血清HIF-1α、25（OH）D3、IGF-1及SAA水平在不同临床特征乳腺癌患者中的表达及临床意义

雷建梅 匡文斌 邓秋婵 张肄鹏

【摘要】 目的：探討不同临床特征乳腺癌（BC）患者血清缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、25-羟维生素D3[25（OH）D3]、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）及血清淀粉样蛋白A（SAA）水平表达情况及其临床意义。方法：收集2017年3月-2020年7月深圳市龙华区中心医院收治的92例乳腺癌患者作为BC组，113例乳腺良性肿瘤（BBT）患者作为BBT组，120名健康育龄妇女作为对照组。分别检测血清中HIF-1α、25（OH）D3、IGF-1及SAA水平。结果：BC组HIF-1α、IGF-1及SAA水平明显高于BBT组和对照组，而25（OH）D3水平明显低于BBT组和对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）;BBT组IGF-1和SAA水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），而HIF-1α、25（OH）D3与对照组比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。Ⅲ、Ⅳ期、肿块>5.0 cm、有淋巴结转移及组织中、低度分化的BC患者血清HIF-1α、IGF-1及SAA水平分别明显高于Ⅰ、Ⅱ期、肿块<2.0 cm、无淋巴结转移及组织高度分化的BC患者，而25（OH）D3水平明显低于Ⅰ、Ⅱ期、肿块<2.0 cm、无淋巴结转移及组织高度分化的BC患者，差异均有统计学意义（P<0.05）。经Pearson相关性分析，BC患者血清HIF-1α与IGF-1、HIF-1α与SAA、IGF-1与SAA均呈正相关（r=0.587、0.752、0.604，P<0.05），而25（OH）D3与HIF-1α、IGF-1、SAA均呈负相关（r=-0.494、-0.715、-0.570，P<0.05）。结论：BC患者HIF-1α、IGF-1及SAA水平明显升高，而25（OH）D3水平明显降低，且与不同临床特征有关。因此，加强上述指标监测对BC患者早期鉴别诊断及疾病严重程度的判断具有一定的指导意义。

【关键词】 缺氧诱导因子-1α 25-羟维生素D3 胰岛素样生长因子-1 血清淀粉样蛋白A 乳腺癌

Expression and Clinical Significance of Levels of HIF-1α， 25 （OH） D3， IGF-1 and SAA in Breast Cancer Patients with Different Clinical Characteristics/LEI Jianmei， KUANG Wenbin， DENG Qiuchan， ZHANG Yipeng. //Medical Innovation of China， 2021， 18（34）： 0-052

[Abstract] Objective： To investigate the levels of hypoxia inducible factor-1α （HIF-1α）， 25-hydroxyvitamin D3 [25 （OH） D3]， insulin-like growth factor-1 （IGF-1） and serum amyloid A （SAA） in breast cancer （BC） patients with different clinical features and their clinical significance. Method： From March 2017 to July 2020， 92 breast cancer patients in Shenzhen Longhua District Central Hospital were enrolled as BC group， 113 benign breast tumor （BBT） patients were enrolled as BBT group， and 120 healthy women of childbearing age were enrolled as control group. The levels of HIF-1α， 25 （OH） D3， IGF-1 and SAA were detected. Result： The levels of HIF-1α， IGF-1 and SAA in BC group were significantly higher than those in BBT group and control group， while the level of 25 （OH） D3 was significantly lower than those in BBT group and control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. The levels of IGF-1 and SAA in BBT group were higher than those in control group， and the differences were statistically significant （P<0.05）， while there were no significant differences in HIF-1α and 25（OH）D3 （P>0.05）. The levels of HIF-1α， IGF-1 and SAA in BC patients with stage Ⅲ and Ⅳ， mass >5.0 cm， lymph node metastasis and medium and low differentiation were significantly higher than those in BC patients with stage Ⅰ and Ⅱ， mass <2.0 cm， no lymph node metastasis and high differentiation， while the level of 25 （OH） D3 was significantly lower than those in BC patients with stage Ⅰ and Ⅱ， mass <2.0 cm， no lymph node metastasis and high differentiation， the differences were statistically significant（P<0.05）. Pearson correlation analysis showed that HIF-1α and IGF-1， HIF-1α and SAA， IGF-1 and SAA were positively correlated （r=0.587， 0.752， 0.604， P<0.05）， while there was a negative correlation between 25（OH）D3 and HIF-1α， IGF-1， SAA （r=-0.494， -0.715， -0.570， P<0.05） in BC patients. Conclusion： The levels of HIF-1α， IGF-1 and SAA are significantly increased in BC patients， while the level of 25 （OH） D3 is significantly decreased， which are related to different clinical characteristics. Therefore， strengthening the monitoring of the above indicators has certain guiding significance for the early and differential diagnosis of BC patients and the judgment of the severity of the disease.

