异黏蛋白与血管内皮生长因子在上皮性卵巢癌中的表达研究

王珊 蒋文英 刁艳君

(1.西安市第四医院，陕西 西安 710004；2.空军军医大学西京医院，陕西 西安 710032)

卵巢癌作为妇科常见的恶性肿瘤，其中以上皮性卵巢癌为主。由于上皮性卵巢癌的早期症状并不典型，极易被患者忽视[1]，尽早诊断在减低疾病死亡率上至关重要。血管内皮生长因子(VEGF)能够增加肿瘤血管的通透性，并促进恶性肿瘤浸润，导致内皮细胞不断繁殖，使肿瘤新发血管，加重疾病扩散或者恶化[2-3]。异黏蛋白(MTDH)可诱导癌症，在血管产生中具有重要意义。本研究探讨上皮性卵巢癌中MTDH、VEGF的表达，现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2018年7月至2020年4我院上皮性卵巢癌患者62例为A组、良性上皮组织肿瘤患者55例为B组，另选择同期行子宫肌瘤切除手术者60例作为对照组。A组年龄25～63岁，平均(41.57±2.03)岁；本科及以上17例，高中至大专22例，小学及初中23例;体重54～65 kg，平均(60.22±1.01)kg。B组年龄24～65岁，平均(41.80±2.11)岁；本科及以上16例，高中及大专20例，小学及初中19例；体重54～67 kg，平均(60.59±1.05)kg；对照组年龄25～65岁，平均(41.63±1.98)岁；本科及以上17例，高中及大专23例，小学及中10例；体重55～64 kg，平均(60.66±1.07)kg。三组患者一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。纳入标准[4]：(1)A、B组均符合疾病临床诊断标准，病理检验确诊；(2)患者及家属签订知情同意书；(3)临床资料完整。排除标准：(1)实验前进行放化疗；(2)具备精神方面疾病或交流障碍；(3)中途退出。

1.2方法 A、B组均在术中切除卵巢组织后置于液氮内速冻，保存在-80℃条件下保存，利用RT-PCR检查。部分组织可选择福尔马林处理，进行石蜡包埋切片，利用免疫组化检查。对照组在子宫肌瘤切除手术中取正常卵巢组织进行对照。RT-PCR检查：收集所有样品的总RNA，利用逆转录酶试剂盒，合成cDNA第一链。随后选择2 μL cDNA产物放在0.5 μL TransTaq DNApolymerase、5 μL BufferⅡ、4 μL目的片段长度，通过2.5 mmol/LdNTPs对应的上下游引物各1 μL，置于50 μL反应系统中执行PCR扩增，另外选择GAPDH成为内参照物。免疫组化检查：将样品切片后进行微波修复处理，并严格依照SP试剂盒要求进行免疫组化染色，并给予DAB染色。结果中发现MTDH表达在细胞膜后者胞质，VEGF表达于细胞质内，若细胞质或者细胞显示棕黄色提示为阳性。

1.3观察指标 观察比较三组MTDH mRNA与VEGF mRNA表达，观察三组中MTDH与VEGF 蛋白表达情况，最后比较A组中不同临床病理症状者的MTDH mRNA与VEGF mRNA表达。

2 结 果

2.1MTDH mRNA与VEGF mRNA A组MTDH mRNA(0.68±0.20)bp，VEGF mRNA(0.72±0.14)bp。B组MTDH mRNA(0.41±0.11)bp，VEGF mRNA(0.28±0.08)bp。对照组MTDH mRNA(0.33±0.09)bp，VEGF mRNA(0.24±0.06)bp。三组MTDH mRNA、VEGF mRNA表达比较，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2MTDH与VEGF 蛋白 A组MTDH蛋白阳性45例(72.58%)，VEGF蛋白阳性50例(80.65%)。B组MTDH 蛋白阳性14例(25.45%)，VEGF 蛋白阳性20例(36.36%)。对照组MTDH蛋白阳性7例(11.67%)，VEGF蛋白阳性13例(21.67%)。A组MTDH蛋白、VEGF蛋白表达高于B组与对照组(P<0.05)；B组MTDH蛋白、VEGF蛋白表达高于对照组(P<0.05)。

2.3A组不同临床病理症状MTDH mRNA与VEGF mRNA表达 A组中MTDH mRNA与VEGF mRNA表达在病理类型、组织分化程度上比较无显著差异(P>0.05)，在分期、淋巴结转移上差异显著(P<0.05)。见表1。

表1 A组不同临床病理症状MTDH mRNA与VEGF mRNA表达

3 讨 论

卵巢癌作为女性生殖器官上多见的恶性肿瘤，其中以上皮癌为主，且上皮性卵巢癌的病死率约占各类妇科肿瘤的首位，对女性生命安全造成极大威胁[5-6]。MTDH属于新型癌基因，在多种恶性肿瘤中呈现高表达。MTDH基因能够对多条信号通道进行刺激，进而改善其相关基因的表达[7]。VEGF具备较高的特异性，属于促血管生成因子，可直接影响肿瘤生成的主要方式，并在实体肿瘤发展过程中具有重要价值[8]。VEGF是从巨噬细胞、上皮细胞或者各类肿瘤细胞中产生，并经过自分泌、旁分泌途径来促进肿瘤血管内皮细胞产生，并有效提升血管内皮细胞的通透程度，增强血管内皮细胞的增殖反应，进而使肿瘤发生转移或者侵袭现象，若能够抑制其表达，则可有效降低肿瘤的复发与侵袭率[9-10]。本研究结果发现，三组MTDH mRNA、VEGF mRNA的表达上比较，差异有统计学意义(P<0.05)；A组MTDH蛋白、VEGF蛋白表达高于B组与对照组(P<0.05)；B组MTDH蛋白、VEGF蛋白表达高于对照组(P<0.05)；A组中MTDH mRNA与VEGF mRNA表达在分期、淋巴结转移上差异显著(P<0.05)。MTDH、VEGF表达在上皮性卵巢癌中可评估疾病发生与发展，为临床治疗方案的选择及预后评估提供参考依据。