血清MMP-9 和BDNF 在急性脑梗死患者中的表达水平变化及预后临床研究

李又佳 韩小妍 黄 燕 罗宋宝 黄根林 黄惠琴 陈 莹 吴振梅

广东省肇庆市第一人民医院神经内科，广东肇庆 526000

急性脑梗死（acute cerebral infarction，ACI）是神经科常见疾病，具有高致残率和高致死率，中国脑梗死的发病率为每年246.8/10 万人，死亡率为每年114.8/10 万人[1]。尽早对ACI 患者进行客观有效的预后风险评估和预测在临床工作中有重要意义。目前相关研究多集中于入院时炎症因子和影像学表现[2-5]，动态指标变化的研究较少，有必要进一步开展研究。

基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）激活时参与降解形成血脑屏障（blood brain barrier，BBB）基膜的主要成分，与ACI 出现脑水肿密切相关[6]。脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）对神经元发育分化和神经生长再生起维持促进作用，与损伤后神经恢复相关[7-8]。本研究发现MMP-9 和BDNF 水平变化与患者预后相关。现报道如下：

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2019 年1 月—6 月在广东省肇庆市第一人民医院（以下简称“我院”）就诊，确诊为ACI 并完成3 个月随访的患者42 例为研究组，同期体检健康人群40 名为对照组。本研究为前瞻性研究，经我院医学伦理委员会批准，所有参与研究的患者均签署知情同意书。

研究组纳入标准：①符合《各类脑血管病疾病诊断要点》诊断标准[9]，且经头颅计算机断层扫描术（CT）或核磁共振（MRI）证实；②初次发病；③24 h 内入院治疗。排除标准：患肿瘤、严重感染、自身免疫性疾病、严重肝肾功能不全。

对照组为无心脑血管相关重大疾病，且无脑梗病史的健康人群。

研究组42 例，男22 例，女20 例；平均年龄（56.8±10.2）岁。对照组40 例，男20 例，女20 例；平均年龄（57.2±11.4）岁。两组性别、年龄比较，差异无统计学意义（P ＞0.05），具有可比性。

按改良Rankin（mRS）量表[10]评分将研究组分为预后良好组24 例，预后不良组18 例。

1.2 方法

研究组行药物治疗，入院后根据患者发病时间给予尿激酶（丽珠集团丽珠制药厂，批号：190502）或重组人组织型纤溶酶原激活剂（德国勃林格殷格翰公司，批号：708765）治疗，口服阿司匹林或氯吡格雷预防血栓，他汀类药物稳定斑块。并结合患者情况给予降压、降糖等治疗和生活指导。

研究组所有研究对象均于入院第1 天（T1）以及入院第2 天（T2）、第5 天（T5）分别抽取晨起空腹静脉血3 mL。对照组体检时抽取空腹静脉血3 mL。抽取血液静置30 min 后，3000 r/min 离心10 min，离心半径13 cm，取上清200 μL 分装，-80℃冰箱冻存。

嘱患者出院后1 周、1 个月、3 个月门诊随访病情，不适随时复诊，未及时门诊随访者电话随访。在第3 个月随访时行mRS 量表[10]进行评分。

1.3 检测指标

取冻存血清，使用人MMP-9 酶活试剂盒（上海酶联生物科技有限公司，批号：ML058617M）和人BDNF酶活试剂盒（武汉菲恩生物科技有限公司，批号：EH0043），采用酶联免疫吸附测定法，按说明书进行操作，酶标仪在450 nm 波长下测定吸光度，计算MMP-9 和BDNF 浓度。

mRS 量表判读标注[10]：判断ACI 患者的神经功能恢复情况属于哪个级别，则记录为该级别。需注意：仅考虑疾病发生后的情况；如果患者可自行借助辅助装置行走，视为独立行走；如果两个级别对患者同样适用，按指导意见无法区分，以较为严重的为准。0～2 级为预后良好，≥3 级为预后不良。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0 对所得数据进行统计学分析，计量资料采用均数±标准差（）表示，组间比较采用t检验，计数资料采用百分率表示，组间比较采用χ2检验或Fisher 确切概率法，对预后良好组与预后不良组不同时间点数据采用重复测量方差分析。以P ＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 研究组T1 时间点与对照组体检时的血清MMP-9和BDNF 水平比较

