杜仲叶水提物对湘西土鸡生长发育及免疫功能的影响

宋金秋，燕丽娜，李 晖*，李中波

（1.湘西民族职业技术学院，湖南吉首 416000；2.中国科学院植物园，湖北武汉 430000；3.怀化职业技术学院，湖南怀化 418000）

杜仲是我国的传统中药材，富含的活性物质具有抗菌、消炎、提高免疫力的作用，且对种植环境要求不高，湘西地区的气候较适合种植杜仲，因此，杜仲也可用于畜禽养殖中。杜仲皮是传统中草药中最为常见的药材，而杜仲植株的其他部分往往被丢弃，但有研究表明，杜仲叶含有与杜仲树皮非常相似的活性物质（吴红艳和彭呈军，2019），杜仲叶中含有的绿原酸比杜仲树皮更为丰富，绿原酸对提高动物体抗老化能力和免疫力具有积极促进作用，将杜仲叶提取物作为畜禽饲料添加剂具有绿色、安全、环保、低成本等优点（左昕怡等，2019）。但目前关于杜仲叶提取物的研究多集中在对其功能性的探索方面，将其作为畜禽饲料添加剂的研究较少。因此，本试验选取湘西地区常见的土杂鸡为研究对象，研究杜仲叶提取物在提高生产性能方面的作用，并探讨其在湘西土鸡日常饲料中的最适添加比例，以期为推进杜仲叶提取物的广泛应用，发展湘西地区土鸡养殖业提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料与试剂从湘西自治州鸡苗孵化场购买一批1日龄湘西土鸡苗（300只）；EDTA抗凝剂；免疫球蛋白测定试剂盒。

1.2 主要设备高速冷冻离心机（型号：5810R）；普通离心机（型号：5430型）；日立生化分析仪（型号：7600）；旋转蒸发仪（型号：RE-52AARE）

1.3 试验设计

1.3.1 杜仲叶提取物的制备 将新鲜的杜仲叶研磨成泥，用超纯水按1∶20倍体积稀释，0.45 μm 微膜过滤，反复1次，得浓度为0.2 g/mL的滤液2000 mL；旋转蒸发仪内干燥浓缩，最终得到400 g杜仲叶水提物粉末，4℃保存。

1.3.2 试验动物分组 选取1日龄土杂鸡苗300只，随机分为5组，每组5个重复，每个重复12只鸡，组I～IV为处理组，V组为对照组，分别按0.05%、0.1%、0.15%、0.2%的比例向处理组土杂鸡日粮中添加杜仲叶提取物粉末，对照组只喂饲基础日粮。

1.4 测定指标及方法

1.4.1 生长性能 在饲养过程中，生长性能在试验开始和试验结束时称量各个重复湘西土杂鸡体重，统计采食量，计算平均日采食量、平均日增重和料重比。

1.4.2 免疫器官指数 在第21和42时别从每组随机挑选3只鸡，取其胸腺、法氏囊、脾脏等免疫器官，清洗干净后进行称重、记录，从而得到相应的免疫器官指标，根据免疫器官的重量与鸡的体重计算出免疫器官指数。

1.4.3 血清中抗体 在饲养试验第21、42天早晨每组随机挑选3只体征良好、体重相当的土杂鸡，空腹状态下进行翅静脉采血。室温环境静置1～2h，然后在3000 r/min离心10 min，分离血清，采用免疫比浊法对血清中的IgA、IgM、IgG进行测定，记录结果。

1.5 数据统计与分析试验数据“平均数±标准误差”表示，用EXCEL和SPSS（20.0）软件对试验数据进行方差分析。

2 结果与分析

2.1 杜仲叶水提取物对湘西土鸡生长性能的影响由表1可知，处理组的初始体重、终末体重、平均日采食量与对照组相比均差异不显著（P＞0.05），但与对照组相比，0.15%处理组土杂鸡平均日增重显著提高13.14%（P＜0.05），料重比显著降低2.97%（P＜0.05）。结果说明，饲料中添加杜仲叶水提物可提高湘西土杂鸡的日增重，降低料重比，提高饲料转化率。

