嵊县花猪冻精配种繁育研究

2021-03-02章晓炜朱志伟马敏彪刘莉君王友杉

浙江畜牧兽医 2021年1期

章晓炜，朱志伟，马敏彪，刘莉君，王友杉

(1.浙江省畜牧技术推广与种畜禽监测总站，浙江杭州 310021；2.浙江省农业科学研究院畜牧兽医研究所； 3.绍兴市嵊花种猪有限公司)

畜禽遗传资源是生物多样性的重要组成部分，是维护国家生态安全、农业安全的重要战略资源，是畜牧业可持续发展的物质基础，畜禽遗传资源一旦灭绝，具有不可再生性。为有效应对非洲猪瘟威胁，2019年3月至10月期间，浙江省采集制作冻存了9个地方猪种83个家系，97头公猪的精液，共计9.3万剂，每剂0.25 mL，为确保我省地方猪种资源不丢失，作了很必要的资源储备。

为进一步评定地方猪精液冷冻保存效果与探索利用方式，本项目结合嵊县花猪国家级保种场实际需求，开展地方猪冻精配种繁育复群试验研究，旨在检验冷冻精液的配种效果，以及满足地方猪保种场扩充保种群体的实际需求开展本次研究。

1 材料和方法

1.1试验材料

1.1.1冷冻精液根据已制作冻精数量、保种资源场需求、饲养管理等因素，拟在嵊县花猪保种场开展冷冻精液配种繁育研究，该场有后备母猪20头，每个家系拟使用冻精数量详见表1。

1.1.2受体母猪嵊县花猪保种场有10个家系，每个家系拟配2头母猪，可配母猪20头，实际配种19头母猪。受试母猪达体成熟，性周期节律正常、健康状况良好，生殖器官无异常，免疫程序记录完整(受体母猪的体重大于60 kg、月龄在6月龄以上、初情期后观测2个发情期)。

1.1.3试验程序采用母猪定时输精程序中的同步处理方法：试验猪在发情间期内任一天开始投药记为第1天，每天14:00后在喂料之前以拌料投饲方式给后备母猪饲喂烯丙孕素20 mg/头，连续饲喂 18 d，第19天停药1 d。第20天08:00 给每头后备母猪肌肉注射PMSG 1 000 IU，第23天16:00给每头后备母猪肌肉注射GnRH 100 μg。第24天16:00对所有后备母猪进行第1次配种，第25天 08:00对所有后备母猪进行第2次配种，第26天上午对仍表现静立反应的母猪补配1次。

表1 拟使用的冻精家系数量及使用计划(实际配种19头)

1.1.4冻精解冻复苏 (1)稀释液准备：输精前提取稀释液30-40 mL在36 ℃水浴平衡20 min以上。(2)解冻步骤：提取冻精迅速投入50 ℃水浴锅中，来回摇晃8-10 s(或16 s)，拭干切口，倒入稀释液管，混匀，残留样预观活力，5-10 s，移入36 ℃水浴锅，装瓶恒温保存，待输。

1.1.5输精剂量按定时输精程序中查情点确认输精时间，采用“深部输精法(AI)”间隔12 h，2次/头的输精标准深部法导入复苏精液，剂量为20亿/40 mL的标准。

1.1.6B超早孕检查 AI操作实施猪只在正常情期18-20 d后观测是否发情，并在30 d左右进行B超早孕检查确认，若确认有早期孕囊的则判定为受胎，未怀孕的依据试验程序再次输精配种。

2 结果与分析

2.1库存冷冻精液质量检测冻精的保存质量及冻后品质和受精能力直接影响人工授精的成功率与母畜受胎率与产仔率。衡量精液冷冻后的主要技术指标为冻后复苏活力(直线运动精子的百分比率)。本试验实施期间，委托浙江大学动物科学学院检测。总体评价为：大部分样品冻后活力在0.30以上，冻精合格率为82.8%。

2.2稀释液配方解冻复苏的精子需要有一定能量、渗透压、pH的缓冲稀释液作为载体，以期通过稀释液获取能量，增加精子的运动能力提高受精率。稀释液配方：葡萄糖3.7 g，EDTA 8.125 g，二水柠檬酸三钠0.5 g，NaHCO30.125 g，KCl 0.0075 g，双抗1%，PVA，茶碱或咖啡因5 mM，稀释液pH 7.25，渗透压315 mOsm/L。

2.3后备母猪定时输精同步发情程序试验猪主要为后备母猪，由于初情期的不一致，自然发情周期无疑存在差异，为此，进行了后备母猪同期操作处理。按精准定时输精(投药+PMSG+GnRH)操作，实验结果显示：精准定时输精同步发情率达100%(15/15)(表2)，并顺利进行了深部输精冻精授配，受胎6头，受胎率为40%，证实此程序可以进行后备母猪同步发情处理。