清道夫受体CD36基因缺陷对正常高值血压患者血压昼夜节律及代谢性指标的影响

冯琼 郭宏伟 张爱军

清道夫受体CD36是一种多功能跨膜糖蛋白，具有多种配体，在氧化应激条件下能够促进血栓形成，导致糖脂代谢紊乱，增加冠状动脉疾病、代谢综合征、2型糖尿病的风险[1-2]。通过对心脑血管疾病的病理生理学研究表明，CD36基因缺陷可能与代谢综合征的表型表达有关，后者常与动脉粥样硬化性心脑血管疾病有关，提示CD36缺乏可能是危及生命的心脑血管疾病的重要遗传背景[3]。正常高值血压是正常血压发展为高血压的过渡阶段，而正常高值血压患者血压昼夜节律的改变与靶器官损害有一定关系，并较已确诊高血压阶段存在更多的心脑血管疾病危险因素[4]。因此，我们对二者之间的关联展开研究，并探讨CD36基因缺陷对正常高值血压患者的血压昼夜节律及代谢性指标是否产生影响。

对象与方法

1.对象：2018年10月～2019年2月于我院心内科门诊就诊的200例初诊正常高值血压患者，正常高值血压参照《2010年中国高血压防治指南》定义[5-6]:即收缩压120～139 mmHg和(或)舒张压80～89 mmHg。其中男122例，女78例，年龄32～78岁，平均年龄(44.98±9.06)岁。排除标准：(1)糖尿病、结缔组织病、急慢性肾脏疾病、恶性肿瘤、慢性阻塞性肺疾病及因动脉粥样硬化性心脑血管疾病住院；(2)女性妊娠期和月经期；(3)最近1个月内有感染病史。所有受试者均未接受过任何降压、调脂及抗血小板聚集药物治疗。本研究经过我院医学伦理委员会审核批准，所有患者均自愿参加该研究并签署书面知情同意书。

2.方法

(1)分组：抽取所有患者清晨空腹外周血5 ml，采用全血基因组DNA试剂盒(北京原平皓生物技术有限公司)提取基因组DNA。将提取的外周血进行聚合酶链反应(PCR)检测，以鉴定CD36基因缺陷，PCR合成条件为：20 μl反应体系扩增分3步进行：94 ℃ 4 min；94 ℃ 30 s，60 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，共35个循环；72 ℃ 10 min，引物及探针设计按照亚洲人常见的缺陷类型及部位进行(表1)。所选择的突变位点是亚洲人群中导致CD36表达缺失的常见位点[7]。将10 μl PCR产物在2%琼脂糖凝胶中进行电泳，电泳图中出现缺失的条带则为CD36有缺陷。共筛选出CD36基因缺陷的正常高值血压患者31例作为观察组，检出率为15.5%，并纳入同期确诊的CD36基因正常的正常高值血压169例患者作为对照组。

表1 CD36引物及探针信息

(2)动态血压监测：采用日本TM2430型无创携带式动态血压监测仪对所有患者进行24 h动态血压监测，袖带均缚于左上臂，设置白天时间为上午6时～下午10时，每隔20 min自动充气测量1次，设置夜间时间为下午10时～次日上午6时，每隔30 min自动充气测量1次。受试者日常活动不受限制，计算机自动记录每次血压数值，记录时间≥22 h，监测成功率≥85%有效。观察指标包括24 h平均收缩压(24h SBP)、24 h平均舒张压(24h DBP)、昼间平均收缩压(dSBP)、昼间平均舒张压(dDBP) ，夜间平均收缩压(nSBP)、夜间平均舒张压(nDBP)、24 h平均动脉压(24h MAP)。血压昼夜节律=(白昼均值-夜间均值)/白昼均值,血压昼夜节律≥10%为杓型,<10%为非杓型。

