玉米芯栽培海鲜菇配方及后熟期比较试验

韩菊学

（河西学院人事处，甘肃张掖734000）

海鲜菇（Hypsizigus marmoreus）又名真姬菇、玉蕈、斑玉蕈，是我国食用菌工厂化生产的重要品种和最具发展潜力的食用菌新品种之一[1]。海鲜菇栽培原料营养成分、合理配比、后熟期是影响海鲜菇高产优质的重要因素。

近年来，海鲜菇原料棉籽壳价格上涨，因此筛选以玉米芯为主料培养料配方显得尤为重要。为此笔者首先对引进的两个海鲜菇菌株进行品种鉴定，并进一步进行适宜培养料配方筛选及最适后熟期试验，以期为当地工厂化栽培海鲜菇提供参考。

1 材料与方法

1.1 供试菌株

供试菌株由甘肃省应用真菌工程实验室提供，引自张掖贯党珍稀菇业有限公司，分别命名为海鲜菇1 号、海鲜菇2 号。原种、栽培种培养基：杂木屑78%，麸皮20%，白糖1%，碳酸钙1%。

1.2 供试配方

共设4 个培养料配方。配方1：玉米芯78%；配方2：玉米芯48%，棉籽壳10%，木屑20%；配方3：玉米芯38%，棉籽壳20%，木屑20%；配方4：玉米芯28%，棉籽壳30%，木屑20%；对照配方（CK）：棉籽壳38%，木屑40%。以上配方均添加麸皮15%，玉米面5%，石灰1%，石膏1%，料含水量65%。

1.3 试验方法

1.3.1 分子鉴定

将保存于4 ℃的海鲜菇母种在无菌条件下接在PDA培养基平板上，22 ℃避光培养直至长满平板，无菌操作刮取生长旺盛的菌丝，用真菌试剂盒提取菌株的基因组DNA；之后进行PCR扩增及检测[2]。

1.3.2 培养料配方筛选

选择新鲜干燥、无霉变的培养料，木屑须淋水堆制发酵2个月。按照配方配料，准确称取各材料，加水搅拌均匀，pH 8.0。选用折径17 cm×33 cm的低压聚乙烯塑料袋，每袋装料折干350 g左右。采用高压灭菌，在0.15 MPa 保持2.5 h。灭菌结束温度降至室温时转移到接种室接种，每一配方接种30袋，3次重复。接种后的料袋移至培养室，温度22～25 ℃，空气相对湿度为50%～65%，二氧化碳780～880 mg/m3，避光培养。养菌结束后继续培养15 d 后移至出菇室，保持室内空气相对湿度85%～95%，温度14～16 ℃ ，二 氧 化 碳 3 900～5 900 mg/m3，光 照 500～2 000 lx。采收时，观察记录子实体形态特征，测量计算平均菌柄长、平均菌柄直径、分支数（所有子实体个数/料袋数），并计算袋鲜菇产量和袋干菇产量，筛选出最适配方。

1.3.3 海鲜菇最佳后熟时间

以1.3.2 获得的最优配方为后熟期比较试验培养料配方。按1.3.2中的方法装袋、灭菌、接种、培养菌丝。待菌丝营养生长结束后，分别进行0、10、20、30、40、50、60 d 的后熟培养，每个处理重复 30 袋。观察菌丝色泽、长势和菌袋质地，并测定培养料的含水量和菌袋质量。菌袋质量：随机选取20 个菌袋，测其质量，取其平均值。培养料含水量：随机选取3个菌袋，每个菌袋单独混匀，称取5 g培养料，用AND MF-50水分测定仪，测其含水量，3个菌袋分别测3次重复，取平均值。

后熟期培养结束后转移至出菇房，参照1.3.2进行出菇管理。并记录现蕾时间，采收统计产量。

2 结果与分析

2.1 分子鉴定

2.1.1 DNA提取

对引进的两个菌株DNA 进行1%的琼脂糖凝胶电泳后，UVP 凝胶成像下可观察到两个菌株的DNA条带明亮完整，无拖尾现象。所获得的产物片段在750 bp 左右，符合基于PCR 反映的后续分子生物学方面的试验研究。

2.1.2 ITS-PCR扩增分析

将供试菌株的序列测定结果提交至GenBank（基因数据库），在NCBI（美国国家生物技术信息中心）网站上进行BLAST（生物大分子序列比对搜索工具）比对，结果表明，供试菌株为海鲜菇，且为两个不同品种。

