石仙桃化学成分及其抗菌抗炎活性研究

袁佳，张苑雯，遆慧慧，2，3，王淑美

（1.广东药科大学临床药学院，广东广州 510006;2.国家中医药管理局中药数字化质量评价技术重点研究室，广东 广州 510006;3.广东省中药质量工程技术研究中心，广东广州 510006;4.广东药科大学中药学院，广东广州 510006）

石仙桃（Pholidota chinensisLindl.）为兰科（Orchidaceae）石仙桃属植物，又名石橄榄、石上仙桃、石莲等。以假鳞茎或全草入药，是一种重要的中药材，最早记载于清代医药学家何谏撰写的《生草药性备要》[1]。石仙桃味甘、微苦，性凉，归肺、肾经，具有养阴、清肺、利湿、消瘀和清热解毒等功效，临床用于肺热咳嗽、肺结核咳血、淋巴结结核、小儿疳积、胃十二指肠溃疡等[2]。研究发现，石仙桃的水提液具有镇痛、耐缺氧以及抑制中枢神经系统作用[3]。

石仙桃属植物在全世界约有30种，分布于亚洲东南部至澳大利亚和太平洋一些岛屿，我国有14种，包括石仙桃、节茎石仙桃和细叶石仙桃等，主要分布于福建、广东、广西、云南等地[4]。石仙桃属植物化学成分丰富，主要有菲、联苄、二苯乙烯、三萜、木脂素、甾体和酚酸等类型化合物[5]。其中，菲类化合物是石仙桃属的主要化合物，已从中鉴定出64个，包括简单的菲类，9，10‑二氢菲，9,10‑二氢菲二聚体和菲类其他衍生物。此类化合物具有广泛的药理学活性，如抗炎、抗肿瘤、抗氧化等[6]。目前，针对石仙桃全草的研究发现其主要含有三萜类的虫漆蜡醇（laccerol）、环石仙桃醇（cyclopholidonol）、环石仙桃酮（cyclopholidone）以及一些酚类化合物等成分[7]。为了更深入了解石仙桃的化学成分及药理活性，本研究对石仙桃全草中分离出的12个菲类化合物进行了光谱鉴定，并评价了化合物的抗炎作用以及对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus subsp.Au-reus）ATCC29213的抗菌作用。

1 材料与方法

1.1 材料

石仙桃（Pholidota chinensisLindl.）全草15 kg，2016年10月从中国云南开远市采集，由中国科学院昆明植物学研究所陈玉教授鉴定。凭证样本（No.BBP0734）存放于云南西丽有限公司（中国昆明）实验室。金黄色葡萄球菌金黄亚种（Staphylococcus aureus subsp.aureus）ATCC29213由中国普通微生物菌种保藏管理中心（China General Microbiologi‑cal Culture Collection Center,CGMCC）提供。

头孢他啶（上海源叶生物科技有限公司）；青霉素G钠（Biosharp公司）；DMSO（Sigma公司）；Muller Hinton（MH）肉汤、Luria‑Bertani（LB）肉汤（广东环凯微生物科技有限公司）；琼脂粉（Scientific Research Special公司）。小鼠单核巨噬细胞RAW264.7由中科院上海细胞库提供，DMEM培养基和胎牛血清由BI公司生产，Griess Reagent、LPS及对照药物L‑单甲基精氨酸（L‑NMMA）由Sigma公司生产。

1.2 仪器

旋光度用Perkin‑Elmer 341旋光计测量；UV光谱在MeOH中用Perkin‑Elmer Lambda 25 UV‑vis分光光度计记录；以TMS为内参照，1H（400 MHz）、13C(100 MHz)和2D NMR波谱通过Bruker DRX‑500 MHz核磁共振光谱仪（德国Bruker公司）记录；HRESIMS数据用LC‑IT‑TOF质谱仪（日本岛津公司）获取；ESIMS数据用MDSSCIEX API 2000 LC/MS/MS仪器采集；Water2535型半制备液相色谱仪（美国Waters公司）；Agilent1206型高效液相色谱仪（美国Agilent公司）；SephadexLH‑20（瑞典Amer‑sham Biosciences公司）；制备型反相色谱柱（250 mm×20 mm，10μm，日本Daisogel公司），RP‑C18（40~63μm，德国Merck公司）；GF254硅胶板（50~100nm，临沂市海祥化工有限公司）；柱层析硅胶60（100~200目，青岛海洋化工有限公司）和Develosil ODS（75μm，日本Nomura Chemical Co.Ltd.）。

