血串联质谱检测在孤独症儿童诊断中的应用

宋春兰，段桂琴，徐海萍，王晓芳

(郑州大学第三附属医院儿童发育行为科，郑州 450052)

孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder，ASD)简称孤独症，是一组以社会交往障碍、限制性兴趣或重复刻板行为为核心症状的神经发育障碍性疾病[1]。除核心表现外,ASD儿童也常常存在或伴随一些不能单独用 ASD解释的症状。ASD病因复杂，目前多认为遗传代谢性紊乱是其重要病因之一。在临床工作中，有研究[2]观察到部分代谢性疾病患儿伴有孤独症样症状，对代谢性疾病进行治疗能在一定程度上减轻孤独症症状。鉴于此，本文通过回顾性分析836名ASD儿童血串联质谱检测数据，探讨血串联质谱对于ASD儿童检测的重要意义。

1 对象与方法

1.1 对象 选取2016年1月—2019年12月在郑州大学第三附属医院儿童发育行为科根据DSM-5诊断标准确诊的836名ASD儿童为研究对象。836名儿童中男668名，女168名,年龄1岁4个月～7岁。

1.2 方法

1.2.1 资料收集 包括家族史、年龄、性别、饮食习惯、头颅磁共振、听力、脑电图，血液检查包括血常规、肝功能、肾功能、心肌酶、电解质、血糖、血氨、染色体、多项遗传代谢筛查、甲状腺功能、维生素D、叶酸、维生素A、维生素E等。

1.2.2 滤纸血片采集及检测方法 采集上述儿童足跟或手指的全血，滴于血滤纸片上形成3个均匀血斑，平放晾干3 h，制成滤纸血片，将标本滤纸片用塑料袋封存，-20 ℃ 保存待检。利用串联质谱仪(美国SCIEX公司，API3200MD型)进行检测。 凡首次检测为阳性异常者，均用原血片标本进行重测，一份血片标本两次质谱检测均显著超出参考值范围，判断为质谱检测阳性。

2 结果

在836例ASD儿童中，通过血串联质谱检测发现遗传代谢性疾病32例，二者共患率为3.84%，共患率由高到低依次为：3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏、瓜氨酸血症、中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏、精氨酸血症、脂肪酸代谢障碍、苯丙酮尿症、极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏；32例精神发育迟滞患儿中构成比最高的为3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏(62.5%)。32例遗传代谢性疾病患儿中智力低下者30例，占94%。见表1。

表1 836例ASD儿童的串联质谱筛查结果

3 讨论

儿童ASD是一种日益常见的神经发育障碍性疾病，以男孩多见。近几十年来，ASD的患病率有逐年增高趋势，美国2018年报道[3]8岁儿童患病率为1/59；美国2020年最新数据[4]显示，儿童ASD患病率上升至1/54，男∶女=4.3∶1。ASD儿童往往面临社交障碍、共患疾病等多重困境，通常可累及智力，给个人、家庭和社会带来日益沉重的负担，严重影响儿童及家庭的生活质量。ASD是一种多因素引起的复杂疾病,体内存在多种代谢异常[5]。ASD治疗以康复训练和教育为主，部分ASD儿童存在共患疾病，早期全面诊断和早期干预治疗十分重要。遗传代谢病多为单基因遗传病，因基因突变使合成的酶、受体、载体等蛋白功能缺陷，导致体内某些物质的合成、转运、代谢、储存等出现异常，从而产生一系列临床表现,常与生长发育和智力发育密切相关。应用血串联质谱技术检测分析氨基酸谱与肉碱谱是筛查遗传代谢性疾病的主要手段[6]。ASD和遗传代谢性疾病患儿均可能有智力低下的表现[7],代谢性疾病可表现出类ASD样表现，两种疾病的共患问题已受到普遍关注[8]。在一项来自土耳其的研究[9]中报道，300例ASD儿童有3%的ASD儿童同时存在某一种遗传代谢性疾病。来自上海的一项95例ASD儿童血串联质谱检测的分析报告提示，有3.9%的ASD儿童同时存在某一种遗传代谢性疾病[10]。一项来自希腊的对222例ASD儿童的研究显示，有2.7%的ASD儿童同时存在某一种遗传代谢性疾病[11]。贾美香等[12]报道，ASD与代谢障碍之间呈正相关，对于一些可用药改善的代谢障碍疾病，如果能够在康复训练的同时进行代谢疾病的干预治疗，可能有助于提高ASD儿童的康复效果。部分ASD合并遗传代谢性疾病的患儿具有其他一些临床症状与体征，如面容特殊、共济失调、小头畸形、癫痫、智力低下等[13]。本研究表明，在836例ASD儿童中，通过血串联质谱检测发现遗传代谢性疾病32例，二者共患率为3.84%，与研究[14]报道在ASD儿童当中遗传代谢病的患病率为 2.7%～5.0%基本一致；共患率由高到低依次为：3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏、瓜氨酸血症、中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏、精氨酸血症、脂肪酸代谢障碍、苯丙酮尿症、极长链酰基辅酶A缺乏。本研究显示，32例精神发育迟滞患儿中构成比最高的为3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏；32例遗传代谢性疾病患儿中智力低下30例，占94%。代谢异常的儿童经过积极的替代、药物、特殊饮食等治疗,在一定程度上有助于改善ASD的康复干预效果。任爽等[15]报道，治疗伴有ASD或孤独样症状的遗传代谢病患儿，能在一定程度上缓解ASD症状。

综上所述,对于出生后有惊厥、喂养困难、发育迟缓、社交障碍等病史，特别是出生后未行新生儿筛查ASD的儿童，通过血串联质谱筛查可早期发现遗传代谢性疾病，而多数代谢性疾病是可以治疗的，通过早期发现、早期干预治疗，对伴有代谢性疾病的ASD的预后意义重大。某些遗传代谢性疾病可能是导致ASD的病因，代谢性疾病和ASD也可能有共同的遗传学基础[16]，尚需进一步研究。