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罗汉果开发研究进展

2021-03-30蒋彩云冯鑫苇

江苏调味副食品 2021年1期
关键词:罗汉果黄酮超声波

蒋彩云,李 苗,冯鑫苇

(江苏经贸职业技术学院 a.健康学院;b.江苏省食品安全工程技术研究开发中心,江苏 南京 211168)

罗汉果,属于葫芦科,是能够多年生长的藤类植物,又被叫作拉汗果、金不换、假苦瓜、光果木鳖等,素有“神仙果”之称。罗汉果的形状有些像鸡蛋、有些像球,在生长的时候,颜色是绿色的,摘下晒干后呈褐色。罗汉果一般生长在凉爽、潮湿、多风的山区[1],广西壮族自治区桂林市是其主要产地。罗汉果是我国首批公布的药食两用材料之一,具有极高的药用价值和营养价值。

罗汉果有润肺止咳、美容养颜、健胃养生、润肠通便等功效,常被人们用来泡茶饮用,尤其适合健身、肥胖人群。现在市面上有很多罗汉果饮品,如:茶源银杏果茶,其成分除了水以外,就是白果、罗汉果及绿茶;即溶茶,由罗汉果粉、绿茶粉、杭菊粉组成固体粉末,使用时用热水冲泡即可;罗汉果蜜,其主要成分是罗汉果提取物。在生活中,罗汉果还经常被用来煲汤、炖肉。罗汉果不仅可以食用,还可以药用,如复方罗汉果清肺颗粒、罗汉果定喘片、罗汉果止咳胶囊、复方罗汉果含片等。

1 化学成分

1.1 三萜皂苷类

罗汉果中主要的活性物质是三萜皂苷类化合物,其中大部分可溶于水。将罗汉果放在水中摇一摇,会出现泡沫,和肥皂在水里的现象是一样的。目前,在罗汉果中已经发现了12种皂苷,其中罗汉果甜苷V是主要组成成分[2]。罗汉果甜苷V几乎没有热量,甜度是蔗糖的300倍左右。它的热稳定性很好,并且天然无公害,因此常被人们用作甜味剂。

1.2 黄酮类

黄酮类化合物是一类生物活性温和且多样的植物色素。绕荣等[3]利用分光光度法比较了罗汉果果实中的黄酮量和茎叶中的黄酮量,得出果实中的黄酮总含量为13.87 mg/g,茎叶中的黄酮总含量为345.11 mg/g。张妮等[4]采用溶剂提取、柱层析色谱分离法从罗汉果叶中提取了阿魏酸、4′-甲氧基二氢槲皮素、大黄素、芦荟大黄素。可见,罗汉果中含有丰富的黄酮类物质。

1.3 多糖类

多糖通常是由10个以上单糖分子组成的,常见的有淀粉、纤维素等。陈全斌等[5]使用溶剂提取的方法从罗汉果中分离出两个多糖组分,用高效液相色谱法测得它们的相对分子质量分别为430 000、650 000。李俊等[6]对这两个多糖组分进行研究分析,采用层析技术测得两组具体含有的单糖成分,结果发现,鼠李糖和葡萄糖酸醛是其共同含有的成分。

1.4 油脂类

罗汉果中含有丰富的油脂类化合物。根据研究,罗汉果中不饱和脂肪的含量比游离脂肪酸的含量高很多,其中角鲨烯的含量最高,为种子油含量的51.52%[7]。周欣欣[8]使用水煮法提取罗汉果果实中的挥发油,其含量为0.2%~0.3%。经鉴定,挥发油的组成成分有很多,其中,n-十六烷酸的含量最高。

1.5 氨基酸和蛋白质

蛋白质是生命的基础。罗汉果中蛋白质的含量约为10%。此外,罗汉果中还含有许多人体必需的氨基酸[9],其中,谷氨酸的含量最高。

1.6 无机盐类

无机盐是植物生长所必需的营养成分。罗汉果中含有铁、锰、硒、镁、碘、锡等26种无机元素。孟夏林等[10]使用原子吸收分光光度计和等离子光度计,测得罗汉果中含有丰富的人体必需的微量元素,其中硒含量很高,是粮食中硒含量的3倍左右。

1.7 其他成分

除了上述内容,丰富的维生素C、维生素E以及D-甘露醇等都是罗汉果所含有的活性成分。徐位坤等[11]采用红外光谱、薄层层析等方法,从罗汉果中分离提取出了D-甘露醇,其颜色呈白色,味道比蔗糖甜一些。

2 药理作用

2.1 止咳祛痰、润肠通便

中医学很早就使用罗汉果作为止咳祛痰、润肠通便的药物。王勤等[12]采用对照的方法给小鼠和大鼠做实验,发现罗汉果水提取物可以使小鼠气管的酚红排出量和大鼠气管排出痰量都有所增加,小鼠的咳嗽次数明显下降,说明罗汉果对咳嗽有抑制作用。另外发现正常和便秘小鼠的排便量增加,且粪便含水量增加。陈瑶等[13]建立小鼠便秘模型,使用墨汁灌肠,结果显示,罗汉果甜苷可以减少便秘小鼠第一次排便的时间,且粪便量增加,这说明罗汉果具有润肠通便的作用。