1.3 提取与分离

干燥石仙桃（Pholidota chinensisLindl.）全草15 kg经粉碎后，室温下用100 L的体积分数95%乙醇浸泡提取3次，合并滤液进行减压浓缩，得到浸膏800 g。乙醇提取液经硅胶柱层析，以石油醚‑丙酮（体积比10∶1，7∶1，5∶1，3∶1，1∶1）进行梯度洗脱，得到Fr1‑Fr9共9个组分。Fr6组分经硅胶柱层析，以三氯甲烷‑甲醇（体积比100∶1~60∶1）进行梯度洗脱，过Sephadex LH‑20（三氯甲烷‑甲醇，体积比1∶1）凝胶柱色谱分离纯化，经甲醇重结晶后，得到化合物3（225 mg）。Fr7组分经硅胶柱层析，以三氯甲烷‑甲醇（体积比100∶0，100∶1，50∶1，30∶1）进行梯度洗脱，得到Fr7‑1~Fr7‑3共3个亚组分。其中，Fr7‑2的滤液过Sephadex LH‑20（三氯甲烷‑甲醇，体积比1∶1）凝胶柱色谱后，用Waters制备液相，甲醇‑水（体积比56∶44）等度洗脱得到化合物6（tR=7.9 min，65 mg）。Fr7‑3组分经硅胶柱层析，以三氯甲烷‑甲醇（体积比60∶1）为洗脱剂，再过Sephadex LH‑20（甲醇）凝胶柱色谱，得到Fr7‑3‑1和Fr7‑3‑2 2个组分，其中Fr7‑3‑1组分经Agilent制备液相，甲醇‑水（体积比55∶45）等度洗脱得到化合物11（tR=9.0 min，73 mg）和12（tR=7.7 min，56 mg），Fr7‑3‑2组分经Ag‑ilent制备液相，甲醇‑水（体积比54∶46）等度洗脱得到化合物2（tR=7.0 min，43 mg）。Fr8组分经分离得到Fr8‑1~Fr8‑3共3个亚组分，其中Fr8‑1组分经Sep‑hadex LH‑20（三氯甲烷‑甲醇，体积比1∶1）凝胶柱色谱后，经Agilent制备液相，以60%%~100%甲醇进行梯度洗脱，分别得到化合物9（tR=8.0 min，11 mg）、7（tR=8.4 min，53 mg）和1（tR=8.6 min，25 mg）；Fr8‑2组分经Sephadex LH‑20（三氯甲烷‑甲醇，体积比1∶1）凝胶柱色谱后，经Agilent制备液相，甲醇‑水（体积比58∶42）等度洗脱得到化合物8（tR=8.0 min，46 mg）。Fr8‑3组分经Sephadex LH‑20（三氯甲烷‑甲醇，体积比1∶1）凝胶柱色谱后，经Agilent制备液相，甲醇‑水（体积比44∶56）等度洗脱得到化合物4（tR=6.1 min，12 mg）。Fr9组分经硅胶柱层析，以三氯甲烷‑甲醇（体积比30∶1~15∶1）梯度洗脱，得到Fr9‑1~Fr9‑3共3个亚组分，其中Fr9‑2经常压反相C18色谱柱层析（0%~70%），经Sephadex LH‑20（甲醇）凝胶柱色谱分离纯化，得到化合物10（17 mg）；Fr9‑3经常压反相C18色谱柱层析（0%~70%），经硅胶柱层析，以三氯甲烷‑甲醇（体积比60∶1）洗脱，经Sephadex LH‑20（三氯甲烷‑甲醇，体积比1∶1）凝胶柱色谱纯化，再经甲醇重结晶，得到化合物5（41 mg）。

