基层医院开展PCR 检测可行性分析

刘忠俊，张艳亮

（1 云南省普洱市景东县中医院检验科，云南 景东；2 云南省医科大学第一附属医院检验科，云南 昆明 ）

0 引言

目前新冠病毒引起的肺炎在全国乃至全球都是一个严峻的问题。基层医院建立聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）室能及时快速地开展PCR 实验及新冠病毒的检测，首先可以节约运输成本的同时缩短检测时间对于疫情的防控起重要的作用[1]。其次便于质量控制，主导医院核心竞争力。为基层患者提供便利、安全、及时就诊服务。而基层医院临床有基因扩增检验的需求，就此认为基层医院建立PCR 实验室是可行的。具体地开展硬性条件及目前面临的困难如下：

1 分子诊断实验室建设相关依据

（1）GB 19489-2008 《实验室 生物安全通用要求》。

（2）GB 50346-2011 《生物安全实验室建筑技术规范》。

（3）WS 233-2017 《病原微生物实验室生物安全通用准则》。

（4）《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》 卫生部。

（5）《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》卫办医政发〔2010〕194 号。

（6）《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》卫办医政发〔2010〕194 号。

（7）《医学实验室质量和能力认可准则在分子诊断领域的应用说明》CNAS-CL02-A009:2018。

2 分子诊断实验室布局要点及工作流程

2.1 房屋和设施

（1）医疗用房使用面积不少于200m2，房屋应道具备双路供电或紧急发电设施，重要医疗设备和网络应有不间断电源。

（2）有相应的工作区域，流程应当满足工作需要。

（3）设置医疗废物暂存处，设置污物和污水处理设施和设备，满足污物和污水的消毒和无害化的要求。

2.2 设计要点

（1）平面布局：不论是组合式还是分散式布置的PCR实验室，各功能房间均宜设置独立缓冲间。

（2）区域空气流向：为避免交叉污染，PCR 实验室空气流向必须严格遵循单一方向进行，即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配置和扩增区→扩增产物分析区。

（3）通风空调：为避免交叉污染，各功能用房的空气不能掺混。组合式PCR 实验室宜采用全新风直流式空调系统；当采用全新风系统有困难时，每区的空气只能在其室内自循环。

2.3 样本制备要点

（1）气流组织宜采用上送下排，送风口和排风口布置应使室内气流停滞的空间降低到最小程度。

（2）在生物安全柜操作面或其他有气溶胶操作地点的上方附近不得设送风口。

（3）高效过滤器排风口应设在室内被污染风险最高的区域，单向布置，不得有障碍。

（4）不能以回（排）风夹墙代替排风支管，排风高效过滤装置与排风总管的连接全部是实体风管。

3 实验室人员要求

根据CNAS-CL02-A009:2018《医学实验室质量和能力认可准则在分子诊断领域的应用说明》要求执行。

4 目前基层医院存在的问题

4.1 基层医院业务用房紧张

首先目前基层医院业务用房处于紧张状态。一个PCR 室至少需要200m2以上的建筑面积原则上有相连的四个独立的工作区域。而核心实验区用房面积不低于75%。

4.2 运营资金贫乏

基层医院缺乏足够的运营资金来投入实验室的建设和实验仪器的购置。首先PCR 实验室装修要求严苛。其次实验室设备包括仪器的硬件和软件、测量系统和实验室信息系统等。

4.3 专业技术人员紧缺

专业技术人员紧缺是基层医院PCR 室开展工作难点之一。老年化严重、学历低、职称低、人员紧缺是基层医院用人的难点。

4.4 基层医院检验设备的投入不足

PCR 室检验业务，所需的设备和耗材多。投资了设备后期还需投入许多的试剂和耗材来维持运行。

5 建立PCR 实验室应对情况

5.1 人员的问题

①积极多渠道地引进高素质的检验人才。②同时重视管理人员及操作人员的深造与培训，逐渐外送人员到上级医院系统地进修学习。③对于实验室不合理的人才结构状况可以通过不断的科室内部和院内学习理论知识和操作技能，取长补短共同提升进步。④通过各种渠道搭建学习平台，通过线上培训和邀请上级医院专家、学者到医院指导授课的方式提高业务水平。⑤建立合理的奖惩方案。

5.2 资金问题及项目推广

（1）目前新型冠状病毒肺炎疫情成为全球性严峻的问题之一的状况下，及时开展基层二级实验室检测冠状病毒在疫情防控过程中具有非常重要的意义。国家也在硬件和软件上提供支持。

（2）根据医院的现状选择有能力、稳定供应的设备及试剂供应商，仪器选择遵行实用性、有效性、科学性原则，应考虑能源消耗和将来处理问题。

5.3 实验区域设置问题

合格的PCR 实验室做到“十六字”原则，“各区独立、注意风向、因地制宜、方便工作”[2]。在医院房间紧张无法满足相同楼层的状况下笔者认为可以引进目前疫情状态下新冠检测的方舱实验室建设方法[3]。

5.4 市场预测

5.4.1 加强PCR 室开展项目宣传和后期效益分析

具体的开展项目及临床意义如下所示：

5.4.1.1 实时荧光PCR 检测开展的项目及临床意义

见表1。

表1 实时荧光PCR 检测开展的项目及临床意义

5.4.1.2 焦磷酸测序可开展项目

见表2。

表2 焦磷酸测序开展项目

根据对本院开展项目统计如下：

5.4.2 目前标本量

目前每天有5 例HBV-DNA 检测， HCV-RNA 0-2 例，HBV P 区耐药基因测序0-1 例，结核T 细胞检测0-3 例，地贫0-2 例，呼吸道病原核酸检测0-5 例，HPV 基因检测5-20 例，其他项目有待宣传开发。

5.4.3 可开发潜力

（1）PCR 由于需较多手工操作，且操作流程多，对环境要求高，检测难度大导致很多小型医院在硬件和软件上不具备开展条件，县城周边医院以及乡镇医院一般不会开展，社会效益显著，市场开发空间很大[6]。

（2）由于各种新的医疗技术的发展和人类对基因检测的认识，开展PCR 及测序病人会逐年增加，已经越来越受到重视。地中海贫血、G6PD 酶、Y 染色体检查及耳聋基因检测等产前筛查都能规避遗传疾病风险，对优生优育有着重要的诊断价值[7-9]。

（3）目前新型冠状病毒引起的肺炎疫情牵动了全世界人民的心，国务院提出的应检尽检的指示对基层医院PCR室建设提供了技术和设备的支持。基层PCR 的及时开展及时方便地对病毒筛查对基层防控疫情有着重要的作用。

PCR 的发展离不开国家政策的倾斜扶持和医学界对PCR 检验知识的认可。通过检验人员不间断的学习和推广，大量地培养人才梯队，为医学检验技术及疫情的防控发挥作用[10]。

综上所述，基层医院开展PCR 室检验项目是可行的[11，12]。