在T1时间点，研究组血清MMP-9 和BDNF 水平均高于对照组，差异均有统计学意义（均P ＜0.05）。见表1。

表1 研究组T1 时间点与对照组体检时血清MMP-9和BDNF 水平比较（ng/mL，）

表1 研究组T1 时间点与对照组体检时血清MMP-9和BDNF 水平比较（ng/mL，）

注：MMP-9：基质金属蛋白酶-9；BDNF：脑源性神经营养因子

2.2 预后良好组与预后不良组不同时间点的血清MMP-9 和BDNF 水平比较

整体比较：两组MMP-9 水平组间和交互作用比较，差异均有统计学意义（均P ＜0.05），时间点比较，差异无统计学意义（P ＞0.05）。进一步分析，T5时间点，预后不良组MMP-9 水平高于预后良好组，差异有统计学意义（P ＜0.05）。

整体比较：两组BDNF 水平时间点和交互作用比较，差异均有统计学意义（均P ＜0.05），组间比较差异无统计学意义（P ＞0.05）。进一步分析，预后良好组T2时间点BDNF 水平高于T1时间点BDNF 水平，T5时间点BDNF 水平高于T2时间点BDNF 水平，差异均有统计学意义（均P ＜0.05）；预后不良组T2时间点和T5时间点BDNF 水平均低于T1时间点BDNF 水平，差异均有统计学意义（均P ＜0.05）。见表2。

3 讨论

ACI 是因供血不足导致的大脑组织缺血性坏死，常见于中老年，致死率和致残率较高。尽早对ACI 患者进行客观有效的预后风险预测，以采取相应的处理措施，在临床上有重要意义。此前临床ACI 患者预后主要是通过对患者相关信息进行量化，如美国国立卫生研究院卒中量表，洛桑卒中量表等[11-12]，再结合炎症因子、凝血功能指标、影像学等指标进行综合化分析[13-14]。但是这些方法存在一定问题，量表主观影响较大，预测价值并不理想[15]，实验室指标随病情变化和治疗动态波动[16-18]。目前对于ACI 患者预后指标的动态变化研究还较为缺乏，本研究选择了MMP-9 和BDNF 这两个指标开展相关研究。

表2 预后良好组与预后不良组不同时间点的血清MMP-9 和BDNF 水平比较（ng/mL，）

表2 预后良好组与预后不良组不同时间点的血清MMP-9 和BDNF 水平比较（ng/mL，）

注：与本组T1 时间点比较，*P ＜0.05；与本组T2 时间点比较，#P ＜0.05；与预后良好组比较，ΔP ＜0.05。MMP-9：基质金属蛋白酶-9；BDNF：脑源性神经营养因子

MMP-9 是基质金属蛋白酶家族主要成员，MMP-9激活会导致细胞外基质降解，BBB 通透性升高，从而导致脑水肿等病理状态[19]。多项研究表明MMP-9 水平与脑微循环受损程度相关，其水平升高提示ACI 患者预后差[20-21]。本研究发现MMP-9 水平变化与预后相关，T5时间点，预后不良组MMP-9 水平高于预后良好组，差异有统计学意义（P ＜0.05）。

BDNF 是神经营养因子家族的重要成员之一，与ACI 密切相关[8,22]。既往研究认为患者BDNF 会代偿性增高，其增高对缺血后神经损伤有保护性作用[23]，BDNF 水平低提示患者预后差[24]。本研究显示，BDNF水平变化与预后密切相关，预后良好组T2时间点BDNF水平高于T1时间点，T5时间点BDNF 水平高于T2时间点，差异均有统计学意义（均P ＜0.05），预后不良组入院的BDNF 水平较高，之后，预后不良组T2时间点和T5时间点BDNF 水平均低于T1时间点，差异均有统计学意义（均P ＜0.05），总体与既往研究相符[23-24]。关于入院BDNF 水平，本研究认为疾病最初期BDNF水平上升是机体对缺血性损伤的内源性代偿，其高水平提示初始缺血性损伤严重。

综上所述，MMP-9 和BDNF 水平的变化与ACI预后密切相关，在发病最初期，BDNF 水平高提示预后可能不佳，在治疗数日后，MMP-9 水平高，BDNF 降低提示预后不佳，对早期预测ACI 预后具有一定的临床应用价值。