血清8-OHdG、MnSOD水平与急性缺血性脑卒中患者rt-PA静脉溶栓后认知功能恢复的相关性分析

文微微，王燚鑫，张蔚蔚

0 引言

脑卒中是指因脑部血管发生突然破裂,或突然堵塞致使大脑血液循环障碍,最终造成脑部缺血引起脑组织损伤的一组疾病,致死率高,随着社会老龄化进程,发病率逐渐增加[1]。急性缺血性脑卒中(Acute ischemic stroke,AIS)是脑卒中最常见类型,重组组织型纤溶酶原激活剂(Recombinant Tissue Plasminogen Activator,rt-PA)静脉溶栓法是临床治疗AIS的有效方法[2]。8-羟基脱氧鸟苷酸(8-hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG)由活性氧簇攻击DNA分子中的鸟嘌呤碱基第8位碳原子产生,是一种评估DNA氧化损伤程度的生物学指标,锰超氧化物歧化酶(MnSOD)可清除体内自由基,抑制机体氧化损伤进程[3-4]。8-OHdG、MnSOD与认知功能的研究广泛[5-8],但与AIS患者经rt-PA静脉溶栓治疗后认知功能恢复情况的关系尚无报道,本文就此展开研究。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取112例2016年3月至2018年10月在我院行rt-PA静脉溶栓治疗的AIS患者为研究对象(总例数179例,排除67例,最终入选112例),男64例,女48例。纳入标准:①经头颅CT检查,符合中华医学会神经病学分会发布的《中国急性缺血性脑卒中诊治指南》(2014)诊断标准[9];②年龄18～80岁;③为首次发病者;④发病在4.5 h内;⑤患者在治疗前30 min症状未缓解;⑥缺血面积小于同侧大脑半球面积1/3。排除标准:①患者6个月内发生过严重脑外伤;②合并心肝肺肾脏器功能严重障碍者;③合并恶性肿瘤者;④合并出血性疾病者;⑤血糖<2.7 mmol/L或>22.2 mmol/L;⑥妊娠、哺乳期女性;⑦血小板计数<100×109/L;⑧临床资料不完整者。所有患者采用rt-PA静脉溶栓治疗(注射用阿替普酶,国药准字:S20110051,德国Boehringer Ingelheim公司),按照0.9 mg/kg计算剂量,最大剂量为90 mg,给药方法:1 min内静脉推注10%,剩余90%采用静脉输液泵持续推注,在60 min内完成。根据rt-PA静脉溶栓治疗后7 d蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment,MoCA)评分分为2组:认知功能恢复良好组(MoCA≥26分)52例,认知功能恢复不良组(MoCA<26分)60例。患者及家属均签署知情同意书,本研究经医院伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 检测方法 AIS患者于rt-PA静脉溶栓治疗前抽取5 ml静脉血,离心(3 000 r/min,10 min),血清于-80 ℃保存。采用日立7600全自动生化仪检测空腹血糖(Fasting plasma glucose,FPG)、三酰甘油(Triglycerides,TG)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)。采用酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清8-OHdG、MnSOD水平,严格按照试剂盒说明书进行操作,试剂盒均购于美国R&D公司。

1.2.2 认知功能评估 采用MoCA评分量表评估AIS患者认知功能损伤程度。MoCA包括视空间与执行能力、记忆、注意力、语言功能、抽象等8个分项目,共30分,MoCA≥26分为认知功能正常,受教育年限<12年者以MoCA得分加1分计算。记录患者接受rt-PA静脉溶栓治疗前及治疗后7 d MoCA评分。

2 结果

2.1 两组患者一般资料比较 两组患者性别、年龄、BMI、收缩压、舒张压、高血压史、溶栓前MoCA评分相比,差异无统计学意义(P>0.05)； 两组患者心房纤颤史、高血脂史、糖尿病史、发病到溶栓时间、美国国立卫生院神经功能缺损(NIHSS)评分相比,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),见表1。

表1 两组患者一般资料比较[例(%)]

2.2 两组患者实验室指标比较 两组患者8-OHdG、MnSOD、FPG、TC、LDL-C比较，差异有统计学意义(P<0.05),TG、HDL-C比较，差异无统计学意义(P>0.05),见表2。

表2 两组患者实验室指标比较

2.3 认知功能恢复不良组血清8-OHdG、MnSOD水平与溶栓治疗后7 d MoCA评分相关性分析 Pearson相关分析结果显示,认知功能恢复不良组血清8-OHdG水平与溶栓治疗后7 d MoCA评分呈负相关(r=-0.623,P<0.001),MnSOD水平与溶栓治疗后7 d MoCA评分呈正相关(r=0.577,P<0.001),见图1、图2。

图1 认知功能恢复不良组血清8-OHdG、溶栓治疗后7 d MoCA评分散点图

图2 认知功能恢复不良组血清MnSOD、溶栓治疗后7 d MoCA评分散点图

2.4 多因素Logistic回归分析 以AIS患者rt-PA静脉溶栓后认知功能是否恢复良好为因变量,以心房纤颤史、NIHSS评分、高血脂史、糖尿病史、发病到溶栓时间、8-OHdG、MnSOD、FPG、TC、LDL-C为自变量进行多因素Logistic回归分析,结果表明,心房纤颤史、NIHSS评分、高血脂史、糖尿病史、发病到溶栓时间、8-OHdG、FPG、TC、LDL-C均是AIS患者rt-PA静脉溶栓后认知功能恢复不良的危险因素(P<0.05),MnSOD是保护因素(P<0.05),见表3。