[Key words] Hypoxia-inducible factor-1α 25-hydroxyvitamin D3 Insulin-like growth factor-1 Serum amyloid A Breast cancer

First-author’s address： Shenzhen Longhua District Central Hospital， Shenzhen 518110， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.34.011

乳腺癌（breast cancer，BC）是威胁全球女性身心健康的主要恶性肿瘤之一，位居女性恶性肿瘤发病率和死亡率的首位，且其发病率呈逐年上升趋势，同时不断年轻化，女性身心健康和生活质量受到严重威胁[1-2]，但其病因和发病机制至今仍尚未完全阐明。有研究表明，年龄、种族、遗传、饮食、环境及激素水平等多种因素在BC的发病中发挥了重要的作用[3-4]，而导致BC死亡的主要因素是癌细胞的浸润和转移，而癌细胞的浸润和转移与肿瘤细胞的增殖、分化、迁移、黏附及慢性炎症等多种因素的调控有关[5-8]。为此，本研究对与上述调控有关的缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）、25-羟维生素D3[25（OH）D3]、胰岛素样生长因子-1（insulin-like growth factor-1，IGF-1）及血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A，SAA）等多种指标在不同临床特征BC患者中的表达及临床意义进行了探讨，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2017年3月-2020年7月深圳市龙华区中心医院妇产科确诊的乳腺癌患者92例为BC组。BC诊断参照《中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范（2017年版）》诊断标准[9]，并依据TNM分期标准、肿块大小、是否有淋巴结转移及组织分化程度的不同对BC患者进行分类，其中Ⅰ、Ⅱ期60例，Ⅲ、Ⅳ期32例;肿块>5.0 cm 21例，2.0～5.0 cm 46例，<2.0 cm 25例;有淋巴结转移35例，无淋巴结转移57例;组织中、低分化63例，高度分化29例。纳入标准：（1）资料完整的女性患者;（2）术后组织学活检确诊者;（3）初次确诊者;（4）未经放、化疗及相关性治疗者;（5）未服用VitD补充剂及钙调节剂者。排除标准：（1）伴有心、脑、肝及肾等严重疾病者;（2）出血性疾病者;（3）伴有其他肿瘤者;（4）伴有高血压、糖尿病及白血病等疾病者;（5）精神病者;（6）不配合者。同期病理确诊为乳腺良性肿瘤（benign breast tumor，BBT）患者113例为BBT组。纳入标准：（1）乳腺良性肿瘤确诊女性;（2）初诊者;（3）未经任何治疗者;（4）未服用任何药物者。排除标准：（1）伴有心脑、肝及肾等实质器官严重疾病者;（2）出血性疾病者;（3）伴有其他肿瘤者;（4）伴有高血压、糖尿病及血液病等疾病者;（5）精神病者;（6）不配合者。选择健康育龄妇女120名为对照组。纳入标准：（1）体格检查未见任何异常者;（2）未服用任何药物者。排除标准：（1）伴有心脑、肝及肾等实质器官严重疾病者;（2）出血性疾病者;（3）肿瘤者;（4）伴有高血压、糖尿病及血液病等疾病者;（5）精神病者;（6）不配合者。本研究经医院伦理委员会批准，且患者及家属均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 采集三组清晨空腹静脉血2份于无抗凝剂的干燥管内，每管3.0～5.0 mL，室温静置30 min后离心分离血清，及时检测，不能及时分析者于-20 ℃保存。冰冻标本取出后需室温放置30 min，待完全复溶后才再行检测。

1.2.2 HIF-1α、25（OH）D3、IGF-1及SAA水平检测 采用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）对HIF-1α和IGF-1水平进行分析，采用化学发光免疫法和免疫比浊法对25（OH）D3和SAA进行分析。所有操作按仪器和试剂说明书进行。

1.3 统计学处理 采用SPSS 22.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验，多组间比较采用F检验;相关性采用Pearson分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组一般资料比较 BC组年龄28～59岁，平均（37.98±10.26）岁。BBT组年龄27～63岁，平均（38.91±12.53）岁。对照组年龄25～66岁，平均（36.89±13.05）岁。三组一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 三组HIF-1α、25（OH）D3、IGF-1及SAA水平比较 BC组血清HIF-1α、IGF-1及SAA水平均高于BBT組和对照组，而25（OH）D3水平明显低于BBT组和对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）;BBT组IGF-1和SAA水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），而HIF-1α、25（OH）D3与对照组比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。见表1。