(3)实验室检查：所有患者均抽取清晨空腹肘静脉血5 ml行血生化和空腹胰岛素检查。生化指标检测采用日本东芝全自动生化检测仪测定。空腹胰岛素采用放射免疫法测定。采用HOMA法计算的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)=[空腹血糖(FPG，mmol/L)×空腹胰岛素(mIU/L)]/22.5[8]。

(4)各测量指标的诊断标准：肥胖诊断标准：BMI≥28 kg/m2[9]。血脂异常诊断标准：高胆固醇血症：总胆固醇(TC)≥5.18 mmol/L或低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)≥3.37 mmol/L；高甘油三酯(TG)血症：TG≥1.70 mmol/L[10]。血糖异常诊断标准：FPG调节受损：FPG为6.1～7.0 mmol/L。胰岛素抵抗：HOMA-IR>2.68[11]。取入组患者24 h动态血压各项计量指标的上四分位值，在此区间者视为升高。正常动态血压节律为杓型，非杓型即为动态血压节律改变。

结 果

1.两组患者一般资料比较：两组患者性别、年龄、职业、文化程度等一般资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)，见表2。

2.两组患者动态血压监测结果比较：观察组24h MAP和非杓型血压患者比例均高于对照组(P<0.05)，而两组患者动态血压监测中的其余指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。见表3。

3.两组患者代谢性指标比较：观察组患者TG水平、BMI、HOMA-IR均高于对照组(P<0.05)，而两组患者TC、HDL-C、LDL-C及FPG水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。见表4。

4.CD36基因缺陷与血压昼夜节律及代谢性指标的相关性分析：以CD36基因缺陷为因变量，以单因素比较中差异有统计学意义的指标为自变量进行logistic多元逐步回归分析，结果显示，CD36基因缺陷与正常高值血压患者动态血压节律改变、24h MAP升高、肥胖、高TG血症、胰岛素抵抗具有相关性(P<0.05)。见表5。

表5 CD36基因缺陷与血压昼夜节律及代谢性指标的相关性分析

讨 论

正常高值血压是介于正常血压与需降压药物治疗的高血压之间的临界血压。研究发现在正常高值血压阶段即已存在动脉弹性功能损害和靶器官损害[12]。正常人的血压昼夜节律呈“双峰一谷”的长柄杓型，杓型血压对于适应机体活动、保护心脑血管等靶器官的正常结构与功能发挥了重要作用，而非杓型血压患者由于紊乱的血压昼夜节律使心血管系统较长时间处于高负荷状态,导致内皮细胞功能受损，进而促进动脉粥样硬化形成，因此其靶器官的损伤和心血管事件的风险都远高于杓型高血压患者[13]。张省亮等[14]发现在老年正常高值血压人群中,血压节律性改变与早期肾脏损害、颈动脉粥样硬化及左心室肥厚等密切相关，进一步证实了在血压正常高值阶段就已经存在靶器官损伤,并与血压的昼夜节律改变密切相关。胡明昕等[15]研究发现正常高值血压水平人群已经开始出现代谢异常，且已有较明显的动脉早期亚临床损害表现，提示正常高值血压与血脂、血糖等代谢性指标互相联系、互相影响，共同导致血管内皮损害、血管弹性改变等病理性损伤，促进动脉粥样硬化进展，加快高血压靶器官损伤，增加心脑血管疾病的发病率、致死率及致残率[16]。