表1 杜仲叶提取物对湘西土鸡生长性能的影响

2.2 杜仲叶水提取物对湘西土鸡免疫器官指标的影响由表2可知，在第21、42天，处理组土杂鸡的法氏囊、胸腺指标随杜仲叶提取物浓度的增加表现出先升高再降低的现象（P＜0.05），0.1%处理组土鸡法氏囊指标与对照组相比存在显著差异，第21天时上升比例为6.68%，第41天时上升比例为20.3%（P＜0.05），而脾脏指标无显著差异（P＞0.05），0.15%处理组的土杂鸡胸腺指标在试验期间相比其他处理组差异性最显著，在第21天时胸腺指标上升8.84%（P＜0.05），第42天到达峰值，上升比例高达17.55%（P＜0.05）。

表2 杜仲叶提取物对湘西土杂鸡免疫器官指标的影响 g/kg

2.3 杜仲叶水提取物对湘西土杂鸡血清中免疫球蛋白的影响由表3可知，不同处理组土杂鸡血清中IgA和IgM含量与对照组相比无显著差异（P＞0.05）。第21天时，与对照组相比，0.15%处理组土杂鸡血清中IgG浓度上升最高，升高27.05%（P＜0.05），0.05%和0.1%处理组土杂鸡IgG分别提高10.82%和15.01%（P＜0.05）；第42天时，0.05%和0.1%处理组土杂鸡血清中IgG浓度相比对照组均有所升高，但无显著差异（P＞0.05），0.15%处理组土杂鸡血清中IgG第42天达到峰值，升高32.67%（P＜0.05）。添加0.20%处理组土杂鸡血清中IgG浓度在第21、42天时表现出浓度下降情况（P＜0.05）。

表3 杜仲叶提取物对湘西土鸡血清免疫球蛋白含量的影响

3 讨论

3.1 杜仲叶水提取物对湘西土鸡生长性能的影响研究数据发现，杜仲叶水提物不能明显提高湘西土鸡的平均日采食量，与陈玉敏等（2015）的研究结果相一致，也符合李燕舞等（2019）的研究。

3.2 杜仲叶水提取物对湘西土鸡免疫器官指标的影响目前常以胸腺、脾脏及法氏囊的重量作为衡量动物免疫功能强弱的直接指标，从试验数据看，不同比例杜仲叶水提物均能提高鸡法氏囊和胸腺指标，但比例为0.1%和0.15%杜仲叶水提物的促生长作用更强；此外，研究还发现在整个试验期，不同比例杜仲叶水提物均能提高鸡脾脏指标，但各组之间几无差异，这表明杜仲叶水提物虽能在一定程度上提高鸡的免疫力，但提升效果不显著。上述结果与吕锦芳等（2010）研究结果相吻合，却与其复方杜仲口服液可提高肉鸡脾脏指数相悖。

3.3 杜仲叶水提取物对湘西土杂鸡血清中免疫球蛋白的影响 动物血清中的抗体水平直接反映动物免疫功能水平，其中IgG、IgM是机体非常重要的免疫球蛋白。本试验结果表明，杜仲叶水提物对IgA、IgM的提升效果不显著，但0.15%杜仲叶水提物能显著提高IgG的含量，与丁浩轩和黄林（2020）提出的杜仲可有效改善黄羽肉鸡免疫功能的研究结果相一致，也与上述不同比例杜仲叶水提物显著提升土鸡胸腺和法氏囊指数的结果相符，同样暗示0.15%杜仲叶水提物能显著提高湘西土鸡免疫力。

4 结论

试验结果表明，不同比例杜仲叶水提物对湘西土鸡体重、免疫器官的发育及免疫力均有一定促进和提高作用，但以添加0.15%的效果最好，但杜仲水提物促进湘西土鸡生长及提高其免疫功能的机制需进一步研究。