1.4 结构鉴定

化合物1：黄色粉末；分子式为C27H26O7；ESIMSm/z：461[M−H]−，497[M+Cl]−。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ：5.34（1H，d，J=7.0 Hz，H‑2），3.63（1H，m，H‑3），7.99（1H，s，H‑4），6.35（1H，d，J=2.0 Hz，H‑6），6.26（1H，d，J=2.0 Hz，H‑8），2.59‑2.61（1H，m，H‑9），6.62（1H，dd，s，H‑11），4.28（1H，dd，J=11.0，7.5 Hz，H‑1′′），4.35（1H，dd，J=11.0，7.5 Hz，H‑1′′），6.89（1H，br s，H‑2′），6.72（1H，br d，J=8.0 Hz，H‑5′），6.77（1H，br d，J=8.0 Hz，H‑6′），3.76（3H，s，5‑OCH3），3.76（3H，s，3′‑OCH3）。13C NMR（125 MHz，CD3OD）δ：89.1（C‑2），51.6（C‑3），125.2（C‑4），159.1（C‑5），99.4（C‑6），157.7（C‑7），108.3（C‑8），31.8（C‑9），31.5（C‑10），109.2（C‑11），125.1（C‑3a），127.6（C‑4a），116.8（C‑5a），142.0（C‑8a），140.7（C‑10a），158.8（C‑11a），67.1（C‑1′′），134.3（C‑1′），110.6（C‑2′），149.2（C‑3′），147.7（C‑4′），116.2（C‑5′），120.0（C‑6′），172.7（-CO），55.9（5‑OCH3），56.4（3′‑OCH3）。上述数据与文献[8]报道的基本一致，故鉴定化合物1为shanciol H。

化合物2：黄色结晶；分子式为C15H12O3；ESIMSm/z：239[M−H]−。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ：6.80（1H，d，J=2.4 Hz，H‑1），6.74（1H，d，J=2.4 Hz，H‑3），9.32（1H，d，J=9.3 Hz，H‑5），7.06（1H，dd，J=9.3，2.8 Hz，H‑6），7.12（1H，d，J=2.8 Hz，H‑8），7.48（1H，d，J=8.9 Hz，H‑9），7.44（1H，d，J=8.9 Hz，H‑10），4.05（s，4‑OCH3）。13C NMR（125 MHz，CD3OD）δ：105.6（C‑1），156.2（C‑2），100.2（C‑3），160.6（C‑4），116.0（C‑4a），125.5（C‑4b），130.1（C‑5），117.2（C‑6），155.3（C‑7），112.3（C‑8），134.7（C‑8a），128.4（C‑9），127.9（C‑10），135.8（C‑10a），55.9（4‑OCH3）。上述数据与文献[9]报道的基本一致，故鉴定化合物2为4‑甲氧基菲‑2，7‑二醇（flavanthrinin）。

化合物3：黄色粉末；分子式为C16H14O4；ESIMS m/z：269[M−H]−。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ：6.61（1H，s，H‑1），6.18（1H，d，J=2.2 Hz，H‑6），6.26（1H，d，J=2.2 Hz，H‑8），2.74（2H，s，H‑9），2.74（2H，s，H‑10），5.10（1H，s，H‑1′），3.76（s，-OCH3）。上述数据与文献[10]报道的基本一致，故鉴定化合物3为宿苞石仙桃（imbricatin）。

化合物4：白色针晶；分子式为C14H12O3；ESIMS m/z：227[M−H]−，263[M+Cl]−。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ：8.06（1H，d，J=9.5 Hz，H‑5），6.55（2H，m，H‑6，8），6.19（1H，d，J=2.0 Hz，H‑1），6.14（1H，d，J=2.0 Hz，H‑3），2.57（4H，s，H‑9，10）。13CNMR（125 MHz，CD3OD）δ：157.0（C‑2），156.4（C‑4），155.8（C‑7），141.8（C‑10a），140.2（C‑8a），126.7（C‑4b），115.3（C‑4a），115.0（C‑8），113.6（C‑6），107.6（C‑1），102.8（C‑3），31.8（C‑10），31.3（C‑9）。上述数据与文献[11]报道的基本一致，故鉴定化合物4为2，4，7‑三羟基‑9，10‑二 氢 菲（2，4，7‑trihydroxy‑9，10‑dihydro‑phenanthrene）。

