血清外泌体ERG、PSMA在前列腺癌患者中的表达及其预后评估价值

姜 庆

(成都上锦南府医院 泌尿外科，四川 成都610000)

前列腺癌(PCa)是男性的一种常见恶性肿瘤，全球患PCa的人数大约占全部患癌人数的15%[1]。当癌细胞转移之后，PCa患者的存活率大幅度下降，中位生存期仅12-15个月[2]，因此及时监测癌细胞的状态对PCa患者有着重要的作用。前列腺特异性抗原(PSA)被广泛的应用于临床PCa筛查及治疗后监测[3]。ETS相关基因(ERG)属于E-26转化特异性(ETS)转录因子，在血管生成、造血和骨骼发育等过程中起着重要作用[4]。大部分PCa患者体内均能观察到ERG与跨膜蛋白酶丝氨酸2(TMPRRSS2)基因的启动子区基因融合，因此其可能与PCa的发生和发展密切相关[5]。前列腺特异性膜抗原(PSMA)由于其高度的特异性被认为是PCa最好的靶抗原[6]。本研究旨在探讨PCa患者血清外泌体中ERG、PSMA表达情况及对患者治疗后生存情况的预后价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年7月-2019年7月期间成都上锦南府医院收治的105例PCa患者，平均年龄(69.87±6.12)岁。纳入标准：①根据标准[7]诊断为PCa，临床和病理资料完整的患者；②检测本研究中涉及到的指标前未接受内分泌治疗及抗癌治疗的患者。排除标准：①指标检测期间服用过抗生素或其他影响检测指标变化的药品；②合并严重感染、心肾等脏器损伤；③合并严重心血管及中枢神经系统疾病。另选取同期良性前列腺增生患者100例，平均年龄(70.35±5.68)岁；健康志愿者95人，平均年龄(68.95±6.48)岁。

1.2 检测指标及方法

1.2.1分离外泌体 所有血样均为早晨空腹采血，采集静脉血5 ml，离心20 min，取上清，于4℃下13 000 g离心2 min，收集上清待检。根据上海宇玫博生物科技有限公司血清外泌体抽提试剂盒说明，参考文献[8]中具体方法获得外泌体。

1.2.2检测ERG、PSMA的表达量 按照试剂盒中说明书操作步骤提取血清外泌体中的总RNA,提取后用紫外分光光度计检验，并用凝胶电泳检测RNA的完整性；符合标准后进行逆转录合成cDNA，扩增后采用RT-PCR检测血清外泌体ERG以及PSMA在各组受试者中的相对表达量。

1.3 前列腺癌危险因素等级分级标准

根据D’Amico等[9]提出的风险评估标准，根据PCa患者血清PSA、Gleason评分和临床分期将PCa分为低、中、高危三个等级，见表1。

1.4 随访情况

所有患者在其治疗出院后均获得1年的随访时间，调查并记录患者的生存死亡情况。

表1 前列腺癌危险因素等级分级标准

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 三组血清外泌体ERG、PSMA相对表达量

癌症组与疾病组的血清外泌体ERG、PSMA的相对表达量明显高于健康组(P<0.05)；癌症组的血清外泌体ERG、PSMA的相对表达量明显高于疾病组(P<0.05)，见表2。

表2 三组血清外泌体ERG、PSMA相对表达量比较

2.2 不同危险因素等级PCa患者的血清外泌体ERG、PSMA的表达量

PCa患者高危组的血清外泌体EGR、PSMA的表达水平明显高于中危组和低危组(P<0.05)，中危组与低危组比较差异无统计学意义(P>0.05),见表3。

表3 不同危险等级的PCa患者血清外泌体ERG、PSMA的表达量比较

2.3 不同预后的PCa患者血清外泌体ERG、PSMA的表达量

105例PCa患者中有32例死亡，存活率为69.52%；PCa患者死亡组的血清外泌体EGR、PSMA的表达水平明显高于存活组(P<0.05)；见表4。

表4 不同预后结局PCa患者的血清外泌体ERG、PSMA的表达量比较

2.4 血清外泌体ERG、PSMA的表达量评估PCa患者预后的ROC分析

ROC分析结果显示：血清外泌体ERG、PSMA评估PCa预后的AUC分别为0.705、0.780，95%CI分别为0.598-0.812，0.693-0.866；见图1，表5。

表5 血清外泌体ERG和PSMA水平对PCa患者预后的效能

图1 血清外泌体ERG、PSMA表达量对PCa预后的ROC曲线

3 讨论

ERG与细胞增殖、分化、凋亡等多种生物学过程相关[10]。据报道，ERG与雄激素诱导的TMPRSS2基因的启动子区基因融合是人类前列腺癌中最常见的基因融合类型[11]，这种基因融合导致ERG在雌雄激素双反应基因TMPRSS2的5'控制区的前列腺上皮细胞异位表达[5]；并且这种融合大部分是由于TMPRSS2和ERG之间的间质区的染色体缺失而产生的[10]。本研究结果显示PCa患者的血清外泌体ERG表达量明显高于前列腺增生患者和健康人群,因此ERG的表达水平具有PCa辅助诊断的潜在价值[12]。有报道称TMPRSS2与ERG融合还可以促进PCa细胞向骨骼方向迁移和侵袭[13]。本研究结果还显示，PCa高危患者的血清外泌体EGR的表达水平明显高于PCa中危患者，其预后的AUC为0.705，说明ERG的表达水平可以在一定程度上提示癌细胞的发展状态，从而起到对PCa患者的预后评估作用。

PSMA主要在前列腺上皮细胞表面表达，可作为载体参与物质的跨膜运输[14]。据报道，在雄激素非依赖性、晚期和转移性疾病中，PSMA的过表达与肿瘤进展的阶段和程度成正比；并且PSMA在良性前列腺组织中的表达远低于其在PCa组织中的表达[13]。本研究结果显示PCa患者的血清外泌体PSMA表达量明显高于前列腺增生患者和健康人群。此外，PSMA在前列腺增生与PCa之间的表达没有重叠[15]，这体现了PSMA高度的特异性和灵敏度。本研究结果还发现，PCa高危患者的血清外泌体PSMA的表达水平明显高于PCa中危患者，其预后的AUC为0.780，说明PCa患者PSMA的表达水平与肿瘤状态关系密切，对PCa的预后评估有着重要价值。

综上所述，血清外泌体ERG和PSMA在PCa患者的表达量明显高于前列腺增生患者和健康人群，并且与危险因素分级密切相关，可以为PCa的预后评估提供参考依据，对临床的治疗有一定借鉴价值。