CD36是一种88 kDa的完整膜蛋白，在血小板、单核巨噬细胞、微血管内皮细胞、脂肪组织、骨骼肌和心肌等脂肪酸代谢活跃的组织中表达，在肠道中也有表达，它具有多种配体，在介导细胞内信号传递和摄取长链脂肪酸等生物活性物质方面起重要作用。CD36与配体结合参与机体多种生理病理过程，主要包括脂质代谢、动脉粥样硬化、固有免疫、炎性反应等。遗传性CD36基因缺失在亚洲和非洲人群中很常见，并作为一种常染色体显性性状传播。国外一些研究发现CD36是巨噬细胞氧化低密度脂蛋白的主要受体之一，CD36缺陷的巨噬细胞与氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)的结合减少了50%，CD36是长链脂肪酸(LCFA)的转运体，CD36基因缺陷可致LCFA的代谢发生改变，CD36脂肪酸转运体(FAT)的小鼠同系物可能与胰岛素抵抗有关，而Miyaoka等[17]进一步研究也发现人类CD36基因缺陷与胰岛素抵抗有关。Drover等[18]通过检测野生型(WT)小鼠和CD36缺陷小鼠对急性和慢性脂肪喂养的脂肪酸(FAs)利用及脂蛋白分泌的影响，发现CD36对肠道脂蛋白的分泌和清除均较重要，CD36基因缺陷会导致餐后和禁食状态下的高TG血症，也可能是饮食导致2型糖尿病和心血管疾病的危险因素。Yamashita等[19]也发现CD36基因缺陷患者多数伴有轻度高血压、高脂血症(以高TG血症为主)及残余脂蛋白增多、基于胰岛素抵抗的葡萄糖代谢受损，是代谢综合征的遗传背景之一；此外，CD36基因缺陷人群冠心病的发生率提高。也有研究发现CD36基因缺陷可导致血糖、血脂调节障碍，并在脑梗死的发病进程中发挥重要作用[20]。

表2 两组患者一般资料比较[例，(%)]

表3 两组患者动态血压监测结果比较

表4 两组患者代谢性指标比较

正常高值血压与急性心脑血管事件的发生率呈连续性正相关，而清道夫受体CD36参与了机体多种生理病理过程，尤其是动脉粥样硬化及糖脂代谢等，因此，我们有必要探讨CD36基因缺陷对正常高值血压患者血压节律改变及代谢性指标的影响，发现其潜在的危害因素及提示因素。本研究在200例初诊正常高值血压患者中发现CD36基因缺陷发生率达15.5%，远高于国内正常人群的发生率。且观察组24h MAP、非杓型血压患者比例、TG水平、HOMA-IR均高于对照组，表明清道夫受体CD36基因缺陷可能影响正常高值血压患者的发病或疾病进程。进一步的logistic多元逐步回归分析结果显示，CD36基因缺陷与正常高值血压患者24 h动态血压节律改变、24h MAP升高、高TG血症、肥胖及胰岛素抵抗具有相关性，表明CD36基因缺陷可能对正常高值血压患者的血压昼夜节律、MAP及部分代谢性指标产生影响，进一步证实了正常高值血压可能与血脂、血糖等代谢性指标互相影响，从而促进高血压发病或加快心脑血管疾病进程。

综上所述，本研究初步发现了清道夫受体CD36基因缺陷与正常高值血压之间的内在联系，即正常高值血压患者中清道夫受体CD36基因缺陷可能导致代谢性障碍(主要表现为TG升高、胰岛素抵抗、肥胖)，并影响血压的昼夜节律变化，从而促进动脉粥样硬化的发生和发展，导致靶器官的损害。因此，我们推测清道夫受体CD36基因缺陷可能会对患者的血压和代谢产生一定影响，进而加速疾病的进展，故CD36基因缺陷可作为一个潜在的观察或作用靶点而用于正常高值血压的早期预防，尽早干预血管壁病变，对延缓和减少心脑血管事件的发生具有重要临床意义。CD36基因缺陷对正常高值血压患者靶器官损害、动脉粥样硬化及代谢综合征的影响及三者之间的相互关系值得进一步更加深入的研究，后续有待对两组患者展开随访并比较。本研究为高血压的早期防控提供了新思路和新方法，但由于受地域、样本量小等因素的限制，加上本研究未对清道夫受体CD36基因缺陷类型进行细分，所以系统性误差在所难免，有待后续进一步的研究加以纠正。