化合物5：黄色针晶；分子式为C30H22O6；ESIMS m/z：477[M−H]−。1H NMR（400 MHz，CD3OD）δ：6.92（2H，d，J=9.2 Hz，H‑10，10′），6.93（2H，s，H‑3，3′），7.00（2H，d，J=2.8 Hz，J=H‑8，8′），7.03（2H，dd，J=9.2，2.8 Hz，J=H‑6，6′），7.23（2H，dd，J=9.2，J=H‑9，9′），9.40（2H，d，J=9.2 Hz，J=H‑5，5′），4.14（6H，s，-OCH3）。上述数据与文献[12]报道的基本一致，故鉴定化合物5为blestriareneC。

化合物6：白色粉末；分子式为C16H16O4；ESIMS m/z：271[M−H]−。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ：7.74（1H，s，H‑5），6.74（1H，s，H‑8），6.38（1H，d，J=2.4 Hz，H‑1），6.29（1H，d，J=2.4 Hz，H‑3），3.82（3H，s，-OCH3），3.84（3H，s，-OCH3），2.62（4H，m，H‑9/10）。13C NMR（125 MHz，CD3OD）δ：107.3（C‑1），154.9（C‑2），99.1（C‑3），158.0（C‑4），114.6（C‑4a），124.0（C‑4b），114.5（C‑5），145.7（C‑6），143.3（C‑7），110.1（C‑8），129.9（C‑8a），29.6（C‑9），29.5（C‑10），141.2（C‑10a），55.5（-OCH3），56.0（-OCH3）。上述数据与文献［13］报道的基本一致，故鉴定化合物6为callosin。

化合物7：黄色油状；分子式为C27H26O7；ESIMS m/z：461[M−H]−。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ：5.49（1H，d，J=3.5 Hz，H‑2），3.60（1H，m，H‑3），2.53‑2.64（1H，m，H‑4），6.56（1H，m，H‑6），6.56（1H，m，H‑8），7.94（1H，d，J=9.5 Hz，H‑9），6.49（1H，s，H‑11），4.08（1H，dd，J=11.0，4.0 Hz，H‑1"），4.37（1H，m，H‑1"），6.80（1H，s，H‑2′），6.70（1H，s，H‑4′），6.70（1H，s，H‑6′），3.79（3H，s，10‑OCH3），3.73（3H，s，5′‑OCH3），1.98（3H，s，CH3）。13CNMR（125 MHz，CD3OD）δ：89.0（C‑2），51.1（C‑3），27.9（C‑4），30.8（C‑5），115.0（C‑6），156.2（C‑7），113.7（C‑8），130.2（C‑9），159.7（C‑10），93.9（C‑11），115.7（C‑3a），137.8（C‑4a），140.2（C‑5a），126.0（C‑9a），118.2（C‑10a），160.5（C‑11a），67.0（C‑1′′），135.0（C‑1′），110.1（C‑2′），147.5（C‑3′），116.3（C‑4′），149.1（C‑5′），119.2（C‑6′），172.7（-CO），56.2（10‑OCH3），56.4（5′‑OCH3），20.8（-CH3）。上述数据与文献[8]报道的基本一致，故鉴定化合物7为pleionesinC。

