催产素在妊娠晚期及剖宫产术后大鼠体内药物代谢动力学研究

曲星铭， 张 纪， 徐 辉, 张 雷

北部战区总医院 1.血液病科；2.妇产科；3.卫勤部，辽宁 沈阳 110016;4.辽宁省妇幼保健院，辽宁 沈阳 110005

近年来，无痛分娩因其良好的镇痛效果，越来越受到产妇和医师的关注。尽管无痛分娩可以在一定程度上缓解产妇疼痛，但会引起子宫平滑肌松弛和子宫收缩抑制，从而导致分娩时间延长[1]。在无痛分娩过程中使用催产素可以有效地促进子宫颈成熟，加速子宫颈扩张，缩短分娩时间，节省产妇体力和精力，改善母婴结局[2]。催产素可增强子宫收缩，静脉注射迅速生效。但催产素的半衰期短(4～10 min)，维持时间短，需要通过连续静脉内给药维持有效的血药浓度[3]。因此，在剖宫产期间连续输注催产素可以使子宫在整个手术过程中和手术后2 h内持续收缩，从而减少因子宫无力而引起的产后出血。目前，关于不同剂量的催产素对产妇的影响报道较少。本研究通过给予妊娠晚期和剖宫产术后大鼠尾静脉注射不同浓度催产素构建催产素药物代谢动力学模型，并用高效液相色谱-二级质谱联用法测定血浆催产素浓度，探讨其药物代谢动力学变化的特点。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组 选取36只妊娠晚期清洁级SD大鼠为研究对象，体质量400～520 g，孕期18 d。实验动物由北部战区总医院动物实验科提供。将大鼠随机分为妊娠晚期组(n=18)与剖宫产术后组(n=18)。将妊娠晚期组大鼠分为A组、B组、C组3个亚组，每组各6只。将剖宫产术后组大鼠分为D组、E组、F组3个亚组，每组各6只。本研究对大鼠的处置符合动物伦理学标准。

1.2 模型制备 术前12 h禁食。麻醉后将大鼠仰卧位固定于手术台上，颈静脉插管成功后用于放血。通过尾静脉注射给药。A组、B组、C组分别尾静脉注射0.1、0.5、5.0 U/kg不同浓度的催产素。D组、E组、F组参照Jankowski等[4]的方法构建动物模型，下腹部正中切口打开腹腔，显露子宫，切开大鼠子宫及孕囊。取出胎鼠后，缝合子宫，依次将各层组织逐层缝合至皮肤，维持。剖出胎鼠后，D组、E组、F组立即尾静脉推注0.1、0.5、5.0 U/kg不同浓度的催产素。于给药后1、2、4、6、8、10、15、20、45、60 min(分别记为T1、T2、T3、T4、T5、T6、T7、T8、T9、T10)各时间点采集颈静脉血0.5 ml，置肝素化EP管中，3 000 r/min离心5 min，取上清，-80℃保存。

1.3 观察指标 取催产素溶液，用流动相A精密稀释至浓度分别为0.5、1.0、2.9、10.0、20.0、50.0、70.0、100.0 U/ml的催产素标准储备液，分别进样，4℃避光保存。取孕鼠空白血浆50 μl，进样5 μl，记录色谱图；将一定浓度的标准溶液加至空白血浆中，同法测定，记录色谱图。取催产素溶液，用流动相A精密稀释至浓度分别为0.5、1.0、2.9、10.0、20.0、50.0、70.0、100.0 U/ml的溶液，分别进样。以浓度为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线。

2 结果

2.1 妊娠晚期大鼠催产素血药浓度比较 A组、B组、C组药物达峰时间均为给药后1 min。C组T1～T10各时间点血药浓度均明显高于B组与A组，且B组高于A组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 妊娠晚期给予大鼠不同浓度催产素血药浓度比较

2.2 剖宫产术后大鼠催产素血药浓度比较 D组、E组、F组药物达峰时间均为给药后1 min。F组T1～T10各时间点血药浓度均明显高于D组与E组，且E组高于D组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 剖宫产术后给予大鼠不同浓度催产素血药浓度比较

2.3 妊娠晚期大鼠药物代谢动力学参数比较 C组峰值药物浓度、曲线下面积(area under the curve，AUC)、血浆清除率、表观分布容积均高于A组与B组，且B组高于A组，差异有统计学意义(P<0.05)。C组半衰期短于A组与B组，且B组短于A组，差异有统计学意义(P<0.05)。C组药物体内平均驻留时间(mean retention time，MRT)短于A组与B组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 妊娠晚期大鼠药物代谢动力学参数比较

2.4 剖宫产术后大鼠药物代谢动力学参数比较 F组峰值药物浓度浓、AUC、血浆清除率、表观分布容积均高于D组及E组，且E组高于D组，差异有统计学意义(P<0.05)。F组半衰期短于D组及E组，且E组短于D组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 剖宫产术后大鼠药物代谢动力学参数比较

3 讨论

目前，临床上测定催产素血药浓度的方法有酶联免疫吸附法、化学物质放射免疫检验、高效液相色谱-二级质谱联用法等[5]。高效液相色谱具有高压、高效、高灵敏度、应用范围广，以及分析速度快等优点。二级质谱对一级质谱中有疑问的峰进行再次解离分析以确定一级质谱中不确定的峰的结构。本研究首次采用高效液相色谱-二级质谱联用法检测妊娠晚期及剖宫产术后催产素的浓度，该方法提取回收率较高，样品预处理简单，运行时间较短，能够满足实际生物样品的测定。

肾小球滤过、催产素酶等因素影响催产素的代谢与清除[6-7]。在催产素酶水解前，催产素必须与内皮细胞表面的催产素受体结合，随后通过网格蛋白介导的信号通路，最终回收到细胞表面[8]。有研究报道，催产素在人体内的半衰期为1～3 min[9]。本研究采用高效液相色谱-二级质谱联用法测定妊娠晚期和剖宫产术后大鼠体内不同浓度催产素的半衰期为7～10 min，且随着催产素给药浓度增加，孕鼠体内半衰期均变短，提示高浓度催产素代谢快，半衰期短。本研究催产素半衰期较相关文献报道[9]的半衰期长，其原因可能是高效液相色谱质谱联用的方法高效、快速、准确、灵敏，避免了血浆催产素在体外的降解。因为催产素半衰期短，因此，催产素的最佳给药方式非肌肉注射和静脉推注，而是静脉滴注持续给药。

综上所述，催产素半衰期短，给予妊娠晚期和剖宫产术后大鼠不同浓度催产素后，达峰时间均为1 min。在剖宫产术中当胎头或胎肩娩出后，及时经静脉给予催产素将会快速产生宫缩的效应。