2.3 不同临床特征BC患者血清HIF-1α、25（OH）D3、IGF-1及SAA水平比较 Ⅲ、Ⅳ期、肿块>5.0 cm、有淋巴结转移及组织中、低度分化的BC患者血清HIF-1α、IGF-1及SAA水平明显高于Ⅰ、Ⅱ期、肿块<2.0 cm、无淋巴结转移及组织高度分化的BC患者，而25（OH）D3水平明显低于Ⅰ、Ⅱ期、肿块<2.0 cm、无淋巴结转移及组织高度分化的BC患者，差异均有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.4 相关性分析 经Pearson相关性分析，BC患者血清HIF-1α與IGF-1、HIF-1α与SAA、IGF-1与SAA均呈正相关（r=0.587、0.752、0.604，P<0.05），而25（OH）D3与HIF-1α、IGF-1及SAA均呈负相关（r=-0.494、-0.715、-0.570，P<0.05）。

3 讨论

BC是女性高度异质的一种全身性恶性肿瘤，发病率高，居女性恶性肿瘤的首位，严重威胁妇女健康及生命，是导致女性死亡的主要原因之一[10-11]。早发现、早诊断与及时有效的治疗措施是提高BC患者疗效和术后生活质量的关键，但BC早期临床症状不明显，且无特异性的诊断标记物，易被漏诊。因此，探索BC、BBT及健康育龄妇女中某些生化和/或免疫标记物水平表达差异，对BC患者早发现、早确诊及疾病严重程度的判断具有重要的指导意义。

HIF-1α是一种关键的核转录因子，人体细胞内广泛存在，具有相当广泛的靶基因谱，是体内维持细胞内氧平衡的重要调控因子，具有促进细胞黏附、抑制钙黏蛋白表达及增强细胞活性和侵袭性等多种生物学效应。同时HIF-1α调控一系列下游基因，如血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF），在肿瘤细胞代谢、新血管生成及肿瘤转移中发挥了重要的调控作用，研究显示，多种癌症患者血清HIF-1α水平明显升高[5，12]。本研究结果显示，BC患者血清HIF-1α水平较BBT组和对照组明显升高，且与疾病严重程度有关（P<0.05），但BBT组和对照组之间差异不明显（P>0.05），表明HIF-1α水平可能与BC发生和发展有密切关系，这可能与BC患者乳腺组织细胞内存在缺氧，引起HIF-1α水平应激性分泌增加，导致其一系列下游基因激活，从而引发BC发生和进程等有关。

25（OH）D3是维生素D（vitamin D，VitD）的活性代谢产物，是一种脂溶性的类固醇衍生物，主要调节钙、磷水平稳定和骨代谢。此外，25（OH）D3在细胞凋亡、细胞分化、肿瘤细胞增殖、侵袭、转移及抗血管生成等方面发挥着重要的作用[13-14]。有研究发现，25（OH）D3与VitD受体（VitD receptor，VDR）结合后具有抗癌作用，其水平在多种癌症患者中明显降低[15-16]。本研究结果显示，BC患者25（OH）D3水平明显降低，且疾病严重程度越重，25（OH）VitD3水平越低（P<0.05），表明BC的发生和进程可能与25（OH）D3水平降低有关，这可能与25（OH）D3水平降低对癌细胞增殖的抑制、诱导癌细胞分化和凋亡的作用减弱有关[16-17]。

IGF-1可激活体内多种信号通路，对提高肿瘤细胞的活性和DNA的持续复制均有较强的作用。同时IGF-1和IGF-1R结合后可激活丝裂原活化蛋白激酶通路，促进肿瘤细胞增殖及低分化，是恶性肿瘤相关诊断指标中较为常用的指标之一[6，18]。近年来，IGF-1水平常用于BC患者诊疗，但不同机构研究结果之间存在很大差异。SAA是一种正向急性时相反应蛋白，具有纤连蛋白和胶原蛋白等相似的结构和功能，能促进细胞黏附、转移和增殖，促进肿瘤的发展。此外，SAA还可诱导基质金属蛋白酶表达，促进肿瘤生长和侵袭组织，是许多肿瘤发生的独立危险因素。有研究表明，多种肿瘤SAA水平明显升高，且不受抗炎药物、免疫抑制剂及肾上腺皮质激素等药物的影响，常作为一种非特异的肿瘤标志物用于肿瘤的诊断、疗效及预后判断[19-20]。本研究结果显示，BC患者IGF-1和SAA水平明显升高，且随病情的加重而升高（P<0.05），表明IGF-1和SAA水平可能与BC发病有一定关系，对BC早期诊断及病情判断具有重要的意义。

综上所述，BC患者血清HIF-1α、IGF-1及SAA水平明显升高，而25（OH）D3水平明显降低，且与BC临床分期、淋巴结转移情况及分化程度有关。因此，加强上述指标监测，对BC患者的早发现、早诊断及疾病严重程度的判断具有参考价值，值得临床推广应用。

参考文献

[1]李贺，左婷婷，曾红梅，等.不同年龄女性乳腺癌患者的临床特征及预后分析[J].中华肿瘤杂志，2021，43（1）：126-131.

