一种广谱肿瘤标志物，在子宫内膜癌、输卵管癌、肺癌等多种癌症中均存在水平显著升高，另有相关研究指出，CA125对宫颈癌具有较高的诊断及预后评估价值。CA19-9是一种类黏蛋白的糖蛋白成分，最初在胰腺癌患者的血清中被发现，随后多项临床研究证实，其在多种肿瘤患者的血清中均高表达。研究表明，宫颈癌患者血清CA19-9水平及阳性率明显升高，且宫颈鳞状细胞癌高于宫颈腺癌，其对宫颈腺癌的诊断、疗效评价及预后判断具有重要的指导价值。本研究比较不同临床分期宫颈癌患者血清CA125、CA19-9水平，结果显示，不同临床分期宫颈癌患者血清CA125、CA19-9水平存在差异，且CA125、CA19-9水平随着临床分期升高而升高，而临床分期能够决定宫颈癌患者的治疗疗效与预后情况，提示血清CA125、CA19-9对宫颈癌病情评估、预后判断具有一定价值。

血清肿瘤标志物的诊断结果并非完全可靠，尤其是对肿瘤的早期诊断，缺乏一定准确性及特异性，且不同肿瘤标志物诊断不同病理类型宫颈癌的灵敏度不同，仅通过肿瘤标志物进行诊断易造成误诊或漏诊。miRNA-196a分子具有肿瘤靶标的价值，在肿瘤发生、细胞分化、炎性反应、免疫应答等多个生理过程中均有参与，其异常表达对肿瘤的形成发挥促进作用。研究证实，miRNA-196a在宫颈癌组织中存在明显表达升高，推断其可能参与促进宫颈上皮癌变的过程，并能够调控促癌基因。本研究比较不同临床分期患者的miRNA-196a表达量，结果显示，临床分期越高，宫颈癌患者血清miRNA-196a表达量越高，提示检测miRNA-196a表达有助于评估宫颈癌患者病情进展，并以此为指导予以早期治疗，提高患者生存率，改善预后。

本研究探讨血清miRNA-196a、CA125、CA19-9三者联合诊断宫颈癌的临床价值，结果显示，宫颈癌组患者血清miRNA-196a、CA125、CA19-9水平均高于良性组和对照组，良性组患者血清miRNA-196a、CA125、CA19-9水平均高于对照组，提示血清miRNA-196a、CA125、CA19-9对宫颈癌的诊断具有一定辅助作用，而通过三者单独及联合检测的ROC曲线分析诊断效能，miRNA-196a、CA125、CA19-9单独检测诊断宫颈癌的AUC分别为0.793、0.791、0.857，三者联合检测的AUC为0.950，显著大于三者单独检测，且三者联合检测能够提高诊断灵敏度及特异度，对于宫颈癌具有较高的诊断效能，有助于宫颈癌的早期筛查，降低漏诊率。

综上所述，血清miRNA-196a联合CA125、CA19-9诊断宫颈癌具有较高的临床价值，能够显著提高诊断效能。