2.2 供试配方对海鲜菇商品性状及产量的影响

表1 供试配方对海鲜菇1号商品性状及产量的影响

供试配方对海鲜菇菌柄、菌盖影响不大。海鲜菇1号菌柄长4.86～6.56 cm，菌盖直径1.25～1.76 cm；海鲜菇2 号菌柄长4.93～6.49 cm，菌盖直径1.17～1.74 cm。供试配方对海鲜菇分支数和产量的影响较大：海鲜菇 1 号，配方 4 分支数最多，为 59 个/袋，比分支数最少的配方1 多32 个/袋；海鲜菇2 号，配方4分支数最多，为65个/袋，比分支数最少的配方1多32 个/袋。海鲜菇1 号，配方4 鲜菇袋产量最高为369.61 g，比产量最低的 CK 多 95.54 g；海鲜菇 2 号，配方4 鲜菇袋产量最高为331.68 g，比产量最低的CK多54.70 g，达到显著差异水平。

表2 供试配方对海鲜菇2号商品性状及产量的影响

综合考虑，配方4（玉米芯28%，棉籽壳30%，木屑20%，麸皮15%，玉米面5%，石灰1%，石膏1%）为试验最佳配方。

2.3 后熟时间对海鲜菇生长发育的影响

2.3.1 后熟时间对海鲜菇菌丝生长发育的影响

由表3 可知，未经过后熟培养的菌丝，长势弱，色泽灰白，菌袋质地不紧实；后熟培养10～20 d，海鲜菇1 号、2 号的菌丝长势、色泽和菌袋质地均随着后熟培养天数的增加而有所改观。后熟培养20～40 d的菌丝长势最好，两菌株菌丝颜色洁白且菌袋质地紧实；后熟培养超过40 d 菌丝长势明显变弱，菌丝颜色较洁白，菌袋质地紧实度有所下降。这可能是因为后熟培养0～20 d，海鲜菇菌丝正处于营养生长转向生殖生长的过渡期，菌丝继续分解培养料，使菌丝的活力进一步增强；超过40 d 后，菌丝已完成后熟而趋于老化，加之培养时间过长易失水，从而使菌丝活力下降。综合考虑后熟时间为40 d 左右为宜，菌丝长势旺盛、颜色洁白、菌袋质地紧实。

表3 后熟时间对海鲜菇菌丝生长发育的影响

2.3.2 后熟时间对海鲜菇菌袋质量和含水量的影响

由表4可知，随着后熟时间的增加，菌袋质量逐渐降低，而含水量逐渐上升。后熟培养40 d 与30 d菌袋质量相比，海鲜菇1 号失重为9.92 g，海鲜菇2号失重为8.89 g；菌袋含水量的变化，后熟时间为30 d 与40 d 的含水量变化最大，后熟40 d 比后熟30 d 菌袋含水量海鲜菇1 号上升了3.96%，海鲜菇2号上升了2.14%。菌丝代谢活动旺盛，消耗培养料的养分，同时产生一定量的水分、二氧化碳和其他代谢产物，致使菌袋质量减少而含水量上升。由此可见，30～40 d的后熟时间段内菌丝生长还处于旺盛时期，会继续分解培养料积累养分，为出菇后子实体的生长提供营养物质。这与菌丝色泽、长势与菌袋质地的表现相一致。

图2 海鲜菇1号在供试配方中生长情况

图3 海鲜菇2号在供试配方中生长情况

表4 不同后熟时间对海鲜菇菌袋质量和含水量的影响

2.3.3 后熟时间对海鲜菇现蕾时间及产量的影响

表5 后熟时间对海鲜菇现蕾时间及产量的影响

由表5 可知，后熟培养能明显提高海鲜菇的袋产量，随着后熟天数的增加，鲜菇产量先增加后减少。海鲜菇1 号，后熟30 d、40 d 的产量高，分别为236.47 g、278.94 g，海鲜菇 2 号，后熟 30 d、40 d 的产量高，分别为239.52 g、281.42 g。未后熟培养（0 d）的菇蕾现蕾最晚，平均为17 d，且产量最低，海鲜菇1 号产量仅为 196.42 g，比后熟 40 d 少 82.52 g；海鲜菇 2 号含量仅为 199.65 g，比后熟 40 d 的少 81.77 g，达到差异显著水平；后熟培养50 d、60 d，虽然现蕾早，但产量无优势。工厂化栽培海鲜菇一般需要大型控温、控湿设备，故过长的后熟时间会增加生产成本。综合考虑，最适后熟时间以40 d左右为宜。

3 小结

甘肃张掖的玉米芯资源丰富，取材方便，因此在棉籽壳价格不断上涨的当下，用玉米芯栽培海鲜菇不仅降低生产成本，还实现了玉米芯资源化利用。试验筛选出最佳玉米芯栽培海鲜菇培养料配方（玉米芯28%，棉籽壳30%，木屑20%，麸皮15%，玉米面5%，石灰1%，石膏1%）和最适后熟时间（40 d），对玉米芯工厂化栽培海鲜菇具有现实指导意义。