2.2 活血化瘀

陈全斌等[14]采用静脉注射的方法来观察小鼠的脑血栓、凝血时间以及血小板等方面是否受罗汉果黄酮的影响。研究发现,罗汉果黄酮对小鼠脑血栓有40%的恢复率,对大鼠血小板聚集有22%左右的抑制率,并且能够延长小鼠的血凝固时间,这说明罗汉果黄酮具有良好的活血化瘀作用。

2.3 抗氧化损伤

长时间的疲劳锻炼会导致身体的抗氧化能力下降。姚绩伟等[15]采用对照法得出,灌服罗汉果提取液的小鼠游泳力气用尽的时间和对照组小鼠相比,会有所延迟。研究发现,罗汉果提取物可以让血红蛋白在运动时减缓下降,并且在运动后,能够促进血红蛋白的合成。同时,能使血乳酸降低或消失,增强机体抗氧化能力,从而有效控制机体脂质的过氧化。张俐勤等[16]证实了罗汉果提取物MGC、MGI、MGII可以有效清除自由基,清除率分别达51.05%、48.14%、43.62%,并且可以减少红细胞溶血现象。

2.4 保护肝脏

肝脏是人体的重要器官。肖刚等[17]建造肝损伤模型,研究罗汉果甜苷对由四氯化碳引发的小鼠急性肝损伤的作用,结果显示,罗汉果甜苷组比模型组的小鼠肝损伤要轻很多,而且甜苷的含量越高,效果越明显,表明罗汉果甜苷对减轻肝组织病理变化有很好的效果。同时,他们还对由四氯化碳所致大鼠慢性肝损伤做了研究,结果表明,罗汉果甜苷可以显著减轻肝损伤,有效缓解肝纤维化。

2.5 抗衰老

衰老是所有生命体必然经历的一个过程,机体的衰老程度可以通过丙二醛的含量来反映,提高体内的超氧化物歧化酶(SOD)水平对延缓衰老、延年益寿具有重要意义。肖刚等[18]采用D-半乳糖衰老模型证实了罗汉果甜苷使得小鼠脑组织和血清中SOD的含量明显增加,且丙二醛含量有所下降。果蝇的寿命实验结果显示,罗汉果甜苷可以推迟大多数果蝇的死亡时间,并且延长它们的寿命。这些都显示了罗汉果对衰老有一定的抑制作用。

2.6 抗糖尿病

糖尿病是一种常见疾病,并且越来越年轻化,但目前没有根治的办法,只能抑制。罗汉果中的三萜皂苷类化合物具有降糖作用,它可以通过四种途径[19]进行调解: 第一种是对胰腺β细胞进行损伤修复;第二种是使胰岛素分泌量增多;第三种是激活腺苷酸活化蛋白激酶抑制糖异生途径,达到控制血糖的目的;第四种是对体内糖苷酶活性进行抑制。徐庆等[20]给志愿者服用罗汉果甜苷,研究其对血糖正常的人是否有影响,结果表明无影响。

2.7 调节血脂紊乱

血脂紊乱是诱发心血管疾病的危害因素之一。血脂紊乱有一个重要特征就是高密度脂蛋白降低。调脂治疗是预防和治疗心血管疾病的重要方法,通过调节血脂紊乱可以抑制动脉粥样硬化。张建义等[21]通过建立动物模型研究罗汉果对大鼠胆固醇、脂蛋白等的影响,结果显示,罗汉果可以使高密度脂蛋白升高,具有调节血脂紊乱的作用。

此外,罗汉果还有很多其他的药理作用,如抗癌、抗炎、增强免疫等。

3 有效成分的提取技术

传统的罗汉果有效成分提取方法一般是煮沸或者乙醇浸泡,但是这些方法在操作过程中容易导致有效成分损失,提取效果并不好。近年来,随着科技的进步,新的提取技术不断涌现,对于保留罗汉果的有效成分提供了很大帮助。

3.1 三萜皂苷类

3.1.1 煎煮法

煎煮法是历史悠久的传统方法,将该方法和膜分离技术一起使用,能够达到很好的提取效果。近几年,膜分离技术广泛应用于很多领域,如食品药品、环境保护、生物、冶金、化工等。该方法主要是通过半透膜实现分离,不需要添加化学试剂,并且不需要改变温度,在常温下就可以进行,适用性非常好,操作比较简单,耗费能量少,适合工业化生产。

范耀荣[22]使用煎煮法和膜分离技术相结合的方法提取罗汉果甜苷,提取率达86%,其成品符合企业标准。该方法的分离提取浓缩可以直接完成,操作简便,污染少且效率高,但膜使用时间长,易损坏。蒋明廉[23]采用水提法,用超滤膜进行分离,结果表明,罗汉果甜苷的提取量达到了国际要求,且含量稳定,颜色均匀。

3.1.2 溶剂提取

溶剂提取是一种传统方法,比较经济、安全。陈敏等[24]对此方法提取罗汉果甜苷进行了优化,得出在料液比1∶15、浸泡30 min、全程共提取3次、每次60 min的条件下,罗汉果甜苷的提取效果最佳,提取率达5.57%。