化合物8：棕色粉末；分子式为C25H24O6；ESIMS m/z：419[M−H]−，455[M+Cl]−。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ：8.00（1H，d，J=9.2 Hz，H‑9），6.90（1H，J=2.0Hz，H‑2′），6.79（1H，dd，J=8.2，2.0Hz，H‑6′），6.74（1H，d，J=8.2 Hz，H‑5′），6.63（1H，d，J=2.8 Hz，H‑6），6.62（1H，dd，J=9.2，2.8 Hz，H‑8），6.55（1H，s，H‑11），5.65（1H，d，J=3.0 Hz，H‑2），3.85（1H，m，H‑1′′a），3.85（3H，s，10‑OCH3），3.80（3H，s，3′‑OCH3），3.59（1H，m，H‑1′′b），3.46（1H，m，H‑3），2.62（4H，m，H‑4/5）。13C NMR（125 MHz，CD3OD）δ：160.6（C‑11a），159.4（C‑10），156.1（C‑7），149.0（C‑3′），147.1（C‑4′），140.2（C‑5a），137.5（C‑3b），135.7（C‑1′），130.2（C‑9），126.1（C‑9a），119.0（C‑6′），117.9（C‑9b），116.7（C‑3a），116.1（C‑5′），114.9（C‑6），113.7（C‑8），110.0（C‑2′），93.8（C‑11），88.7（C‑2），64.9（C‑1′′），56.2（10‑OCH3），56.3（3′‑OCH3），54.6（C‑3），30.9（C‑5），27.9（C‑4）。上述数据与文献[14‑15]报道的基本一致，故鉴定化合物8为deacetylpleionesinC。

化合物9：黄色粉末；分子式为C25H24O6；ESIMS m/z：419[M−H]−。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ：8.00（1H，d，J=9.0 Hz，H‑1），6.65（1H，m，H‑2），6.67（1H，d，J=2.5 Hz，H‑4），2.68（1H，m，H‑5），2.68（1H，m，H‑6），6.54（1H，s，H‑7），5.61（1H，d，J=4.5 Hz，H‑9），3.64（1H，m，H‑10），6.93（1H，d，J=2.0 Hz，H‑2′），6.76（1H，d，J=8.5 Hz，H‑5′），6.83（1H，dd，J=8.5，2.0 Hz，H‑6′），4.06（1H，dd，J=11.0，4.0 Hz，H‑1"），3.73（1H，m，H‑1′′），3.57（3H，s，11‑OCH3），3.82（3H，s，3′‑OCH3）。13CNMR（125 MHz，CD3OD）δ：128.0（C‑1），113.1（C‑2），155.6（C‑3），114.0（C‑4），29.9（C‑5），30.8（C‑6），104.9（C‑7），159.6（C‑8），87.5（C‑9），53.3（C‑10），155.2（C‑11），124.6（C‑1a），139.5（C‑4a），141.8（C‑6a），117.3（C‑10a），120.3（C‑11a），134.2（C‑1′），109.1（C‑2′），147.9（C‑3′），146.2（C‑4′），115.0（C‑5′），118.1（C‑6′），62.9（C‑1′′），59.1（11‑OCH3），55.2（3′‑OCH3）。上述数据与文献[16]报道的基本一致，故鉴定化合物9为5'‑demethoxycyrton‑esinA。

化合物10：黄色油状；分子式为C25H24O6；ESIMS m/z：419[M−H]−。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ：6.31（1H，d，J=2.3 Hz，H‑1），6.40（1H，d，J=2.3 Hz，H‑3），8.06（1H，s，H‑5），6.67（1H，s，H‑8），2.63（1H，m，H‑9），2.66（1H，m，H‑10），6.94（1H，d，J=1.9 Hz，H‑2′），6.76（1H，d，J=8.2 Hz，H‑5′），6.83（1H，dd，J=8.2，1.9 Hz，H‑6′），5.49（1H，d，J=5.5 Hz，H‑7′），3.46（1H，dd，J=7.5，5.5 Hz，H‑8′），3.84（1H，dd，J=11.0，5.5 Hz，H‑9′），3.76（1H，dd，J=11.0，7.7Hz，H‑9′）。13C NMR（125 MHz，CD3OD）δ：108.3（C‑1），157.6（C‑2），99.3（C‑3），159.0（C‑4），140.3（C‑4a），125.8（C‑5），142.0（C‑5a），125.4（C‑6），159.1（C‑7），109.0（C‑8），127.3（C‑8a），31.6（C‑9），31.8（C‑10），116.9（C‑10a），135.4（C‑1′），110.4（C‑2′），149.5（C‑3′），147.4（C‑4′），116.1（C‑5′），119.6（C‑6′），88.7（C‑7′），55.2（C‑8′），65.6（C‑9′），56.4（3′‑OCH3），55.9（4‑OCH3）。上述数据与文献[17]报道的基本一致，故鉴定化合物10为bletillatinA。

