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试析食品微生物快速检验和无菌操作技术

2021-03-22康文龙

中国食品 2021年4期
关键词:杂菌无菌染色

食品微生物污染直接关系到人们的身体健康,为了保证食品质量安全,应当采取科学有效的微生物快速检验方法,并与实际情况充分结合,准确有效地进行食品质量检验。同时,严格按照无菌操作技术的要求进行规范操作,保证样品检验质量,提高食品微生物检验水平,为人们的身体健康奠定坚实的基础。

一、食品微生物快速检验技术

1.阻抗法。培养基中微生物的生长繁殖会导致电特性改变,阻抗法则是充分利用这些电变化特性特征,对食品微生物含量进行间接测定的一种技术手段。通过阻抗法能够实现对食品中很多微生物的检测,微生物可以分解培养基中很多惰性大分子营养素,使其成为具有微电活性的小分子物质,依照微生物不同生长期生物浓度和培养基间的线性关系,借助培养基中电阻抗检测值,便可对食品样本的微生物浓度做出准确推算。

2.多聚酶链式反应技术(PCR)。PCR技术有着很高的灵敏度,检测时间短,可以将细菌拷贝基因全部检出,还可以在增菌与不增菌的前提下将所要检测的细菌筛选出来。但该技术也存在一些不足,比如检测过程中有假阴性或者假阳性结果存在,对检测结果的精准性造成很大影响。运用PCR全自动检测仪可以高效地进行食品微生物检测,避免了手工操作存在的不足,还使得检测敏感性与特异性得到大幅提升。

3.DNA芯片技术。生物芯片是在玻片和尼龙膜载体基础上,对生物活性分子进行有序排列,单位面积中的分子有着很高的密度,通过一次试验便能将食品样本中的很多病原微生物同时检出。由于芯片不同的生物活性分子,又有蛋白芯片和基因芯片之分。相较于传统的检测方法,DNA芯片技术在样品方面的需求量较少,能够将病原体遗传信息高效地显示出来,在对基因序列分析、病原微生物感染、快速检测等方面发挥着非常重要的作用,发展前景非常广阔。

4.ATP生物荧光技术。ATP生物荧光技术是在荧光素酶催化因素影响下,荧光素经过ATP激活并与氧结合,转化化学能成为光能,将光量子释放出来,能量由ATP不断提供,并将荧光分子激活,ATP浓度和发光强度表现为线性关系,对降低外界干扰发挥着重要作用,还能促进微生物特异识别能力的增强,保证灵敏度,提高检测成效,不过需要对ATP提取剂进行科学的选择。应用ATP生物荧光技术不必进行微生物培养,而且检测效率高,在检测肉制品杂菌污染以及调味品和饮料方面发挥着非常重要的作用。

5.酶联免疫吸附技术。酶联免疫吸附技术应用广泛,抗体经固定相载体吸附之后,实施免疫酶染色,受酶作用影响而出现显色反应,并利用定性定量分析法,对有色产物量进行分析,对样品内待测物质含量进行确定。这种食品微生物检测方法非常敏感,而且具有较强的特异性,对于大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等微生物污染的食品检测发挥着重要的作用,应用范围广,成本投入低。

二、食品微生物检验的无菌操作技术

1.取样。检测过程当中,在无菌条件下对检验样品进行准确称取,需要应用到消毒剪刀、天平、藥匙等工具,并在170℃/2h干热条件下灭菌。要根据无菌操作技术要求规范操作,保证样品质量。

2.样品前处理。准确称取25g样品,置于无菌均质袋中(盛有225ml无菌稀释液)进行均质,制成1∶10样品匀液后实施检验。制备计数样品,对样品匀液进行10倍系列稀释,依照无菌操作要求科学操作。

3.纯种分离。为了对食品标本微生物群体进行精准确定,在检验工作开展过程当中,应当分离出样品中混杂的疑似目标菌,获取纯培养物。为了保证目标微生物的繁殖生长,要结合其特性对培养基进行科学选择,并提供适宜其生长的条件。也可运用抑制素来抑制目标菌之外的各种杂菌,在固体培养基上接种培养物,使其成为单菌落的目标菌,依照要求进行纯化,并对菌落进行鉴定。在操作过程当中,每个器皿都要严格按照无菌操作的相关要求规范实施,这样才能提高检测结果的精准性。

4.革兰氏染色。在食品微生物检验过程当中,革兰氏染色的应用最为普遍,通过纯化分离染色疑似目标菌,在光学显微镜下对微生物形态进行观察,并对目标菌进行检验。涂片、染色等各个环节都应当在无菌操作的严格要求下完成,避免杂菌混入而对镜检结果造成影响。

5.空白对照。通过空白对照,能够将检验用品以及无菌室空气条件和工作人员是否严格依照无菌操作要求进行操作全面反映出来。比如,检验用品灭菌是否彻底、无菌室的条件是否与相关标准的要求符合、工作人员有无依照无菌操作技术要求规范操作。只有确保空白对照结果与相关要求符合,才能进一步提高检验结果的精准性。

总之,结合食品检验工作实际,要科学选择微生物检验技术,并在无菌操作要求下进行科学规范的操作,这样才能保证检验质量,确保人们的身体健康。

作者简介:康文龙(1988.08-),男,汉族,甘肃省武山县,硕士研究生,工程师,研究方向:食品检测。

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