溶剂提取法的效果比较稳定,但耗时较长,提取步骤较复杂,容易受到各种条件的制约。

3.1.3 微波提取技术

微波技术可以对物质的不同成分有选择地进行加热,使想要的成分直接分离出来,热损失很少,能量利用率高,操作简便,且在生产过程中不会有噪音。因此,很多领域都采用微波技术,尤其是天然药物的提取。

朱晓韵等[25]对影响罗汉果甜苷提取效果的因素进行了分析,得出微波技术提取罗汉果甜苷的最佳方法:放入八倍的水,在微波输出功率为750 W、提取时间为15 min的条件下进行提取,最终得到7.3 mg/g的甜苷。微波技术的提取效率高于传统水煮法,但由于设备原因,不适合大规模生产,目前只能应用于实验室内。

3.1.4 超声波提取技术

超声波技术广泛应用于很多领域,在医药领域也有很多的应用,尤其是物质的分离提取方面。超声波技术提取时间较短,不需要很高的温度,适用于提取不耐热的中草药成分,有着很好的应用前景。

李军生等[26]用超声波技术提取罗汉果甜苷,并与浸提法进行了比较,结果表明,超声波技术提取效果良好,甜苷提取率比浸提法要高很多,并且高频率超声波作用效果要好于低频率超声波。实验还发现,罗汉果粉末的粗细程度也影响着罗汉果甜苷的提取率,粉末越细,提取率就会越高。但超声波提取技术和微波提取技术存在一样的问题,即不适合大规模生产。

3.1.5 闪式提取法

闪提法是一种新型提取方法,它可以在常温下快速使植物的各个部分破碎,并让活性成分在组织内外平衡,然后过滤提取。这种方法可以很好地保留物质中的有效成分,提取时间在30 s左右,非常快速,且刀片耐磨、不易破损,适用范围非常广泛。

刘兆等[27]采用闪提技术提取罗汉果甜苷,提取率达10.057%。与微波和超声波技术相比较,闪提技术具有效率高、能耗少、速度快及操作简单等优点,适合大规模生产。杨晔等[28]采用闪式提取法提取罗汉果甜苷,提取率为8.77%,纯度达92%以上,效率非常高。闪提技术在天然物质的开发方面具有很好的应用前景。

3.2 黄酮类

3.2.1 酶解法

酶解法是提取中药成分的一种有效方法,它的反应条件十分温和,活性成分不容易改变,有着很高的提取效率,并且不易污染,有利于环境保护。王邕等[29]采用酶解法和溶剂提取相结合的方法提取罗汉果中的黄酮,提取率达6.921%,并且该方法污染少。

3.2.2 溶剂提取

黄酮类物质的提取同样可以使用溶剂提取法,而且可以和微波、超声波等技术结合起来使用,效果也非常好。秦满发等[30]以水-乙醇为提取溶剂,辅以微波技术,得到罗汉果黄酮的量为1.72%。容元平等[31]使用溶剂提取罗汉果中的总黄酮,辅以超声波技术,使得提取率有了很大的提升,且二次逆流提取率比一次提取率高。杨洋等[32]采用乙醇提取罗汉果黄酮,辅以薄层层析法提纯,加入15倍的乙醇,在温度70 ℃条件下提取2 h,得到0.583%的黄酮。

3.3 多糖类

3.3.1 超声波提取技术

超声波技术在多糖的提取上得到了很好的应用。李俊等[33]以超声波技术提取罗汉果多糖,提取效果很好,提取条件:罗汉果与水为1∶30,温度为50 ℃,进行3次提取。该方法与传统的热水法相比,大大缩短了时间,多糖含量高10.6%,并且在提取过程中不需要很高的温度,多糖结构不会因高温而水解,从而保证了多糖的质量。

3.3.2 酶解法

多糖类物质的提取同样可以采用酶解法。李洪燕等[34]在酶解温度50 ℃、酶活性500 U/g、pH 6.0、酶解时间55 min的条件下提取罗汉果多糖,提取率达6.82%,比传统热水法的提取率增加了10%~22%。

3.4 其他类

苏小建等[35]采用超滤膜提取罗汉果蛋白酶,结果表明,其酶活与蛋白质主要分布在相对分子量为10万以上和1万~5万,分别占各自总量的59.2%和65.55%,具有很好的利用价值。刘灿等[36]使用闪提技术提取罗汉果多酚,使用响应面分析法确定提取条件,多酚提取率为2.73%。

4 结论与展望

本文介绍了罗汉果的化学成分、药理作用及其有效成分的提取分离技术。目前,对罗汉果的开发研究存在以下问题:一是对药理作用研究较多,对临床应用研究较少;二是对果实的研究很多,对茎、叶、根等部分的研究较少;三是对罗汉果甜苷、黄酮、多糖等成分的研究较多,对其他活性物质的研究较少;四是对罗汉果甜苷、黄酮、多糖的提取研究较多,对其他成分的提取研究较少,并且很多技术只是在实验室中使用,不适合大规模应用。上述问题都是未来的研究方向。

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