化合物11：黄色油状；分子式为C15H14O3；ESIMS m/z：241[M−H]−。1H NMR（500 MHz，CD3COCD3）δ：8.03（1H，d，J=8.3 Hz，H‑5），6.66（1H，d，J=8.3 Hz，H‑6），6.65（1H，brs，H‑8），6.44（1H，d，J=2.4 Hz，H‑3），6.36（1H，d，J=2.4 Hz，H‑1），3.80（3H，s，4‑OCH3），2.62（4H，brs，H‑9，10）。上述数据与文献[18]报道的基本一致，故鉴定化合物11为coelonin。

化合物12：白色粉末；分子式为C15H14O3；ESI/MS m/z：241[M−H]−。1H NMR（500 MHz，CD3COCD3）δ：6.37（1H，d，J=2.6 Hz，H‑1），6.42（1H，d，J=2.6 Hz，H‑3），6.68（1H，dd，J=9.3，2.1 Hz，H‑6），6.70（1H，d，J=2.1 Hz，H‑8），2.67（1H，m，H‑9），2.67（1H，m，H‑10），3.73（3H，s，2‑OCH3）。上述数据与文献[19]报道的基本一致，故鉴定化合物12为lusianthridin。

1.5 抗菌活性评价

将金黄色葡萄球菌亚种标准菌经24 h悬浮培养，用无菌生理盐水稀释至0.5麦氏标准浓度单位（1.5×108CFU/mL）。将待测样品加入96孔培养板，其终浓度为100μmol/L。向各孔中加入100µL菌液，使其终浓度为5×105CFU/mL，终体积为200µL，每组设置一组复孔。37℃培养24 h，酶标仪测定625 nm下的OD值。同时设置培养基空白对照、细菌对照以及青霉素G钠阳性药对照。MIC50（50%minimal inhibitory concentration）按Reed＆Muench法计算。

1.6 细胞毒性评价

在37℃、5%CO2培养箱中将巨噬细胞RAW 264.7置于DMEM培养基进行培养。取孵育好的RAW264.7细胞均匀接种于96孔培养板上培养24 h，将96孔板划分为空白对照组和5个不同浓度的给药组，每组设置3个复孔，待测药物按连续两倍稀释浓度给药，加样200μL，培养24 h后，采用MTT法测细胞存活率，在570 nm处测定吸光度。

1.7 抗炎活性评价

将孵育好的RAW264.7细胞接种至96孔板，用1μg/mL的LPS进行诱导刺激，同时加入待测化合物处理，其终浓度从50μmol/L开始2倍稀释处理，同时设置不含药物组和L‑NMMA阳性药物组作对照，每组设置3个复孔。细胞在37℃、5%CO2条件下过夜培养后，取培养基上清液检测NO生成，在570 nm处测定吸光度。在剩余培养基中加入MTS进行细胞存活率检测，排除化合物对细胞的毒性影响。NO生成抑制率=（A非药物处理组−A样品组）/A非药物处理组×100%。IC50（50%concentration of inhibition）按Reed＆Muench法计算。

2 结果与讨论

石仙桃醇提取物经过硅胶柱层析、HLPC制备等色谱分离手段，得到了12个菲类化合物，通过波谱数据分析与文献数据对比鉴定了它们的结构，分别为shanciol H（1）、4‑甲氧基菲‑2,7‑二醇（2）、宿苞石仙桃（3）、2,4,7‑三羟基‑9,10‑二氢菲（4）、blestri‑arene C（5）、callosin（6）、pleionesin C（7）、deacetyl‑pleionesin C（8）、5'‑demethoxycyrtonesin A（9）、bletillatin A（10）、coelonin（11）、lusianthridin（12），其中化合物1~3、5~10首次从该植物中分离得到。