表3 影响AIS患者rt-PA静脉溶栓后认知功能恢复因素Logistic回归分析

3 讨论

认知功能障碍是脑卒中患者常见临床症状,对患者、家庭都造成严重负担,是脑卒中患者预后重要评估指标[10]。心房纤颤是心律失常最常见的类型,研究发现，心房纤颤患者心房收缩功能减退,心房血流减缓,血液黏滞度增大,最终导致心房附壁形成血栓[11-12],是公认的认知功能障碍、痴呆的独立高危因素[13]。NIHSS评分是评估神经功能缺损的权威量表,分值越高说明脑神经微环境变化越大,从而影响认知功能。冯清春等[14]研究表明,高血压史、高血脂症是AIS患者发生认知功能障碍的危险因素,可采取预防措施以减缓认知功能障碍的发生。rt-PA是临床常用溶栓药物,可通过激活纤溶酶原转化为纤溶蛋白参与酶促反应,进而促进交联纤维蛋白降解,致使血栓溶解,但也存在时间窗的限制,并与AIS患者预后密切相关[15-16]。权青云等[17]研究发现,卒中后认知功能障碍患者血清LDL-C水平较同期健康对照者高,且LDL-C水平越高,认知功能损伤越严重,是卒中患者发生认知功能障碍的危险因素。熊益等[18]研究发现,FPG、低密度脂蛋白是非糖尿病AIS患者认知功能受损的危险因素,应在临床工作中予以关注。本研究发现,AIS患者rt-PA静脉溶栓后认知功能恢复不良组与良好组相比,房纤颤史、NIHSS评分、高血脂史、糖尿病史、发病到溶栓时间、FPG、TC、LDL-C差异均有统计学意义,提示以上因素可能与AIS患者rt-PA静脉溶栓后认知功能恢复有关,进一步研究显示,房纤颤史、NIHSS评分、高血脂史、糖尿病史、发病到溶栓时间、FPG、TC、LDL-C均是AIS患者rt-PA静脉溶栓后认知功能恢复的危险因素。

氧化应激可以对神经细胞的凋亡起到促进作用,参与阿尔茨海默症的病理过程[19]。研究发现,肝郁型轻度认知障碍患者经过治疗后,肝气郁结症状减轻,认知功能改善,尿中8-OHdG水平降低[5]。陆邦超等[6]发现,痴呆糖尿病患者、轻度认知障碍糖尿病患者、认知正常糖尿病患者与健康对照者相比,血清8-OHdG水平依次降低。血清8-OHdG水平可以反映老年糖尿病患者认知功能损伤程度,是老年糖尿病患者发生认知功能障碍的独立危险因素。吴琼等[7]研究发现,持续低压缺氧法造模成功的老年大鼠学习记忆能力降低,脑组织中8-OHdG水平升高,模型大鼠经过治疗后,学习记忆能力提升,8-OHdG水平降低,提示缺氧造成氧化损伤产物8-OHdG增加越多,大鼠的认知功能损伤程度越重。殷玥等[8]研究发现，高脂饮食法造模成功的肥胖小鼠学习记忆能力显著降低,海马神经元中活性氧水平增高,海马神经元线粒体中MnSOD水平降低,经有氧间歇训练的模型小鼠MnSOD水平升高,海马神经元氧化应激作用减弱,学习记忆能力得到改善。本研究发现,与认知功能恢复良好组相比,认知功能恢复不良组8-OHdG水平较高、MnSOD水平较低,差异均有统计学意义,提示8-OHdG、MnSOD与AIS患者rt-PA静脉溶栓后认知功能恢复状况有关。Pearson相关分析结果显示,认知功能恢复不良组血清8-OHdG与溶栓治疗后7 d MoCA评分呈负相关,MnSOD与溶栓治疗后7 d MoCA评分呈正相关,可能是氧化作用标志物8-OHdG与抗氧化作用标志物MnSOD在机体内参与氧化应激反应影响AIS患者溶栓治疗后认知功能的恢复;多因素Logistic回归分析表明,8-OHdG是AIS患者rt-PA静脉溶栓后认知功能恢复的危险因素,MnSOD是保护因素,提示氧化应激反应与AIS患者rt-PA静脉溶栓治疗后认知功能恢复情况密切相关。

综上所述,AIS患者rt-PA静脉溶栓治疗后认知功能恢复不良组与认知功能恢复良好组相比,氧化应激反应相关指标8-OHdG水平较高,MnSOD水平较低,认知功能恢复不良组8-OHdG水平与溶栓治疗后7 d MoCA评分呈负相关,MnSOD水平与溶栓治疗后7 d MoCA评分呈正相关,8-OHdG、房纤颤史、NIHSS评分、高血脂史、糖尿病史、发病到溶栓时间、FPG、TC、LDL-C均是AIS患者rt-PA静脉溶栓后认知功能恢复的危险因素,MnSOD是保护因素,可能为预测AIS患者rt-PA静脉溶栓治疗后认知功能恢复情况提供参考依据,但具体作用机制尚需进一步研究。