几种常见动物疫病的化验室诊断

李月华

（山东省乐陵市农业农村局，山东 乐陵 253600）

随着动物检疫工作的不断创新以及完善，在动物疫病防控管理中的成效也在不断提升，仅仅依靠传统患病动物外貌观察的检验方式，已经难以符合当前的动物疫病检验检测要求，需要通过病理实验室检测工作的开展，进一步强化检疫工作的质量，为了能够符合各地区检疫工作的要求，需要不断提升检验检测速度，提高检验准确率，加快检验报告获取速度。

1 黄疸、黄脂肉的诊断

黄疸以及黄脂肉的诊断方式相同，可以同时进行，明确检测之后对脂肪样本采集并剪碎放置试管内，加入5mL5%的氢氧化钠溶液进行适当震荡后煮沸1min，使用流水对试管进行冷却，加入5mL乙醚以及胆汁色素，放入试管内进行进一步的震荡，放置在常温环境下进行静置，待溶液稳定后观察上层的乙醚中是否有胡萝卜素融入，如其颜色转变为黄色，则可判定存在黄脂肉疾病，氢氧化钠颜色变为黄色则可判定存在黄疸，如上下层颜色均变为黄色，即可判定黄疸、黄脂肉合并存在。

2 羊丹毒的诊断

羊丹毒类型不同，在检测时的样本选择方面也存在差别，败血型羊丹毒诊断中的应用主要采集患病动物的心血或者肝肾组织进行检验检测，如果被检测患病动物的病症表现偏向于疹块型羊丹毒病症，需要在病变部位的周边皮肤组织内进行检测样本的采集，如果患病动物表现偏向于慢性型羊丹毒病症，在样本选择时需要采集其肿胀部位组织。

2.1 涂片镜检革兰氏染色、吉姆萨染色法或瑞氏染色法均是羊丹毒病症诊断中较为常用的染色方法，主要通过显微镜观察病变菌种的表现并进行分析，主要观察指标为小杆菌的分布状态、分布数量，尤其需重视白细胞周围菌体的检测需要重点区分，以此来提升诊断质量，强化诊断价值，脾肾抹片检测菌体检测应用中的准确性更高，更为推荐选择。

2.2 分离培养的方法如果检测所用检测样本为新鲜的病理材料，培养基接种条件要求温度为37℃，培养持续1～2d便能够观察培养基上出现菌落生长，菌落的颜色大多为透明状，形状与露珠较为类似，此类菌落的生长长势较弱，且肉汤颜色为轻度混浊样表现，有轻微的白色沉淀物，出现凝胶的状态不会有明显变化，较不容易出现液化症状。

2.3 对动物的接种按照疹块10倍的比例加入生理盐水进行组织悬液的制作，也可通过鸽子或小白鼠进行肉汤培养物的制作，如为鸽子需要注射0.5～1mL组织悬液，如为小白鼠则需注射0.2mL组织悬液，之后方可取出0.5mL及0.1mL的菌液，向鸽子和小白鼠体内继续注射，如鸽子或小白鼠在接种后3～4h出现死亡则可制作涂片，将死亡鸽子或小白鼠的心血以及肾脏器官作为主要材料制作涂片以及镜检，观察是否存在羊丹毒杆菌。

3 羊瘟的诊断

3.1 监测样品的采集以及切片的制作羊瘟诊断样本采集大多选择濒临死亡或已经死亡的新鲜羊肾脏以及扁桃体组织，采集后的样本需要进行灭菌处理，常用的检测方式主要为荧光抗体方式。在切片制作时需选择濒临死亡或已经死亡羊的新鲜肾脏组织块以及扁桃体组织进行冰冻切片，后放置在载玻片上，自然干燥后加入纯丙酮内进行进一步的处理，本环节要求时间为15min，计时结束后将其取出清洗自然干燥。

3.2 染色方法在已经处理好的组织切片上滴入2～3滴荧光标记处理后的羊瘟抗体，放置在37℃的环境下静置30min，以保证荧光抗体的吸收质量，在染色过程中要求防止染色液干涸，染色后用PBS液对组织切片进行3次浸泡以及冲洗，每次浸泡时间为2min，取出后在室温下放至半干进行镜检。

3.3 结果判定对羊瘟检测的结果判定需要使用荧光显微镜进行切片的观察，如果切片存在上皮细胞胞浆，颜色为翠绿色，能够明显观察到荧光状态表现，组织细胞形态清晰为阳性，反之则为阴性。

4 结语

动物疫病的出现对养殖业经济效益产生的影响是不容忽视的，甚至会威胁到动物肉、蛋、奶产品的品质，影响到消费者的食品安全水平，既不利于人们的日常饮食质量保证，也会影响到社会环境的稳定性。因此，需要加强对动物疫病化验室诊断工作的重视，根据各类动物疫病类型细化诊断方案，提升诊断质量，保障动物疫病控制以及畜牧养殖产业的健康发展。