对化合物1~12进行金黄色葡萄球菌的抗细菌活性筛选的结果显示，浓度为100μmol/L时，与阳性对照药青霉素G钠相比[MIC50为（98.337±0）%]，化合物1、3和7对金黄色葡萄球菌有较强抑制作用，MIC50分别为（73.198±1.767）%、（80.92±4.658）%和（54.458±0.964）%，其他化合物的抑菌效果不明显，与先前研究报道中部分菲类化合物具有显著抗菌活性的结果一致[20]，表明石仙桃在治疗细菌感染相关疾病中可能发挥重要作用。

使用MTT法在50μmol/L时对化合物1~12进行细胞毒活性测试，结果显示化合物1~12在50 μmol/L时RAW264.7的存活率均在对照组的95%以上，对RAW264.7无细胞毒性。对12种化合物的NO生成抑制率的测定结果显示，与L‑NMMA对照组相比较[IC50为（37.34±0.22）μmol/L]，化合物3、4、8、11和12具有较好的抑制作用，IC50值分别为（7.37±1.06）、（28.25±0.62）、（21.73±0.27）、（5.84±0.08）和（18.66±0.61）μmol/L，其中化合物11的抑制活性最强，其他化合物无明显抑制活性。

菲类化合物是石仙桃醇提取物的主要化学成分，具有广泛的生物学活性，如抗炎、抗菌、抗氧化和抗肿瘤等[6]。本文分离得到的化合物中，有研究报道表明，化合物flavanthrinin（2）具有较好的抗氧化活性和抗肿瘤活性，能够直接清除NO自由基从而抑制NO的产生达到抗氧化的作用，对人口腔鳞状细胞癌HSC‑2、HSC‑3、HSC‑4、Ca9‑22和人早幼粒白血病细胞HL‑60具有抑制其生长的作用，从而显示出有细胞毒活性[21]。化合物lusianthridin（12）对A549、SK‑OV‑3、HL‑60等人类癌细胞系都显示出很强的细胞毒作用（ED50值分别为7.7、9.4、9.8μg/mL），对移植肉瘤S180也有抑制作用，显示出具有一定的抗肿瘤作用[22]。

此外，化合物3能抑制H2O2诱导HaCaT细胞产生活性氧（EC50值为8.8μmol/L），具有开发成为一种抗氧化剂的潜力[23]。Bisoli等[24]报道了化合物Callosin（6）也具有较强的DPPH自由基清除能力，其IC50为（17.7±0.3）μmol/L，显示具有抗氧化活性。化合物11能清除DPPH自由基（IC50为16.7μmol/L）从而发挥其抗氧化活性[25]。化合物12能清除DPPH自由基产生抗氧化活性（IC50为22.3μmol/L）[25]。

文献报道除具有抗肿瘤和抗氧化作用外，Sim‑mler等[23]报道了化合物imbricatin（3）具有抗炎作用，能抑制LPS诱导RAW 264.7细胞产生NO（IC50值为20.8μmol/L），对HACaT细胞PGE2的产生具有抑制作用（IC50值为12.2μmol/L），且呈剂量依赖性。化合物coelonin（11）能剂量依赖性的降低IL‑1β、IL‑6和TNF‑αmRNA的表达水平，抑制NF‑κB的活性产生抗炎作用[26]，从抑制炎症因子表达的角度阐明其具有抗炎作用；化合物12可抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞产生NO发挥抗炎作用[IC50为（9.6±0.3）μmol/L][27]。

综上所述，石仙桃作为中草药已有广泛的应用，石仙桃和其中的化学成分在治疗疾病上有很大的用途。前人研究结果显示本文中报道的石仙桃中的菲类化合物2和12在抗肿瘤方面具有较好的作用，化合物3、6、11和12具有抗氧化活性，提示石仙桃在抗肿瘤和抗氧化作用方面具有进一步研究开发的潜力。本文结果显示化合物3、11和12具有抗炎作用，与前人研究结果基本一致，推测这些菲类活性成分可能是石仙桃具有抗炎作用的活性成分。本文研究结果为石仙桃的进一步药用开发及临床应用提供了参考依据。