[2] Ferlay J，Coloinbet M，Soerjoinataram I，et al.Estimating the global cancer incidence and mortality in 2018： GLOBOCAN sources and methods[J]. Int J Cancer，2019，144（8）：1941-1953.

[3]邹华伟，王玉强.IRS-1与IRS-2在乳腺癌组织中的表达及与其临床病理特征和预后的关系[J].实用癌症杂志，2020，35（1）：53-56，65.

[4]叶绍兵，王家瑞，刘高，等.乳腺癌患者有关辅助诊疗、血管生成、炎症趋化及纤维化作用的表达水平分析[J].湖南师范大学学报（医学版），2019，16（5）：25-28.

[5]王运伟，刘中强，夏熙学，等.联合检测HIF-1α、ET-1、VEGF、CEA、CA153在乳腺癌转移及预后评估中的作用[J].标记免疫分析与临床，2020，27（1）：118-122.

[6]陈书恩，赵丹，刘志伟，等.血清胰岛素样生长因子-1及其受体在乳腺癌患者中的检测价值[J].国际检验医学杂志，2020，41（21）：2624-2627，2632.

[7]周志伟，尹志辉，刘继勇，等.乳腺癌患者维生素D水平及其与传统肿瘤标志物的相关性研究[J].宁夏医科大学学报，2020，42（7）：715-717.

[8]边佳，王胜.乳腺癌患者血清中維生素D和淀粉样蛋白A的水平[J].中国卫生检验杂志，2020，30（23）：2858-2861.

[9]中国抗癌协会乳腺癌专业委员会.中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范（2017年版）[J].中国癌症杂志，2017，27（9）：695-759.

[10]梁奋莉，曹培龙，曹伟，等.肿瘤浸润淋巴细胞对不同分子亚型乳腺癌预后效应的研究进展[J].现代肿瘤医学，2020，28（16）：2894-2897.

[11]王阳，贾国丛，常庆龙，等.VEGF在乳腺癌中的表达及其与病理指标的相关性[J].实用癌症杂志，2020，35（2）：192-195.

[12] SHEN W，LI H L，LIU L，et al.Expression levels of PTEN，HIF-1α and VEGF as prognostic factors in ovarian cancer[J].Eur Rev Med Pharmacol Sci，2017，21（11）：2596-2603.

[13] YAO S，Kwan M L，Ergas I J，et al.Association of serum level of vitamin D at diagnosis with breast cancer survival：a case-cohort analysis in the pathways study[J].JAMA Oncol，2017，3（3）：351-357.

[14]梁欢，征宗梅，杨学攀，等.维生素D对乳腺癌细胞及乳腺癌干细胞凋亡的影响[J].现代肿瘤医学，2020，28（6）：877-882.

[15] De Sousa Almeida-Filho B，De Luca Vespoli H，Pessoa E C，et al.Vitamin D deficiency is associated with poor breast cancer prognostic features in postmenopausal women[J].J Steroid Biochem Mol Biol，2017，174：284-289.

[16]殷隽逸，王雅灵，胡海燕.VitD/VDR与乳腺癌患者免疫状态、临床特征及预后的相关性研究[J].中国癌症杂志，2019，29（5）：372-378.

[17] Sassi F，Tamone C，D’Amelio P.Vitamin D：nutrient，hormone，and immunomodulator[J].Nutrients，2018，10（11）：E1656.

[18]刘晓伟，张宏.胰岛素样生长因子1受体在乳腺癌组织中的表达及其意义[J].内蒙古医科大学学报，2019，41（4）：368-369.

[19]刘锦燕，赵珺涛，项明洁.血清淀粉样蛋白A在疾病中的作用机制及应用研究进展[J].检验医学，2021，36（7）：756-760.

[20] LIN H Y，TAN G Q，LIU Y，et al.The prognostic value of serum amyloid A in solid tumors：a meta-analysis[J].Cancer Cell Int，2019，19（1）：62.

（收稿日期：2021-10-11）

基金项目：深圳市科技计划项目（JCYJ20160428135756806）

①广东省深圳市龙华区中心医院 广东 深圳 518110

通信作者：雷建梅